图3。

HMGI-Y和Sp1之间的物理关联。（A） SDS-PAGE共页³⁵S-Sp1与GST或GST-HMGI树脂结合（通道1至3），³⁵与GST或GST-Sp1树脂结合的S-HMGI（泳道4至6），以及³⁵S-Sp1在溴化乙锭（EtBr）存在下与GST-HMGI树脂结合（7到10道）。在通道3、6和10中，将标记的蛋白质直接添加到凝胶中，而不与GST-蛋白质树脂结合并从中洗脱。（B） HMGI-Y和Sp1的免疫沉淀（IP），方法是使用抗-HMGI-Y抗体，然后在重复相同的转移后，使用抗-Sp1抗体（1到5道）或抗-HMGI-Y抗体（6到10道）进行免疫印迹。车道：1，10 ng纯HMGI-Y；2、10ng纯Sp1；3、HepG2核提取物（NE；500μg）；4、HMGI-Y和Sp1（各20 ng）。在通道1和通道2中，蛋白质直接应用于凝胶，而不与蛋白A珠结合和洗脱。为了证明特异性，使用纯Sp1（20 ng）通过抗HMGI-Y抗体进行免疫沉淀（第5道，对照）。（C） HMGI-Y和Sp1内相互作用域的定位。³⁵S-Sp1或³⁵S-HMGI分别与含有归一化量野生型和各种突变型GST-HMGI或GST-Sp1的树脂孵育。特异性结合的蛋白质通过SDS-PAGE进行解析，并通过放射自显影进行可视化。（D） HMGI和Sp1.+的结构域，基本重复；−，酸性C端尾；R、 抑制域；A、 B、C和D，激活结构域；黑色条纹，锌指图案。数字对应与文本相关的氨基酸位置。