图6

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钙网织蛋白缺陷细胞凋亡的诱导。野生型(wt)和钙网蛋白缺乏型(crt−/−)按照材料和方法建立小鼠成纤维细胞系。(A) 用RIPA缓冲液溶解细胞,用SDS-PAGE分离蛋白,转移到硝酸纤维素膜上,并用亲和纯化的兔抗钙网蛋白抗体进行检测。指出钙网蛋白(CRT)和Bio-Rad实验室分子质量标记的位置。(B) 野生型(wt)和钙网蛋白缺乏(crt−/−)在没有(开条)或有(填充条)staurosporine(STS)的情况下处理小鼠胚胎成纤维细胞30分钟,然后按照材料和方法中的描述进行Annexin-V结合试验。100%值对应10000个单元格。数据是两个独立实验的平均值±SD。在C中,野生型(wt)和钙网蛋白缺乏(crt−/−)用10μM足叶乙甙、10 nM staurosporine(STS)或UV处理小鼠胚胎成纤维细胞1分钟。根据材料和方法中的描述,通过曙红和苏木精染色细胞的光学显微镜测定凋亡百分比。统计意义重大:* P(P)< 0.001.