概述
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产品名称 人ACP1(酸性磷酸酶)敲除HEK-293细胞系 -
亲代细胞系 HEK-293型 -
有机体 人类 -
突变描述 CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=1 bp插入; 帧移位=100% -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS),Western Blot(WB) -
经过测试的应用程序 -
生物安全水平 2 -
一般注意事项 建议控制: 人野生型HEK-293细胞系( ab259776年 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供能够在复活时增殖的活细胞。
属性
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 肾 -
单元格类型 上皮的 -
性别 女性 -
无支原体 是的 -
储存说明 干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储缓冲区 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
目标
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功能 作用于酪氨酸磷酸化蛋白、低分子量芳基磷酸盐以及天然和合成酰基磷酸盐。 异构体3不具有磷酸酶活性。 -
组织特异性 T淋巴细胞只表达亚型2。 -
序列相似性 属于低分子量磷酸酪氨酸蛋白磷酸酶家族。 -
手机定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息
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KO细胞裂解物 -
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应用
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图像
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所有车道: 抗酸磷酸酶抗体[EPR21791]( ab235449号 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293(来自胚胎肾的人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: ACP1敲除物HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: K562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞系)全细胞裂解物 车道4: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab235449号 在18 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 ab235449号 western blot显示与野生型HEK-293细胞中的酸性磷酸酶反应,在ACP1敲除细胞系ab261859(敲除细胞裂解物 约261668 ). 对野生型和ACP1敲除的HEK-293细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 ab235449号 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释度分别为1/1000和1/2000。 将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗酸磷酸酶/ACP1抗体[EPR9839]( 公元166896年 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: ACP1敲除HEK-293(来自胚胎肾的人上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: K562(人慢性粒细胞白血病淋巴母细胞系)全细胞裂解物 车道4: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 公元166896年 在18 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 公元166896年 显示在野生型HEK-293细胞中识别ACP1(酸性磷酸酶1),因为ACP1敲除细胞系ab261859(敲除细胞裂解物 约261668 ). 在野生型和敲除型样品中观察到其他交叉反应带。 野生型和ACP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 膜被3%的牛奶堵塞。 Ab166896和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/1000和1/20000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗酸磷酸酶/ACP1抗体[EPR9838(2)]( 约180524 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: ACP1敲除物HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: K562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞系)全细胞裂解物 车道4: 宫颈腺癌人上皮细胞系HeLa全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约180524 在18 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 约180524 在野生型HEK-293细胞中显示与ACP1(酸性磷酸酶1)特异性反应,因为ACP1敲除细胞系ab261859(敲除细胞裂解物 约261668 ). 野生型和ACP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 膜被3%的牛奶堵塞。 Ab180524和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗酸磷酸酶抗体[EPR21787]( ab235448号 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: ACP1敲除物HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: K562(人慢性粒细胞白血病淋巴母细胞系)全细胞裂解物 车道4: 宫颈腺癌人上皮细胞系HeLa全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab235448号 在18 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab235448号 在野生型HEK-293细胞中显示与ACP1(酸性磷酸酶1)特异性反应,因为ACP1敲除细胞系ab261859(敲除细胞裂解物 约261668 ). 野生型和ACP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 膜被3%的牛奶堵塞。 Ab235448和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/1000和1/20000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
X=1 bp插入
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载