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图6。Hrs过表达内体的电子显微镜。(A类)来自未转染BHK细胞的早期内体在固定前已内吞5 nm BSA–金(箭头)10分钟。(B类)Hrs在myc-Hrs转染的BHK细胞中的定位,该细胞在固定前内吞了5 nm BSA–金(箭头)1小时。解冻后的冰冻切片用抗myc抗体标记,然后用兔抗鼠抗体和15nm蛋白A-金标记。注意Hrs-阳性隔间的涂层外观和聚集。(C)甲氰菊酯在myc-Hrs转染细胞中的免疫电镜定位。解冻的冷冻切片使用兔抗网格蛋白LC(10nm金)进行双重标记,然后使用小鼠抗myc和兔抗小鼠抗体(15nm金)。标记显示,氯氰菊酯定位于特征性myc-Hrs诱导的内胚层。(C,插图)一个涂有甲氰菊酯的凹坑,标记有山羊抗甲氰菊酯,然后是兔抗羊蛋白和15纳米蛋白A–金。(D类)Eps15在myc-Hrs转染细胞中的免疫电镜定位。解冻冷冻切片用抗Eps15(10 nm蛋白A–金)双重标记,然后标记myc表位(15 nm蛋白A-金)。特征性Hrs-阳性的内胚层上有一个强的Eps15标记。(E类)myc-Hrs转染细胞中动态蛋白的免疫电镜定位。将内吞5 nm BSA–金1 h的细胞(箭头)解冻冷冻切片,用小鼠抗动力蛋白1抗体(Hudy 1)标记,然后用兔抗鼠抗体和15 nm蛋白A–金(箭头)标记。在因Hrs过度表达而表现出包衣内体特征性聚集的细胞中,dynamin的标记定位于内胚层以及质膜上典型的网格蛋白包衣凹坑(CP,插图)。条形,200 nm。