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状态 |
2017年10月12日公开 |
职务 |
OAB-10型 |
样品类型 |
SRA公司 |
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源名称 |
办公自动化
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有机体 |
苏斯克罗法 |
特点 |
母系品种:丹麦长白×大白×杜洛克 发育阶段:仔猪 治疗:广谱抗生素 组织:远端小肠
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提取的分子 |
基因组DNA |
提取协议 |
小猪被戊巴比妥钠(200mg/kg,i.a.)安乐死。胃肠道立即切除。仔细清空小肠内容物并称重。从远端小肠的中部,将小块快速冷冻在液氮中,并保持在−80°C,以便稍后分析DNA甲基组和炎性细胞因子。 使用DNeasy Blood&Tissue Kit(Qiagen)从上述14个远端肠组织中提取基因组DNA,并进行RRBS文库制备。简单地说,用MspI酶(NEB)消化1.5µg基因组DNA,然后进行末端修复、A-碱基拖尾和5-甲基胞嘧啶修饰的适配器连接。进行大小选择以获得MspI消化产物40-250bp范围的DNA部分。然后,按照制造商的说明,使用ZYMO EZ DNA甲基化金试剂盒™进行亚硫酸氢处理。进行12个PCR周期以富集DNA片段,其中每个文库与DNA索引整合。文库由安捷伦2100生物分析仪和QPCR进行分析,以进行质量控制。然后在Hiseq 2500平台上对文库进行配对125bp多重测序。
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图书馆战略 |
亚硫酸氢盐-当量 |
库源 |
基因组学 |
库选择 |
简化表示 |
仪器型号 |
Illumina HiSeq 2500公司 |
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描述 |
三头母猪(丹麦长白猪×大白猪×杜洛克猪)的仔猪在早产时剖腹产下(第106天或妊娠期的90%)
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数据处理 |
原始测序数据由Illumina碱溶管道处理。数据分析中省略了每次读取包含30%以上N或10%以上序列的低质量读取,这些读取具有低质量值(质量值<20)。 使用BSMAP v2.73将干净的读数与NCBI猪参考基因组(Sscrofa10.2)对齐,以确定甲基胞嘧啶(mC)。 在末端包含至少一个酶消化位点的唯一映射读数用于进一步分析。 基因组构建:Sscrofa10.2 补充文件format_and_content:Cout文件包括染色体ID、C位点坐标、甲基化读取和非甲基化读取的数量: (1) 染色体 (2) 坐标(基于1) (3) 股(+/-) (4) 类型(CG/CHH/CHG) (5) 序列上下文(Watson链方向上游2nt到下游2nt) (6) 甲基化比率,计算为#C_counts/#eff_CT_counts (7) 该位点上的有效总C+T计数(#eff_CT_counts) (8) 该位点上的总C计数数(#C_counts) (9) 此locuso上的总C+T计数(#CT_counts) (10) 反向链轨迹上的总G计数数(#rev_G_counts) (11) 反向链轨迹上的总G+A计数(#rev_GA_counts) (12) 甲基化率95%置信区间的下限,由二项比例的Wilson评分区间计算得出。 (13) 甲基化率95%置信区间的上界,由二项比例的Wilson评分区间计算得出。
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提交日期 |
2016年10月13日 |
上次更新日期 |
2019年5月15日 |
联系人姓名 |
德胜宫 |
电子邮件 |
gds19870718@163.com
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组织名称 |
深圳农业基因组研究所
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街道地址 |
鹏飞路7号
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西蒂 |
深圳 |
邮政编码 |
518120 |
国家 |
中国 |
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平台ID |
GPL19176型 |
系列(1) |
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关系 |
生物样品 |
SAMN05905696号 |
SRA公司 |
SRX2242789型 |