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图S5。Cy5-VacA毒素与天然毒素具有相同的细胞内转运和空泡化活性。（A-C）HeLa细胞在4°C下与Cy5-VacA孵育1 h，清洗，并在37°C下孵育指定时间。细胞被固定、渗透，并进行标记处理。A显示EEA1（绿色）和Cy5-VacA（红色）。B显示LAMP1（绿色）和Cy5-VacA（红色）。C显示抗VacA抗体标记（绿色）和Cy5-VacA（红色）。在每个面板中，右侧图像显示两个方框区域之间的颜色合并。（D） 用冰镇HBSS清洗三次后，将细胞在37°C的含5 mM NH的HBSS中培养5 h₄Cl允许液泡发育。未暴露于VacA的配对细胞单层，然后在37°C下在HBSS中单独培养5小时或含有5 mM NH₄Cl作为对照。通过ANOVA和Newman-Keuls’评估差异的统计显著性问-试验（Ricci，V.、A.Galmiche、A.Doye、V.Necchi、E.Solcia和P.Boquet，2000）。分子生物学。单元格。11:3897-3909). *, 第4卷。酸性活化的天然纯化VacA和碱性活化的Cy5标记VacA之间无统计学差异；x、 P（P）