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《维罗尔杂志》。1996年9月；70(9): 5769–5776.
数字对象标识：10.1128/jvi.70.9.5769-5776.1996年
预防性维修识别码：PMC190590型
PMID：8709192

从负链转录物复制鼠冠状病毒缺陷干扰RNA。

M Joo先生,S班纳吉、和S马基诺
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摘要

小鼠冠状病毒-小鼠肝炎病毒（MHV）的阳性标记缺陷干扰（DI）RNA引入MHV感染细胞后，导致DI RNA复制和积累。我们研究了MHV DI RNA负链转录物的引入是否也会导致复制。在T7启动子下游和人类肝炎三角洲病毒核酶结构域上游，我们反向插入了MHV DI RNA的完整cDNA克隆；该质粒在体外合成的RNA中产生了MHV DI RNA的负链RNA拷贝。当DI RNA的逆链转录物通过痘苗病毒T7表达系统在MHV感染细胞中表达时，阳性的DI RNA积聚在质粒转染细胞中。DI RNA复制依赖于T7聚合酶的表达和T7启动子的存在。将体外合成的负链转录物转染到MHV感染的细胞中，并从RNA转染的细胞中连续传代病毒样本，也会导致DI RNA的积累，同时转染少量阳性标记的DI RNA和截短重复的阴性链转录物后，DI RNA没有积累；显然，DI RNA是从转染的负链转录物中复制的，而不是从可能被视为T7转录产物的微量阳性DI RNA中复制的。对转染负链转录物的细胞中的阳性标记DI RNA的序列分析表明，DI RNA保持了先导序列中引入的DI特异性独特序列。这些数据表明，MHV感染细胞中引入的负链转录物产生了阳性的DI RNA合成；利用MHV从转染的负链DI RNA转录物中证明DI RNA复制是所有阳性标记RNA病毒中的第一个此类证明。

全文

本文全文可作为PDF格式（928K）。

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