图2。

保存图片、插图等的外部文件。对象名为zjv0210683370002.jpg

从cDNA中恢复完整的传染性NNSV。顶部显示了一个编码副流感病毒完整抗原RNA的质粒。显示了基因外3′前导区和5′尾区,以及六个病毒基因:N,核蛋白;P、 磷蛋白、M、基质蛋白、F、融合蛋白、HN、血凝素-神经氨酸酶和L、大聚合酶亚单位。GS和GE转录信号分别在每个基因的开始和结束处显示为黑盒。抗原cDNA的左边是T7 RNA聚合酶的启动子(T7 pr.),右边是自裂核酶和T7终止子(T7tr.)。另外三个T7表达质粒编码重建生物活性核衣壳所需的N、P和L支持蛋白。T7 RNA聚合酶由携带巨细胞病毒启动子(CMV pr.)的共转染真核表达质粒提供。质粒被转染或电穿孔到细胞单层中,其中质粒表达的病毒RNA和蛋白质组分组装成功能性核衣壳并引发生产性感染。回收的病毒通过传代被放大,可以被斑块净化。