抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制(ab7291)
主要功能和细节
小鼠单克隆[DM1A]对α-管蛋白-负荷控制 适用于:ICC/IF、IHC-P、WB、Flow Cyt(Intra) 反应对象:小鼠、大鼠、人类 同位素:IgG1
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆[DM1A]对α-管蛋白-负荷控制 -
寄主物种 鼠标 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 预计用于: 鸡肉、豚鼠、仓鼠、奶牛、狗、猪、非洲爪蟾、沙鼠、非洲绿猴 -
免疫原 与鸡α-管蛋白相对应的全长天然蛋白(纯化)。 -
阳性对照 WB:HeLa、HEK293、HepG2、Caco2、NIH3T3、PC12细胞裂解物。 流动循环(内部):甲醇固定/吐温渗透HeLa细胞。 ICC/IF:Caco-2、NIH3T3和SV40LT-SMC细胞。 IHC-P:人类结肠和大鼠结肠组织。
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一般注意事项 该抗体克隆[DM1A]由Abcam制造。 作为蛋白质负载控制抗体非常好。 DM1A导致10nm的细丝崩塌成大的横向聚集物,聚集在细胞外围或紧密的近核帽。 它不会阻碍微管组装。 在体外,它不抑制血小板微管蛋白的聚合或解聚。 它阻断(70-80%)微管蛋白二聚体(与GppNHp结合)促进腺苷酸环化酶稳定抑制的能力。 有关上述内容的更多信息,请参阅参考资料。 如果您需要在特定的缓冲制剂或特定的缀合物中使用这种抗体进行实验,请联系 orders@abcam.com 或者您可以找到更多信息 在这里 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存温度为-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS,6.97%L-精氨酸 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化的G蛋白 -
净化注意事项 使用蛋白G纯化亲和性 -
初级抗体注释 作为蛋白质负载控制抗体非常好。 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 DM1A公司 -
同位素 IgG1 -
轻链型 卡帕 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
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应用
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目标
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功能 微管蛋白是微管的主要成分。 它结合两摩尔GTP,一个位于β链上的可交换位点,另一个位于α链上的不可变位点。 -
序列相似性 属于微管蛋白家族。 -
翻译后 修改 C末端的一些谷氨酸残基是多谷氨酸化的。 这种修饰只发生在谷氨酸残基上,并导致γ-羧基上的聚谷氨酸链。 由于人体中缺少功能性TTLL10,因此也会发生单甘醇化,但不会发生多甘醇化。 单糖基化主要局限于纳入轴突(纤毛和鞭毛)的微管蛋白,而谷氨酰化普遍存在于神经元细胞、中心粒、轴突和有丝分裂纺锤体中。 这两种修饰可以共存于相邻残基上的同一蛋白质上,并且降低糖基化水平会增加聚谷氨酰化,并相互作用。 这种修饰的确切功能尚不清楚,但它们调节轴突微管的组装和动力学。 Lys-40α链的乙酰化稳定微管,并影响微管马达的亲和力和加工能力。 这种修饰在多种细胞功能中发挥作用,从细胞运动、细胞周期进展或细胞分化到细胞内运输和信号传递。 -
手机定位 细胞质>细胞骨架。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 7277 人类 Entrez基因: 22145 鼠标 Entrez基因: 316531 老鼠 Omim公司: 191110 人类 瑞士保护银行: 第68366页 人类 瑞士保护银行: 第68368页 鼠标 瑞士保护银行: 问题5XIF6 老鼠 尤尼金: 75318 人类
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替代名称 α-管蛋白1抗体 ALS22抗体 B ALPHA 1抗体
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图像
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所有车道: 抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制(ab7291),稀释度为1/1000 车道1: HeLa细胞裂解物 车道2: PC12细胞裂解物 3号车道: SV40LT-SMC细胞裂解液 车道4: NIH/3T3细胞裂解物 车道5: 大鼠肝组织裂解物 车道6: 大鼠心脏组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( 约216772 )稀释1/20000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在52 kDa下观察到ab7291。 红色-装载控制, 约181602 ,在38 kDa时观察到。 对所有样品进行SDS-PAGE分析。 膜被3%NF牛奶堵塞。 ab7291和 约181602 (兔抗GAPDH负载对照)分别在1/1000和1/2000稀释度的4°C下孵育过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 约216772 和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 ab216777号 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
ab7291用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色人乳腺癌细胞系中的α-微管蛋白。 细胞被4%多聚甲醛固定在PBS中,用0.1%Triton X-100渗透到PBS中并用2%牛血清白蛋白封闭在磷酸钠缓冲液中。 细胞与抗中心蛋白共染色 约4448 稀释度为1:500,ab7291为1:500。 Alexa Fluor公司 ® 633山羊抗鼠和Alexa Fluor ® 用488只山羊抗兔(1:500稀释液)作为二级抗体。 DAPI用作细胞核复染。 具有双极或多极纺锤体的有丝分裂细胞的典型图像。 -
ab7291染色SV40LT-SMC细胞中的α-管蛋白。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),在0.1%Triton X-100中渗透5分钟,然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用工作浓度为0.5μg/ml的ab7291培养细胞 约190573 ,兔单克隆[EP1332Y]到α-管蛋白(Alexa Fluor ® 647,以红色显示)在1/250的温度下在+4°C下过夜,然后在室温下用抗鼠Alexa Fluor进一步孵育1小时 ® 488 ( ab150117号 )浓度为2μg/ml(显示为绿色)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在相同的测试条件下,该产品在100%甲醇(5分钟)固定的SV40电池中也发出阳性信号。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
在徕卡邦德(Leica Bond)上进行的人类结肠福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab7291染色α-管蛋白的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab7291,5ug/ml工作浓度培养切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 二级对照组中未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 *组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
ab7291染色Caco-2细胞中的α-Tubulin。 细胞用100%甲醇固定(5min),然后用1%牛血清白蛋白/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween封闭1h。 然后用1μg/ml的ab7291培养细胞 约6046 以1µg/ml的浓度在+4°C下过夜,然后在室温下用抗鼠Alexa Fluor进一步孵育1小时 ® 488 ( ab150117号 )2μg/ml(以绿色显示)和抗兔Alexa Fluor ® 594 ( 约150088 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 阴性对照: 1–兔一级抗体和抗鼠二级抗体。 2–小鼠一级抗体和抗兔二级抗体。 对照组1和2表明所用的一级和二级抗体之间没有非特异性反应。 -
ab7291染色NIH3T3细胞中的α-管蛋白。 细胞用100%甲醇固定(5min),然后用1%牛血清白蛋白/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween封闭1h。 然后用1μl/ml的ab7291培养细胞,并 约6046 以1µg/ml的浓度在+4°C下过夜,然后在室温下用抗鼠Alexa Fluor进一步孵育1小时 ® 488 ( ab150117号 )2μg/ml(以绿色显示)和抗兔Alexa Fluor ® 594 ( 约150088 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 阴性对照: 1–兔一级抗体和抗鼠二级抗体。 2–小鼠一级抗体和抗兔二级抗体。 对照组1和2表明所用的一级和二级抗体之间没有非特异性反应。 -
所有车道: 抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制(ab7291),1/2500稀释 1-2车道: Daudi(人类Burkitt淋巴瘤细胞系),剂量为10µg 3-4车道: Daudi(人类Burkitt淋巴瘤细胞系),15µg 5-6车道: Daudi(人类Burkitt淋巴瘤细胞系),20µg 次要 所有车道: 1/1000稀释的HRP缀合的单克隆山羊抗小鼠IgG 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 50千Da 暴露时间: 1分钟
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所有车道: 抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制(ab7291),1µg/ml 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 3号车道: PC12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗鼠IgG H&L(HRP)预吸附( 约97040 )稀释1/50000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 50千Da 暴露时间: 150秒 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝基纤维素膜上70分钟。 然后使用2%牛血清白蛋白封闭膜一小时,然后在4°C下与ab7291孵育过夜。 抗体结合使用 抗鼠HRP ( 约97040 ),并使用ECL开发解决方案进行可视化 约133406 -
使用FABP4一级抗体检测FABP4(绿色)( 约92501 ; 稀释1/1000)。 使用小鼠单克隆抗体(ab7291)检测α-微管蛋白(红色)。 细胞通过共焦显微镜成像,脂肪细胞样细胞使用z-stack。 -
在Leica Bond上进行的大鼠结肠福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab7291染色α-管蛋白的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下将该切片与工作浓度为0.5ug/ml的ab7291孵育15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 二级对照组中未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab7291染色的人HeLa细胞的ICC/IF图像。 将细胞甲醇固定(5分钟),并在室温下与抗体(ab7291,1µg/ml)孵育1小时。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor ® 488羊抗鼠IgG(H+L),以1/1000稀释液使用1小时。 图像-iT TM(TM) FX信号增强剂被用作主要阻断剂,5%BSA(TBS-T)用于所有其他阻断步骤。 DAPI染色细胞核(蓝色)。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于标记质膜(红色)。 -
用ab7291对人类细胞(U2OS)进行免疫荧光成像,发现α-管蛋白(绿色)的精细网络仅位于细胞质中。 细胞核被染成蓝色。 使用标准多聚甲醛技术进行IF (在PBS缓冲PFH 4%中固定5分钟,用0.5%triton-PBS渗透5分钟,再用5%牛奶/0.2%吐温封闭1小时。一级抗体在1/200的5%牛奶/0.2%tween中使用1小时,二级抗体Alexa 488使用30分钟。所有封闭和孵育步骤在37度下进行。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (1075)
塞姆GL 等。 一氧化氮驱动的硫臂修饰抑制α-酮酸脱氢酶。 自然化学生物 19:265-274 (2023). 公共医学:36266351 洛洛FN 等。 Caveolin-1漏斗形成了一个独特且快速的独立于Caveoline的机械适应系统。 Nat细胞生物学 25:120-133 (2023). 公共医学:36543981 彼得里克·HL 等。 在小鼠短期固定期间,膳食硝酸盐可保持线粒体生物能量学和线粒体蛋白质合成率。 生理学杂志 不适用:不适用(2023年)。 工作分解结构 ; 鼠标 . 公共医学:37293995 王X 等。 肌肉生长抑制素的缺失改变骨骼肌线粒体氧化磷酸化、TCA循环活性和ATP生成。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:36555347 豪泽N 等。 在肿瘤靶向治疗中开发内源性泛素蛋白酶体系统。 癌症(巴塞尔) 15:无(2022)。 公共医学:36612252