概述
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产品名称 人 DAPK3(ZIP激酶)敲除HEK-293T细胞 裂解物 -
产品概述 Western blot数据表明,CRISPR基因编辑可能导致相关蛋白的截短。 请参阅数据图像。 -
亲代细胞系 HEK293吨 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:外显子1插入1 bp。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 桑格测序 -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 该产品受布罗德研究所、ERS基因组学有限公司和Sigma Aldrich有限责任公司的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab260223-人DAPK3敲除HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 ab255553-人类野生型HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 -
新冠肺炎疫苗 -
单元格类型 上皮的 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:8、9 D13S317:12、14 D7S820:11 D16S539:9、13 vWA:16、19 TH01:7、9.3 TPOX:11个 CSF1PO:11、12
靶标
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功能 丝氨酸/苏氨酸激酶是细胞凋亡的积极调节者。 有丝分裂期间着丝粒处“Thr-11”上的磷酸化组蛋白H3。 通过MYPT1的磷酸化调节肌球蛋白轻链磷酸酶,从而调节肌动蛋白细胞骨架的组装、细胞迁移、肿瘤细胞的侵袭性、平滑肌收缩和神经突起的生长。 参与真核细胞核中许多亚核结构域之一的早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NB)的形成,并参与肿瘤发生和病毒感染。 -
美国 属于蛋白激酶超家族。 CAMK Ser/Thr蛋白激酶家族。 DAP激酶亚家族。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 无所不在。 UBE2D3 E3连接酶介导的泛素化不会导致蛋白酶体降解,但会影响细胞核内早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)的形成。 自动磷酸化。 ROCK1磷酸化。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 细胞核>PML体。 重新定位到结合PAWR的细胞质中,复合物似乎与肌动蛋白丝相互作用(根据相似性)。 定位于早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)。 从前期到后期与着丝粒结合。 -
UniProt提供的信息 -
别名 DAP激酶3 DAP样激酶 DAP样激酶
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KO细胞系 -
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应用
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图片
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车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道2: DAPK3敲除HEK-293T细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab51602标准 在53 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 ab51602标准 western blot显示抗ZIP激酶抗体[EPR1636Y]与野生型HEK-293T细胞中的ZIP激酶特异性反应。 在敲除细胞系中观察到的条带 约266755 53kDa以下的(敲除细胞裂解物ab257407)通道可能代表截断的形式和裂解的碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型和ZIP激酶敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab51602标准 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° C分别为1000分之一和20000分之一稀释度。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道2: DAPK3敲除HEK-293T细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约79422 在53 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约79422 western blot显示抗ZIP激酶抗体[EPR1635]与野生型HEK-293T细胞中的ZIP激酶特异性反应。 在敲除细胞系中观察到的条带 约266755 53kDa以下的(敲除细胞裂解物ab257407)通道可能代表截断的形式和裂解的碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型和ZIP激酶敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约79422 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° 稀释度分别为1/5000和1/2000时的C。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子1插入1 bp
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载