概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9实现敲除,在外显子2中插入选择盒。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255550-人类VIM敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255552-人类野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
靶标
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功能 波形蛋白是在各种非上皮细胞,尤其是间充质细胞中发现的III类中间丝。 波形蛋白横向或末端附着于细胞核、内质网和线粒体。 与LARP6一起参与CO1A1和CO1A2 I型胶原mRNA的稳定。 -
组织特异性 在成纤维细胞中高表达,在T和B淋巴细胞中有一些表达,在Burkitt淋巴瘤细胞系中很少或没有表达。 在许多激素依赖性乳腺癌细胞系中表达。 -
疾病相关 白内障30 -
序列相似性 属于中间丝族。 -
结构域 中央α-螺旋线圈-线圈棒区域介导元素同二聚体化。 [IL]-x-C-x-x-[DE]基序是iNOS-S100A8/A9转亚硝化酶复合物介导的半胱氨酸S-亚硝基化的一个拟议目标基序。 -
翻译后修饰 丝裂原-55的磷酸化和巢蛋白(通过相似性)促进了有丝分裂期间的丝状体解体。 间充质来源的各种细胞中最显著的磷蛋白之一。 在细胞分裂过程中,磷酸化作用增强,此时波形蛋白丝显著重组。 PKN1的磷酸化抑制丝状物的形成。 在细胞质中性粒细胞分泌期间,CDK5在Ser-56处磷酸化。 STK33磷酸化。 在胞质分裂期间,O-糖基化的位点与磷酸化位点相同或接近,这会干扰磷酸化状态。 S-亚硝化由干扰素-γ和氧化修饰的低密度脂蛋白(LDL(ox))诱导,可能与iNOS-S100A8/9转亚硝化酶复合物有关。 -
细胞定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
形式 波形蛋白存在于结缔组织和细胞骨架中。 -
别名 CTRCT30型 附睾管腔蛋白113 FLJ36605型
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KO细胞系 -
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应用
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图片
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车道1: U20S细胞裂解液(20µg) 车道2: 胡扁桃体细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: VIM敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约16700 在53 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约16700 在野生型HeLa细胞中显示与波形蛋白反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255446 使用敲除细胞裂解物ab263775。 对野生型和波形蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约16700 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/100稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: U20S细胞裂解液(20µg) 车道2: 胡扁桃体细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: VIM敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约8069 在53 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约181602 在37 kDa时观察到。 约8069 在野生型HeLa细胞中显示与波形蛋白反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255446 使用敲除细胞裂解物ab263775。 对野生型和波形蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约8069 和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负荷控制( 约181602 )分别以1µg/ml和1份20000稀释液在4°C下培养过夜。 用山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )和山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:在外显子2中插入选择盒
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载