概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 HEK293吨 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9,在外显子2中插入1 bp,在外隐子2中插入选择盒实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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存储说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255537-人SNCA敲除HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 ab255553-人类野生型HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:8、9 D13S317:12、14 D7S820:11 D16S539:9、13 vWA:16、19 TH01:7、9.3 TPOX:11个 CSF1PO:11、12
目标
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功能 可能参与多巴胺释放和转运的调节。 诱导微管相关蛋白tau的纤维化。 降低神经元对各种凋亡刺激的反应性,导致caspase-3活化降低。 -
组织特异性 主要在大脑中表达,但在除肝脏外的所有检查组织中也以低浓度表达。 集中于突触前神经末梢。 -
参与疾病 SNCA的遗传改变导致异常聚合成纤维,与几种神经退行性疾病(联核蛋白病)有关。 SNCA纤维聚集物是阿尔茨海默病淀粉样斑块的主要非A-β成分,也是路易体内含物的主要成分。 在1型脑铁蓄积性神经退行性变的路易体(LB)样神经元内包涵体、胶质包涵体和轴突球体中也发现了它们。 帕金森病1 帕金森病4 路易痴呆体 -
序列相似性 属于突触核蛋白家族。 -
域 “阿尔茨海默病淀粉样斑块的非A-β成分”域(NAC域)参与原纤维的形成。 中间的疏水区域形成了纤丝的核心。 C末端可以调节聚集并决定细丝的直径。 -
翻译后 修改 磷酸化,主要是丝氨酸残基。 CK1的磷酸化作用似乎发生在不同于其他激酶磷酸化的残基上。 Ser-129的磷酸化在突触核蛋白病变中是选择性的和广泛的。 在体外,Ser-129的磷酸化促进了不溶性纤维的形成。 渗透胁迫下通过PTK2B依赖途径对Tyr-125进行磷酸化。 神经退行性同核蛋白病的标志性病变包含α-同核蛋白,该蛋白通过酪氨酸残基的硝化进行修饰,并可能通过二酪氨酸交联生成稳定的低聚物。 无所不在。 主要的共轭物是双泛素形式。 Met-1处的乙酰化对正确折叠和天然低聚物结构似乎很重要。 -
细胞定位 细胞质,胞浆。 膜。 核心。 细胞连接,突触。 保密。 多巴胺能神经元的膜结合。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 α-突触核蛋白 α-同核蛋白 α-同核蛋白,NACP140亚型
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KO细胞系 -
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应用
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图像
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车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20 ug) 车道2: SNCA敲除HEK-293T细胞裂解物(20ug) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约138501 在18 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 约138501 western blot显示重组抗α-同核蛋白抗体[MJFR1]与野生型HEK-293T细胞中的SNCA特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255433号 使用敲除细胞裂解物ab263769。 对野生型和SNCA敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约138501 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 o(o) C分别为1比10000和1比20000稀释度。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:选择盒插入外显子2; 等位基因-2:1bp插入外显子2
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载