抗-Histone H3(单甲基K4)抗体-ChIP等级(ab8895)
主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3(单甲基K4)-ChIP级 适用人群:ICC/IF、ChIP、WB、IHC-P 反应对象:小鼠、大鼠、奶牛、人类 同位素:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆到组蛋白H3(单甲基K4)-ChIP级 -
寄主物种 兔子 -
特异性 针对组蛋白H3的单甲基赖氨酸4。 不识别二甲基或三甲基赖氨酸4,也不识别赖氨酸9的甲基化。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、奶牛、人类 预计用于: 猪、酿酒酵母、四膜虫、非洲爪蟾、黑腹果蝇、植物、哺乳动物、恶性疟原虫、热带爪蟾和白色念珠菌 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 约1340 ) -
阳性对照 ChIP:由U-2 OS细胞制备的染色质; 转移性透明细胞肾癌细胞(M1A)。 WB:小牛胸腺组蛋白; 赫拉; NIH3T3; PC12公司 ICC/IF:HeLa细胞。 IHC-P:人类结肠组织。
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一般注意事项 了解ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体、协议等 ChIP分析指南 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否符合您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 运输温度为4°C。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
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兼容的辅助设备 -
对照肽 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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目标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA的可及性是通过组蛋白的一组复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发育阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后 修改 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 被CUL4-DDB-RBX1复合物泛素化以响应紫外线照射。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
手机定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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替代名称 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图像
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根据Abcam X-ChIP协议,从U-2 OS细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab8895(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 免疫沉淀DNA在GAPDH和ALDOA(活性)和MYO-D(非活性)启动子以及y-Actin基因(活性)上定量。 图的顶部显示了y-Actin基因的示意图。黑盒子代表外显子,细线代表内含子。 PCR产物被描述为基因下的棒状物。 -
所有车道: 抗-Histone H3(单甲基K4)抗体-ChIP等级(ab8895),1µg/ml 车道1: 0.5µg小牛胸腺组蛋白 车道2: 10µg HeLa Nuclear–Triton®声波风廓线仪制备 3号车道: NIH3T3 Nuclear–Triton®声波风廓线仪(10µg)制备 车道4: 10µg PC12核 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/50000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 阻塞缓冲区:2%BSA 凝胶类型:MES -
所有车道: 1/500稀释的ChIP级抗组蛋白H3(单甲基K4)抗体(ab8895) 车道1: 小牛胸腺组蛋白裂解物 车道2: 小牛胸腺组蛋白裂解物与人组蛋白H3(单甲基K4)肽( 约1340 )浓度为1µg/ml 3号车道: 小牛胸腺组蛋白裂解物与人类组蛋白H3(二甲基K4)肽( 约7768 )浓度为1µg/ml 车道4: 小牛胸腺组蛋白裂解物 人组蛋白H3(三甲基K4)肽( ab1342号 )浓度为1µg/ml 车道5: 小牛胸腺组蛋白裂解物与人类组蛋白H3(单甲基K9)肽( 公元1771年 )浓度为1µg/ml 车道6: 小牛胸腺组蛋白裂解物与人类组蛋白H3(单甲基K27)肽( 约1780年 )浓度为1µg/ml 7号车道: 小牛胸腺组蛋白裂解物 人类组蛋白H3(未修饰)肽( 约2903 )浓度为1µg/ml 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/5000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际频带大小与预测的不同? 暴露时间: 2分钟 ab8895对组蛋白H3的单甲基化赖氨酸4具有特异性,不识别二甲基或三甲基赖氨酸,也不识别赖氨酸9的甲基化。 如通道2所示,抗体的活性被免疫肽的添加所特异阻断( 约1340 ). -
ab8895染色HeLa细胞组蛋白H3(单甲基K4)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab8895以1µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
在Leica Bond上进行的人类结肠福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab8895染色组蛋白H3(单甲基K4)的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用0.5µg/ml的ab8895培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 阴性对照组未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
利用转移性透明细胞肾癌细胞(M1A)中ab8895结合组蛋白H3(单甲基K4)进行ChIP分析。 用1%甲醛交联细胞10分钟。 样品与一级抗体以1/100的稀释度在4°C下孵育12小时。 阳性对照:转移性透明细胞肾癌细胞(M1A)。 阴性对照:父母透明细胞肾癌细胞(786-O)。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
参考文献 (1044)
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