概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:外显子3中插入1 bp。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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存储说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255479-人CD9敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255552-人类野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12,13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
目标
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功能 参与血小板活化和聚集。 调节偏执连接的形成。 参与细胞粘附、细胞运动和肿瘤转移。 精卵融合所需。 -
组织特异性 由多种造血细胞和上皮细胞表达。 -
序列相似性 属于tetraspanin(TM4SF)家族。 -
翻译后 修改 蛋白质有三种形式,分子量在22至27kDa之间,已知携带共价连接的脂肪酸。 -
细胞定位 膜。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 四Spanin 29 5小时9 5H9抗原
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KO细胞系 -
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应用
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图像
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车道1: 野生型HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物20μg 车道2: CD9敲除HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液20μg 3号车道: A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物20μg 车道4: MCF7(人乳腺癌细胞系)全细胞裂解物20μg 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约263019 在18 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55kDa时观察到。 约263019 Western blot显示与野生型HeLa细胞中的CD9反应,在CD9敲除细胞系中观察到信号丢失 约255375 (CD9敲除细胞裂解物ab263754)。 对野生型HeLa和CD9敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约263019 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4点过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物20μg 车道2: CD9敲除HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液20μg 3号车道: A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物20μg 车道4: MCF7(人乳腺癌细胞系)全细胞裂解物20μg 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab236630型 在18 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55kDa时观察到。 ab236630型 Western blot显示与野生型HeLa细胞中的CD9反应,在CD9敲除细胞系中观察到信号丢失 约255375 (CD9敲除细胞裂解物ab263754)。 对野生型HeLa和CD9敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约236630 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4点过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HeLa(无DTT)细胞裂解物20μg 车道2: CD9敲除HeLa(无DTT)细胞裂解液20μg 3号车道: A549(非还原性)细胞裂解物20μg 车道4: MCF7(非还原性)细胞裂解物20μg 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约58989 在24 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])在55kDa下观察到。 约58989 在Western印迹中显示与野生型HeLa细胞中的CD9反应,在CD9敲除细胞系中观察到信号丢失 约255375 (CD9敲除细胞裂解物ab263754)。 对野生型HeLa和CD9敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 约58989 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])于4时过夜 ° C分别为1μg/ml和1:20000稀释度。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子3插入1 bp
协议
数据表和文件
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