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图1。

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内源性激素的亚细胞定位和胞质核穿梭普拉克。(A) HEK293和Hela细胞固定并用抗PRAK免疫染色一级抗体和FITC标记的二级抗体。代表显示每个染色的显微图像。PRAK主要位于休眠细胞的细胞质。(B) HEK293细胞未经任何处理(-),LMB(3 ng/ml)1小时,或TNF-α(100 nM)2小时,然后固定用抗PRAK抗体染色。PRAK在当核出口被LMB(中间面板)阻断时,观察到了核。TNF刺激降低了核PRAK(右侧面板,统计见正文分析)。(C) 用表达载体转染HEK293细胞GFP-PRAK公司。24小时后在荧光显微镜下观察GFP-PRAK转染。外源性表达的GFP-PRAK定位于细胞核。(D)用HA-PRAK表达载体转染HEK293细胞。细胞转染24小时后固定,并用抗PRAK原代抗体进行免疫染色抗体和FITC-标记的二级抗体。外源表达HA-PRAK定位于细胞核。(E) HEK293细胞转染表达GFP-PRAK载体与标记p38α或标记p38β。GFP-PRAK公司转染后24小时在荧光显微镜下观察。p38α和p38β的共表达使GFP-PRAK重新定位。(F) 高铁293细胞固定并用抗p38α或抗p38β免疫染色抗体和FITC-标记的二级抗体。

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