概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 hek293吨 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9实现敲除,第4外显子16 bp缺失,第4外显子17 bp缺失。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干物可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取从常用的癌细胞系中产生的数千个敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255525-人PTK2敲除HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 ab255553-人类野生型HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:8、9 D13S317:12、14 D7S820:11 D16S539:9、13 vWA:16、19 第01页:第7页,第9.3页 第三方:11 CSF1PO:11、12
靶标
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功能 非受体蛋白酪氨酸激酶参与细胞运动、增殖和凋亡的信号通路。 通过酪氨酸磷酸化激活,以响应细胞粘附或抗体交联诱导的整合素聚集,或通过配体如蛙皮素或溶血磷脂酸的G蛋白偶联受体(GPCR)占据,或通过LDL受体占据。 微管诱导的Tyr-397去磷酸化对诱导局灶性黏附分解至关重要。 在致癌转化中发挥潜在作用,导致激酶活性增加。 -
组织特异性 在所有受试器官、淋巴细胞系中表达,但在大脑中最为丰富。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 酪氨酸蛋白激酶家族。 FAK亚家族。 包含1个FERM域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
结构域 第一个Pro-rich结构域与CRK-associated衬底(BCAR1)和CASL的SH3结构域相互作用。 羧基末端区域是焦点粘附靶向序列(FAT)的位点,它介导FAK1定位于焦点粘附。 -
翻译后修饰 活化后在6个酪氨酸残基上磷酸化。 PTPN11可以催化微管诱导的Tyr-397脱磷酸化反应,ZFYVE21可以对其进行调节。 当EPHA2被其配体EFNA1激活时,PTPN11将其去磷酸化。 -
细胞定位 细胞连接>局部粘附。 细胞膜。 局部粘连的成分。 -
UniProt提供的信息 -
别名 音量控制器 传真1 FAK相关非激酶多肽
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KO细胞系 -
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应用
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图片
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车道1: HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: A431细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道4: PTK2敲除HEK-293T细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约40794 在119 kDa时观察到。 红色负载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约40794 在野生型HEK-293T细胞中显示与FAK反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255421 使用敲除细胞裂解物ab263766。 对野生型和FAK基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约40794 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: A431细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道4: PTK2敲除HEK-293T细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约76496 在119 kDa时观察到。 红色负载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约76496 在野生型HEK-293T细胞中显示与FAK反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255421号 使用敲除细胞裂解物ab263766。 对野生型和FAK基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约76496 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1/500稀释度和1/2000稀释度在4°C下孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:第4外显子17 bp缺失; 等位基因2:第4外显子16 bp缺失
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载