主要功能和细节
ADP-核糖基化因子抑制剂 CAS编号:20350-15-6 在DMSO中溶解至50 mM 形式/状态:实心 来源:短花真青霉
概述
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产品名称 Brefeldin A,ADP-核糖基化因子抑制剂 -
说明 ADP-核糖基化因子抑制剂 -
替代名称 抗坏血毒素 博鳌亚洲论坛 青霉素 德克宾
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生物学描述 蛋白质从内质网向高尔基体转运的可逆抑制剂。 抑制细胞溶质外壳蛋白、β-COP和ADP-核糖基化因子(ARF)与高尔基体膜的结合,并抑制GDP-GTP交换。 -
CAS编号 20350-15-6年 -
化学结构
属性
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化学品名称 (1 R(右) ,2 E类 ,6 S公司 ,10 E类 ,第11页 S公司 ,13 S公司 ,第14页 R(右) )-1,13-二羟基-6-甲基-1,6,7,8,9,11a,12,13,14,14-二氢-4 H(H) -环戊烷[ 如果 ]氧代环糊精-4-酮 -
分子量 280.36 -
分子式 C 16 H(H) 24 O(运行) 4 -
PubChem标识符 5287620 -
储存说明 储存温度为-20°C。 储存在干燥条件下。 产品可储存长达12个月。 -
溶解性概述 在DMSO中溶解至50 mM -
搬运 尽可能在同一天准备和使用解决方案。 然而,如果您需要提前配制储备溶液,我们建议您将溶液作为等分溶液保存在-20°C的密封小瓶中。 一般来说,这些设备最多可使用一个月。 在使用之前和打开小瓶之前,我们建议您让产品在室温下平衡至少1小时。 有毒,请参阅SDS了解更多信息。 需要更多关于溶解性、使用和处理的建议吗? 请访问我们的 常见问题(FAQ)页面 了解更多详细信息。 -
微笑 O[C@@H]1C[C@H]2[C@H](O)C=CC(=O)O[C@@H](C)CCCC=C[C@@H]2C1 -
来源 短花真青霉 -
研究领域
应用
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图像
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ADP-核糖基化因子抑制剂ab120299 Brefeldin A的二维化学结构图 -
约84340 用ICC/IF对经布雷费尔丁A(ab120299)处理的MCF7细胞中的高尔基-97进行染色。如文献所述,高尔基-99表达的增加与布雷费尔德丁A浓度的增加相关。 细胞在37°C下在含有不同浓度ab120299(brefeldin A)的DMSO培养基中培养1.5小时,室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下使用含有10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 用 约84340 (5µg/ml)在含1%BSA和0.1%吐温的PBS中于4°C下过夜。 DyLight 488羊抗兔多克隆抗体( 约96899 )以1/250稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI复染,显示为蓝色。 -
所有车道: 抗-MCP3抗体[EPR22649-155]( 约228979 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型RAW 264.7未经处理的对照细胞裂解物 车道2: 野生型RAW 264.7 PMA处理(80 nM,24 h)加LPS处理(100 ng/ml,6 h)和Brefeldin A(ab120299)处理(5µg/ml,5 h)细胞裂解液 3号车道: CCL7/MCP3敲除RAW 264.7未经处理的细胞裂解物 车道4: CCL7/MCP3敲除RAW 264.7 PMA处理的(80 nM,24小时)加LPS处理的(100 ng/ml,6小时)和Brefeldin A(ab120299)处理的(5µg/ml,5小时)细胞裂解物 车道5: J774A.1葡萄糖处理的(138.8 mMol/L,8 h)加上布雷费尔丁A处理的(5µg/ml,6 h)和布雷费尔德丁A(ab120299)处理的细胞裂解液 车道6: J774A.1葡萄糖处理的(5.6 mMol/L,8小时)加布雷费尔德素A处理的(5µg/ml,6小时)和布雷费尔德素A(ab120299)处理的(5µg/ml,5小时)细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 14千Da 为什么实际频带大小与预测的不同? 车道1-6: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约228979 在14 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约228979 Western blot显示与RAW 264.7野生型细胞中的MCP3反应,CCL7敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型和CCL7敲除RAW 264.7细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约228979 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗TNFα抗体[EPR22598-212]( 约255275 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型THP-1 Brefeldin A(ab120299)处理的(5µg/ml,4 h)细胞裂解物 车道2: 野生型THP-1 LPS处理液(100 ng/ml,16 h)和Brefeldin A(ab120299)处理液(5µg/ml,4 h)细胞裂解液 3号车道: TNFα敲除物THP-1布雷费尔丁A(ab120299)处理的(5µg/ml,4 h)细胞裂解物 车道4: TNFα敲除物THP-1 LPS处理后(100 ng/ml,16 h)和Brefeldin A(ab120299)处理后(5µg/ml,4 h)细胞裂解液 车道5: U937 PMA处理(10 mM,2天)加上16小时不处理和Brefeldin A(ab120299)处理(5µg/ml,4小时)细胞裂解液 车道6: U937 PMA处理(10 mM,2天)和LPS处理(1µg/ml,16小时)加Brefeldin A(ab120299)处理(5µg/ml,4小时)细胞裂解液 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 26千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约255275 在26 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约255275 Western blot显示与THP-1野生型细胞中的TNF-α反应,在TNF敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型和TNF敲除的THP-1细胞裂解物进行SDS-PAGE。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 ab255275磅 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗TNFα抗体[EPR19147]( 约183218 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型THP-1 Brefeldin A(ab120299)处理的(5µg/ml,4 h)细胞裂解物 车道2: 野生型THP-1 LPS处理液(100 ng/ml,16 h)和Brefeldin A(ab120299)处理液(5µg/ml,4 h)细胞裂解液 3号车道: TNFα敲除物THP-1布雷费尔丁A(ab120299)处理的(5µg/ml,4 h)细胞裂解物 车道4: TNFα敲除物THP-1 LPS处理后(100 ng/ml,16 h)和Brefeldin A(ab120299)处理后(5µg/ml,4 h)细胞裂解液 车道5: U937 PMA处理(10 mM,2天)加上16小时不处理和Brefeldin A(ab120299)处理(5µg/ml,4小时)细胞裂解液 车道6: U937 PMA处理(10 mM,2天)和LPS处理(1µg/ml,16小时)加Brefeldin A(ab120299)处理(5µg/ml,4小时)细胞裂解液 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 26千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约183218 在26 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约183218 Western blot显示与THP-1野生型细胞中的TNF-α反应,在TNF敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型和TNF敲除的THP-1细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约183218 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
约66579 对Raw264.7细胞中的TNF-α进行染色。 用LPS处理细胞7小时,用Brefeldin A(ab120299)处理最后3小时。 将细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS吐温透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下将细胞培养过夜 约66579 在1µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 ,羊抗兔IgG-H&L多克隆二级抗体(Alexa Fluor®488),以1/1000稀释度预先吸附(以绿色显示)和 ab150120型 ,小鼠IgG-H&L山羊多克隆次级抗体(Alexa Fluor®594),以1/1000稀释度预先吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)采集图像,显示单个共焦切片。 -
所有车道: 抗IP10抗体[EPR20764]( 约214668 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,6h)细胞裂解物 车道2: 野生型A549 IFN-y( ab259377号 )(100 ng/ml,32小时)和TNF-α( 约259410 )(10 ng/ml,32小时)和Brefeldin A(ab120299)处理的(最后6小时为5 ug/ml)细胞裂解物 3号车道: IP10敲除物A549 Brefeldin A(ab120299)-处理的(5ug/ml,6h)细胞裂解物 车道4: IP10淘汰赛A549 IFN-y( ab259377号 )(100ng/ml,32h)和TNF-α( 约259410 )(10ng/ml,32h)和Brefeldin A(ab120299)处理的(最后6h为5ug/ml)细胞裂解物 车道5: THP-1 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,6h)细胞裂解物 车道6: THP-1干扰素-y( ab259377号 )(200ng/ml,24h)和LPS(50ng/ml、24h)处理24小时,Brefeldin A(ab120299)处理(5ug/ml,最后6h)细胞裂解液 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 11千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约214668 在11 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 邮编:214668 western blot显示在野生型A549细胞中与IP10反应,在IP10敲除细胞系中观察到信号丢失 ab266971年 (敲除细胞裂解物 约256888 ). 对野生型和IP10敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在与孵育之前,将膜封闭在荧光蛋白质印迹(基于TBS)封闭溶液中 邮编:214668 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( 约216772 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗IP10抗体[EPR7850]( 约137018 )稀释1/500 车道1: 野生型A549 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,6h)细胞裂解物 车道2: 野生型A549 IFN-y( ab259377号 )(100 ng/ml,32小时)和TNF-α( 约259410 )(10 ng/ml)持续32小时,Brefeldin A(ab120299)处理(最后6小时为5 ug/ml)细胞裂解液 3号车道: IP10敲除物A549 Brefeldin A(ab120299)-处理的(5ug/ml,6h)细胞裂解物 车道4: IP10淘汰赛A549 IFN-y( ab259377号 )(100 ng/ml,32小时)和TNF-α( 约259410 )(10 ng/ml)持续32小时,Brefeldin A(ab120299)处理(最后6小时为5 ug/ml)细胞裂解液 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 11千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约137018 在11 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约137018 western blot显示与A549野生型细胞中的IP10反应,在IP10敲除细胞系中观察到信号丢失 ab266969年 (IP10敲除细胞裂解物 约256886 ). 对A549野生型和IP10敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 2018年12月13日 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,分别以1/500和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( 约216772 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗IL-6抗体[EPR21711]( ab233706型 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,4h)细胞裂解物 车道2: 野生型A549 IL-1ß( ab259387号 )(20 ng/ml,24h)和Brefeldin A(ab120299)处理的(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解液 3号车道: IL-6敲除物A549 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,4h)细胞裂解物 车道4: IL-6敲除物A549 IL-1ß( ab259387号 )(20 ng/ml,24h)和Brefeldin A(ab120299)处理的(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解液 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 25千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 40kDa(可能的非特异性结合) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab233706型 在25 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 ab233706型 western blot显示与野生型A549细胞中的IL-6反应,在IL-6敲除细胞系中观察到信号丢失 约273751 (敲除细胞裂解物 ab275501号 ). 对野生型和IL-6敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 邮编233706 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗IL-6抗体[EPR20653]( 约214429 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,4h)细胞裂解物 车道2: 野生型A549 IL-1ß( ab259387号 )(20 ng/ml,24h)和Brefeldin A(ab120299)处理的(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解液 3号车道: IL-6敲除物A549 Brefeldin A(ab120299)处理的(5ug/ml,4h)细胞裂解物 车道4: IL-6敲除物A549 IL-1ß( ab259387号 )(20 ng/ml,24h)和Brefeldin A(ab120299)处理的(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解液 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约214429 在25 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 约214429 western blot显示与野生型A549细胞中的IL-6反应,在IL-6敲除细胞系中观察到信号丢失 约273751 (敲除细胞裂解物 ab275501号 ). 对野生型A549和IL-6敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约214429 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。
协议
工具书类 (6)
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