图1。C₂神经酰胺诱导细胞凋亡。(A类)HeLa细胞在添加1 mM Ca的KRB中保存²⁺（1 mM钙²⁺/KRB），并用10µM神经酰胺（+Cer）进行激发。16小时后用相差显微镜测定活细胞数。活细胞的百分比显示在右上角。神经酰胺诱导HeLa细胞caspase活化(B). 细胞与神经酰胺孵育16 h，细胞裂解物的caspase-3样活性按照材料和方法中的详细说明进行测量，并表示为荧光任意单位。caspase抑制剂Ac-DEVD-CHO（inh.）也被用于显示caspase-3样活性的特异性。Bcl-2过表达保护细胞免受C₂神经酰胺诱导的细胞死亡(C). HeLa细胞与Bcl-2和mtGFP表达质粒共转染。转染后36小时，细胞受到神经酰胺浓度增加（从0µM到20µM）的挑战，并通过活GFP表达细胞的显微镜计数评估生存能力（详情见正文）。单用mtGFP不影响细胞存活率。为了消除在将盖玻片转移到荧光显微镜室期间因死亡细胞脱落而可能出现的错误，评估了Bcl-2表达对细胞存活的影响，并表示为显微镜视野中荧光细胞的百分比。数据是至少重复五次实验的三次测定的平均值±SD。