概述
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产品名称 人 RXRA敲除HCT116细胞 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲本细胞系 HCT116型 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:外显子1插入1 bp -
通道编号 <20 -
淘汰验证 桑格测序,蛋白质印迹(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权的必要性,以供其预期用途。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab277288-人RXRA敲除HCT116细胞裂解物 1 x 100微克 ab277289-人类野生型HCT116细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 癌 -
性别 男性
靶标
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功能 维甲酸受体。 视黄酸受体作为异二聚体与其靶反应元件结合,以响应其配体全反式或9-顺式视黄酸,并在各种生物过程中调节基因表达。 RAR/RXR异二聚体与由串联5'-AGGTCA-3'位点(称为DR1-DR5)组成的维甲酸响应元件(RARE)结合。 RXR的高亲和力配体是9-顺式维甲酸。 RXRA是许多核受体的常见异二聚体伴侣。 RXR/RAR异二聚体与视黄酸反应元件(RARE)结合,该反应元件由被称为DR1-DR5的串联5’-AGTTCA-3’位点组成。 在没有配体的情况下,RXR-RAR异二聚体与包含转录辅抑制因子的多蛋白复合物相关,这些辅抑制因子可诱导组蛋白乙酰化、染色质缩合和转录抑制。 在配体结合中,辅抑制因子与受体分离,并与辅激活因子结合,导致转录激活。 脂肪酸氧化基因(如ACOX1和P450系统基因)上的PPARA转录活性需要RXRA/PPARA异二聚体。 -
组织特异性 高表达于肝脏,也见于肺、肾和心脏。 -
序列相似性 属于核激素受体家族。 NR2亚家族。 包含1个核受体DNA结合域。 -
结构域 由三个域组成:一个调制N端域(AF1域)、一个DNA结合域和一个C端配体结合域(AF2域)。 -
翻译后修饰 丝氨酸和苏氨酸残基上的磷酸化主要位于N-末端调节域。 在存在或不存在配体的情况下,在Ser-21上持续磷酸化。 在胁迫条件下,通过激活的JNK对Ser-56、Ser-70、Thr-82和Ser-260进行过磷酸化(通过相似性)。 体外用PKA对Ser-27进行磷酸化。 这种磷酸化是抑制cAMP介导的RARA转录活性所必需的。 Sumoylation负调控转录活性。 由SENP6特异性地脱氨。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
别名 FLJ00280型 传真00318 FLJ16020型
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应用
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图片
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车道1: 野生型HCT116细胞裂解物20 ug 车道2: RXRA敲除HCT116细胞裂解物20 ug 3号车道: HeLa细胞裂解物20 ug 车道4: MCF7细胞裂解物20 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab125001型 在53 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约125001 western blot显示与野生型HCT 116细胞中的抗视网膜X受体α反应,在RXRA敲除细胞系中观察到信号丢失 约273708 (RXRA敲除细胞裂解液ab275245)。 对HCT 116野生型和RXRA敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 ab125001型 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4时过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:在外显子1插入1 bp。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载