图3

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PRMT5项目mRNA在MCL细胞系中的翻译效率更高。(A类)正常和转化B细胞的多核糖体图谱。通过15–40%蔗糖梯度沉淀对全细胞裂解液进行分级,并通过测量每个部分在254 nm处的吸光度来确定多核糖体轮廓(上面板)。显示了代表40S、60S、80S和多核糖体的部分。从每个组分中分离的RNA用于测量PRMT5项目实时RT-PCR检测mRNA和β-肌动蛋白被用作内部控制来规范PRMT5项目各部分的mRNA水平(下面板)。金额PRMT5项目每个片段中存在的mRNA相对于含有最低拷贝数的片段进行报告PRMT5项目mRNA。每个图中的数据点表示三次RT-PCR反应的平均值±s.d。垂直箭头表示峰值多核糖体部分。(B、 C类)的差异表达PRMT5项目-正常和转化B细胞中的特异性miRNAs。的示意图PRMT5项目描绘3′UTR内潜在miRNA-结合位点位置的mRNA(B,上面板)。使用miR-92b、miR-96、miR-197或miR-607探针对从指示细胞分离的20μg(B)或5μg(C)总RNA进行RPA。探针代表每个反应中使用的标记探针总量的1/10,对照组显示探针在酵母tRNA存在下消化。包括溴化乙锭凝胶,以显示相等的负载。箭头显示成熟miRNAs的位置。