概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9在外显子2中插入1 bp实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
注意事项 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab261954-人类FAS敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255929-人野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11,12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
目标
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功能 TNFSF6/FASLG受体。 适配器分子FADD将caspase-8招募到激活的受体。 由此产生的死亡诱导信号复合物(DISC)进行胱天蛋白酶-8蛋白水解激活,启动随后的胱天蛋白酶(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶)级联介导细胞凋亡。 FAS介导的凋亡可能在诱导外周耐受、抗原刺激的成熟T细胞自杀或两者兼有中发挥作用。 分泌的亚型2至6阻断细胞凋亡(体外)。 -
组织特异性 异构体1和异构体6在静息的外周血单核细胞中以相同水平表达。 激活后,同种型1增加,同种型6水平降低。 -
参与疾病 FAS缺陷是1A型自身免疫性淋巴增殖综合征(ALPS1A)的病因[MIM:601859]; 也称为Canale-Smith综合征(CSS)。 ALPS是一种儿童综合征,包括溶血性贫血和血小板减少症,伴有大量淋巴结病和脾肿大。 -
序列相似性 包含1个死亡域。 包含3个TNFR Cys重复序列。 -
域 包含参与FADD结合的死亡结构域,可能与其他细胞溶质适配器蛋白结合。 -
手机定位 分泌膜和细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 阿尔卑斯山1A 阿尔卑斯山1A APO 1号机组
查看所有内容
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KO细胞系 -
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应用程序
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图像
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车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: FAS敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约133619 在37 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 约133619 抗-Fas抗体[EPR5700]显示与野生型HeLa细胞中的Fas特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265260 使用敲除细胞裂解物ab256911。 对野生型和Fas敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约133619 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子2插入1 bp
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载