图5。

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p38上的底物对接基序,但不是调节性磷酸化或p38的活性控制着与PRAK的对接互动。(A) 示意图p38α和p38β的结构显示了催化剂的位置p38上的结构域和基底对接基序。中的关键氨基酸残基这些图案以粗体字母呈现。p38(AF)和显示p38(nqn)。(B) HEK293细胞与多种如图所示,p38和GFP-PRAK表达载体的组合。细胞转染后24小时收集裂解物,并用抗滞后抗体M2。GFP-PRAK或p38标记在免疫沉淀物通过使用抗GFP或抗滞后抗体。(C) HEK293细胞被转染为B细胞荧光分析GFP-PRAK的亚细胞位置显微镜检查。(D) p38α或p38β突变体在如所示的HEK293细胞。转染后24小时,细胞用或不用TNF处理2小时。然后收集细胞裂解物用抗滞后抗体M2免疫沉淀。激酶活性以MBP为底物,采用免疫激酶法检测p38突变体。这个免疫沉淀物中等量的p38α或p38β是通过Western blotting测定。(E) HEK293细胞与p38突变体和GFP-PRAK表达载体的各种组合表明。转染后24小时,用收集细胞裂解物并进行免疫沉淀抗GFP抗体。测定GFP-PRAK的激酶活性通过免疫激酶分析3C公司.