概述
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产品名称 Alexa Fluor®647型 荧光偶联试剂盒 (快速)-Lightning-Link® -
生产商 Alexa Fluor公司 ® 647共轭试剂盒/Alexa Fluor ® 647标签套件ab269823 Alexa Fluor采用简单快速的工艺 ® 647抗体标记/结合。 它还可以用于偶联其他蛋白质或肽。 了解我们的 抗体标记试剂盒及其优点 .
将抗体与Alexa Fluor偶联 ® 647使用此套件: -在抗体中添加修饰剂并孵育15分钟 -添加淬火剂并孵育5分钟 Alexa Fluor公司 ® 647结合抗体可立即用于WB、ELISA、IHC等。无需进一步纯化,抗体可100%回收使用。
了解以下缓冲区兼容性; 对于不相容的缓冲液和低抗体浓度,请使用我们的快速 抗体纯化和浓缩试剂盒 .使用 常见问题解答 了解更多有关该技术的信息,或将其他蛋白质和肽与Alexa Fluor结合的信息 ® 647
可根据需要提供高达100 mg的定制尺寸共轭试剂盒。 请联系我们讨论您的要求。 -
说明 该产品由Abcam公司Expedeon制造,之前称为Lightning-Link ® Rapid Alexa Fluor公司 ® 647标签套件。 337-0005与100µg粒径相同。 336-0010与3 x 100 ug尺寸相同。 336-0030与3 x 10 ug尺寸相同。 336-0005与100µg粒径相同。 336-0015与1 mg大小相同。 Alexa Fluor偶联抗体的数量和体积 ® 647 套件尺寸 推荐 抗体量 1 最大值 抗体量 最大抗体 体积 2 3 x 10微克 3 x 10微克 3 x 20微克 3 x 10微升 100微克 100微克 200微克 100微升 3 x 100微克 3 x 100微克 3 x 200微克 3 x 100微升 1毫克 1 x 1毫克 1 x 2毫克 1 x 1毫升 1 使用最大数量的抗体可能会导致每个抗体的标记更少。 2 理想的抗体浓度为1mg/ml。如果不超过最大抗体体积,可以使用0.5-1 mg/ml。 抗体>2mg/ml或<0.5mg/ml应稀释/浓缩。 共轭缓冲要求 缓冲液的pH值应为6.5-8.5。 兼容的缓冲成分 如果显示浓度,则成分应不超过显示的浓度。 如果几个成分接近可接受浓度的极限,那么这可能会抑制共轭。 50mM/0.6%三氯三苯 1 0.1%牛血清白蛋白 2 50%甘油 0.1%叠氮化钠 美国公共广播电视公司 磷酸钾 氯化钠 HEPES公司 蔗糖 柠檬酸钠 乙二胺四乙酸 海藻糖 1 Tris缓冲盐水几乎总是≤50 mM/0.6% 2 BSA也可以干扰结合抗体在组织染色中的使用。 不兼容的缓冲成分 硫柳汞 普鲁克林 甘氨酸 精氨酸 谷胱甘肽 DTT公司 如果含有您的抗体或蛋白质的缓冲液成分没有列在上面,请检查 常见问题解答 或 联系我们 . 只有纯化的抗体才适合使用,即在不存在其他蛋白质、肽或氨基酸的情况下:腹水、血清或杂交瘤培养基中的抗体是不相容的。 储存和处理共轭试剂盒 冻干发光油墨 ® 组件具有吸湿性。 试剂盒特意在室温下与硅胶一起装运,以避免接触湿气。 收到药盒后,将其冷冻保存并防潮。 在打开外容器之前,让冻干组件达到室温,以尽量减少冷凝。 Alexa Fluor公司 ® 是赛默飞世尔科学公司Molecular Probes,Inc的注册商标。 Alexa Fluor公司 ® 本产品中的染料是根据Life Technologies Corporation的知识产权许可证提供的。 由于本产品含有Alexa Fluor ® 染料,该产品的购买向买方传达了不可转让的权利,即仅在买方(无论买方是学术实体还是营利实体)进行的研究中使用所购买的产品和产品成分。 由于本产品含有Alexa Fluor ® 染料本产品的销售明确以买方不在任何活动中使用产品或其组件或使用产品或组件制造的任何材料来产生收入为条件,包括但不限于在制造过程中使用产品及其组件; (ii)提供服务、信息或数据以换取报酬(iii)用于治疗、诊断或预防目的; 或(iv)转售,无论其是否出售用于研究。 有关出于研究以外的目的购买本产品许可证的信息,请联系Life Technologies Corporation,5781 Van Allen Way,Carlsbad,CA 92008 USA或 outlicensing@thermofisher.com .
性能
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存放说明 储存于-20°C。 请参阅协议。 -
组件 100微克 1毫克 3 x 10微克 3 x 100微克 ab274049-Alexa Fluor 647公司 1 x 100微克 1 x 1毫克 3 x 10微克 3 x 100微克 ab273994-改性剂 1 x 200微升 1 x 200微升 1 x 200微升 1 x 200微升 ab273995-淬火试剂 1 x 200微升 1 x 200微升 1 x 200微升 1 x 200微升
图片
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使用重组抗-EGFR抗体[E235]-BSA和无叠氮化合物的直接免疫荧光染色( ab227459磅 )标有Alexa Fluor ® 647接合套件(快速)-Lightning-Link®( 约269823 ). Lightning-Link®Alexa Fluor公司 ® 647抗-EGFR抗体[E235]结合物用于染色野生型A431细胞(顶部面板)和MCF7阴性细胞(底部面板)。 细胞在-20°C下用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 用1µg/ml LL-Anti-EGFR Alexa Fluor培养细胞 ® 647共轭(以红色显示)或 ab227459磅 (抗-EGFR抗体,未标记对照)在+4°C下过夜。 Ab227459号 处理过的细胞只与 约150077 在室温下以1/1000稀释1小时(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
使用重组抗细胞角蛋白19抗体[EP1580Y]-BSA和不含叠氮的直接免疫荧光染色( 约195872年 )标有Alexa Fluor ® 647接合套件(快速)-Lightning-Link®( 约269823 ). Lightning-Link®Alexa Fluor公司 ® 647抗细胞角蛋白19[EP1580Y]结合物用于染色野生型MCF7细胞(顶部面板)和A431阴性细胞(底部面板)。 用4%多聚甲醛(10分钟)或100%甲醇在-20°C(5分钟)下固定细胞,用0.1%Triton X-100渗透5分钟,用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 用1µg/ml LL-抗细胞角蛋白19 Alexa Fluor培养细胞 ® 647共轭(以红色显示)或 约195872年 (抗细胞角蛋白19抗体,未标记对照)在+4°C下过夜。 A类 195872元 处理过的细胞只与 约150077 在室温下以1/1000稀释1小时(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
使用重组抗病毒素抗体[EPR3776]-BSA和无叠氮化合物的直接免疫荧光染色( 公元193555年 )标有Alexa Fluor ® 647接合套件(快速)-Lightning-Link®( 约269823 ). 照明-链路 ® Alexa Fluor公司 ® 647抗维生素A抗体[EPR3776]结合物用于染色Vimentin野生型HAP1细胞(顶部面板)和Vimentin敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞在-20°C下用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 用1µg/ml LL-Anti-Vientin Alexa Fluor培养细胞 ® 647(以红色显示)或 公元193555年 (抗病毒抗体,未标记对照)在+4°C下过夜。 抗体 193555 处理过的细胞只与 约150077 在室温下以1/1000稀释1小时(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
Yuan,Yue等人使用Alexa Fluor 647共轭试剂盒(快速)-Lightning-Link(ab269823),作为检测HIV-1结合后CD4+T细胞表面CD4纳米组织变化的一部分。 他们使用该试剂盒将Alexa Fluor 647与抗CD4抗体(OKT4)偶联,用于单分子超分辨率成像。 代表性TIRF-STORM图像,以及细胞表面CD4(绿色)和HIV p24(洋红色)的选定放大区域(插图)。 比例尺=2? 米。 -
Kim,Jin-Wook等人使用Alexa Fluor®647结合试剂盒Lightning-Link®检测瘦素通过组织蛋白酶A对转移能力的影响。 他们使用该试剂盒结合抗LAMP2a抗体,用于免疫细胞化学。 阴性对照CHMp细胞的共焦显微镜图像。 (a) DAPI染色的CHMp细胞; (b) Alexa 488的阴性对照图像? 结合二级抗体。 (c,d)Alexa 647-共轭LAMP2a抗体的阴性对照图像。 白色箭头? 头部仅指示LAMP2a的位置。 这些图像是在40X共焦显微镜下拍摄的。 -
Thiriet、Pierre-Emmanuel等人使用Alexa Fluor®647接合试剂盒(Fast)-Lightning-Link®(ab269823)作为快速准确诊断急性肾损伤(AKI)的一部分。 他们使用该试剂盒将Alexa Fluor®647与单克隆抗利多卡因-2/NGAL抗体偶联,用于开发微流体分析设备。 (a-c)芯片说明和操作。 (a) 展示芯片布局。 珠和试剂可以通过左侧可见的两个入口连续注入。 该装置由上游三条孵育线和下游三条浓度线组成,其末端的珠子聚集在一起(此处以红色显示)。 (b) 用于检测生物标记物的三明治免疫分析的图示。 我们旨在检测的分析物被修饰有捕获抗体(cAb)的珠捕获,并借助荧光标记检测抗体(dAb)进行检测。 (c) 介绍了在芯片上操作平台的连续步骤,即(1)珠子加载,(2)用检测抗体孵育,(3)从孵育线释放,(4)在浓度区域聚集,以及(5)通过出口丢弃。 为了清晰起见,在每个步骤中都显示了与珠子和电极电激活阵列结合的物种。 (d-f)中性粒细胞凝胶酶相关利多卡因(NGAL)生物标记物的细胞培养。 (d) 孵育15分钟前后观察小珠子簇(粉红色圆圈)。 荧光信号来源于dAb-NGAL复合物与电介质捕获在电极线上游区域的cAb-decoated珠的结合。 在单独的实验中注射三种浓度的NGAL,即1 ng/mL、10 ng/mL和100 ng/mL。(f)不同NGAL浓度的荧光信号作为孵育时间的函数。 15分钟后,所有浓度提供的信号都大于对照实验,包括在没有NGAL分子的情况下注射溶液。 通过测量10个簇的荧光信号,获得误差条。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (25)
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