AccuSignal™核酸酶ELISA试剂盒用于杂质检测

• 生物药品生产中的杂质检测。
• AccuSignal™核酸酶ELISA试剂盒用于敏感可靠地定量治疗产品中的核酸酶，包括DENARASE®、苯甲酸酶®和涡轮核酸酶。
• 提供宽广的定量光谱，保持出色的稀释线性，在多种核酸酶浓度的结果准确性上建立信任。
• 提供一致且可重复的结果，其特点是最小的内部和内部差异。
• 量身定制的抗体特异性允许应用于不同的材料，适应来自多个供应商的各种核酸酶产品。
• 成分：96层板条、板条封闭剂、核酸酶标准物、生物素化检测抗体、链霉亲和素-HRO（100X）、缓冲液。

• 微孔板振动器（最高转速450 rpm）
• 间隔计时器
• 多通道移液器（50-300µL）
• 精密单吸管（10µL、35µL，100µL和1000µL等）
• 一次性吸管头
• 去离子水
• 一次性微型离心管或微孔板
• 聚丙烯离心管（15 mL）
• 分光光度计微孔板读数器（450 nm吸光度，630–650 nm参考滤光片）
• 一次性手套
• 量筒
• 试剂库
• 漩涡混合器
• 搅拌板和磁力搅拌棒
• 吸水纸

核酸酶ELISA试剂盒是一种重要的工具，专门设计用于敏感和稳健地量化治疗产品中核酸酶的数量，包括DENARASE®、苯并酶®和涡轮核酸酶。该试剂盒采用夹心ELISA格式，利用预固定化抗核酸酶抗体的特异性和亲和力。生物素偶联检测与链霉亲和素HRP相结合，确保了无与伦比的灵敏度，能够准确测量各种治疗材料中的核酸酶。它有助于评估生物衍生疗法中的核酸酶含量，确保其在整个制造过程中的稳定性和质量。此外，它有助于评估基因治疗载体中的核酸酶，这是保持这些载体完整性以实现有效治疗性基因传递的关键因素。它还有助于验证药物配方中的核酸酶水平，保护其效力并防止潜在降解。核酸酶ELISA试剂盒通过提供可靠和标准化的核酸酶定量方法，不仅确保符合严格的监管要求，还加快了研发进程。

AccuSignal™核酸酶ELISA试剂盒的主要应用领域

生物疗法：评估生物来源疗法中的核酸酶水平，以确保其在生产过程中的稳定性和质量。

基因治疗载体：有助于评估基因治疗载体中核酸酶的存在，这对于保持其完整性以成功进行基因递送治疗至关重要。

疫苗生产：确认药物制剂中核酸酶的浓度，以确保其有效性并防止潜在的降解。

用户友好的方法和强大的方法简化了工作流程，使科学家能够信心十足地专注于推进治疗创新。作为一种不可或缺的仪器，它可以提高评估治疗产品中核酸酶的准确性、可靠性和效率，同时确保安全性和有效性。

标准品和试样的制备

1. 用1.0 mL去离子水重新配制标准小瓶，以获得200 ng/mL的最终浓度。
注：这是“参考储备溶液”，将在下文中用于制定标准。
2. 准备标准稀释液。
3. 应根据每个样品的经验确定标准，在核酸酶试剂盒样品缓冲液中稀释测试样品。

1. 将110µL结合抗体添加到11 mL样品缓冲液中，用于全96周分析。
2. 用吸管或倒置搅拌均匀。不要旋转。
3. 按照分析程序中的说明分发抗体工作液。

1. 将110µL链霉亲和素HRP分别添加到11 mL样品缓冲液中，用于全96周分析。
2. 用移液管或倒置法充分混合。不要旋转。
3. 按照分析程序中的说明分发链霉亲和素HRP工作溶液。

1. 向450 mL去离子水中添加50 mL核酸酶试剂盒清洗缓冲液（10X）。
2. 使用磁力搅拌棒搅拌至少10分钟。

1. 向每个孔中添加100µL未知或标准样品，并在室温下培养60分钟，在摇床上以每分钟450转（rpm）的速度摇晃。
2. 用清洗缓冲液清洗井，如下所示：
• 手动向下用力快速倒入井中。液体应收集在设计用于收集废物的容器中。将微孔板的开口朝下，用吸水纸轻敲微孔板，去除微孔板上的所有残留试剂。
• 用多通道移液器将300µL洗涤缓冲液注入每个孔。
• 用力快速向下移动，从井中倒出洗涤缓冲液。将微孔板的开口朝下，用吸水纸轻敲微孔板，去除微孔板上的所有残留溶液。
• 再重复步骤ii和iii两次（共三次清洗）。在每个洗涤步骤中，不要在井中留下任何残留水分。
3. 向每个孔中加入100µL检测抗体工作溶液
4. 在室温下孵育60分钟，盖上盖子避光，以450 rpm的转速摇晃。
5. 培养60分钟后，用洗涤缓冲液清洗，如下所示：
• 手动向下用力快速倒入井中。液体应收集在设计用于收集废物的容器中。将微孔板的开口朝下，用吸水纸轻敲微孔板，去除微孔板上的所有残留试剂。
• 用多通道移液器将300µL洗涤缓冲液注入每个孔。
• 用力快速向下移动，从井中倒出洗涤缓冲液。将微孔板的开口朝下，用吸水纸轻敲微孔板，去除微孔板上的所有残留溶液。
• 再重复步骤ii和iii两次（共三次清洗）。在每个清洗步骤中，不要在井中留下任何残留水分。
6. 向每个孔中添加100µL链霉亲和素HRP工作溶液
7. 在室温下孵育20分钟，盖上盖子避光，以450 rpm的转速摇晃。
8. 培养20分钟后，用洗涤缓冲液清洗，如下所示：
• 手动向下用力快速倒入井中。液体应收集在设计用于收集废物的容器中。将微孔板的开口朝下，用吸水纸轻敲微孔板，去除微孔板上的所有残留试剂。
• 用多通道移液器将300µL洗涤缓冲液注入每个孔。
• 用力快速向下移动，从井中倒出洗涤缓冲液。将微孔板的开口朝下，用吸水纸轻敲微孔板，去除微孔板上的所有残留溶液
• 再重复步骤ii和iii两次（总共3次洗涤）。在每个清洗步骤中，不要在井中留下任何残留水分。
9. 接下来，每孔室温TMB溶液添加100µL，并在室温下用TMB溶液培养板20分钟（遮盖并避光）。
10. 然后，每孔加入100µL停液。轻轻敲打平板以混合，确保没有形成气泡，并在停止反应后5分钟内读取平板。
11. 在平板阅读器上，测量450 nm处的吸光度，参考波长设置为630-650 nm。

按照以下步骤估计测试样品的核酸酶浓度。

1. 使用以下公式计算相对外径450：相对外径450=（油井外径450）-（油井外径630-650 nm）
2. 计算每个标准溶液的复制品的平均相对OD 450。
3. 将标准溶液数据绘制为每个标准溶液（Y）的平均相对OD 450与标准溶液的相应浓度（X）。
4. 用4参数逻辑（4-PL）曲线拟合标准溶液数据。重量乘以1/Y^2用于生成4-PL曲线
5. 使用标准曲线的插值估计每个测试样品井的核酸酶浓度。计算每个样品溶液浓度的平均值。