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我对ChIP试剂盒(ab500)中提供的DNA纯化浆液的结合/洗脱条件有疑问。通过阅读协议,我不清楚从浆液中洗脱DNA的确切条件是什么。你能给我解释一下这种DNA纯化浆液的原理吗?这对我们的一些应用程序可能很重要。
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2013年2月25日被问及
DNA纯化浆液通常用于DNA提取。萃取是在水性碱性条件下进行的。在此环境中,浆液对重金属阳离子(如Ca2+、Mn2+和Mg2+)的亲和力增加。核DNA和RNA留在泥浆上方的水溶液中。使用浆液萃取的一个好处是,二价重金属可以在高温(例如100oC)下引起DNA损伤,去除离子可以减少这种担忧。此外,镁是核酸酶激活所必需的,结合这些离子会使酶失活,因此DNA将受到保护。在方案手册中E部分(DNA纯化)的步骤11-13中,通过离心来实现从浆液中洗脱DNA。
2013年2月25日答复