概述
-
产品名称 人 SPHK2敲除HEK-293T细胞 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 HEK293吨 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9在外显子1中插入1 bp实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
-
存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab262502-人SPHK2敲除HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 ab255553-人类野生型HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
STR分析 Amelogenin X蛋白 D5S818:8、9 D13S317:12、14 D7S820:11 D16S539:9、13 vWA:16、19 TH01:7、9.3 TPOX:11个 CSF1PO:11、12
靶标
-
功能 催化鞘氨醇的磷酸化形成1-磷酸鞘氨醇(SPP),这是一种具有细胞内外功能的脂质介质。 也作用于D-红二氢鞘氨醇、D-红鞘氨醇和L-苏氨酸二氢鞘磷脂。 结合磷脂酰肌醇。 -
序列相似性 包含1个DAGKc域。 -
细胞定位 细胞质。 膜和溶酶体膜。 -
UniProt提供的信息 -
别名 SK 2公司 鞘氨醇激酶2 鞘氨醇激酶2型
查看所有内容
相关产品
-
KO细胞系
应用
|
|
图片
-
车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物20μg 车道2: SPHK2敲除HEK-293T细胞裂解物20μg 3号车道: HeLa细胞裂解物20μg 车道4: Raji细胞裂解物20μg 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在68 kDa时观察到抗-SPHK2抗体。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 Western blot显示,在野生型HEK-293T细胞中,抗-SPHK2抗体与SPHK2反应,在SPHK2敲除细胞系中观察到信号丢失 ab267293 (SPHK2敲除细胞裂解物ab258699)。 对野生型HEK-293T和SPHK2敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )与抗SPHK2抗体孵育前 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4时过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子1插入1 bp
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载