概述
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产品名称 人 SOD2(MnSOD)敲除HEK-293T细胞系 -
亲代细胞系 HEK293吨 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现基因敲除,外显子2 16 bp缺失,外显基因2 1 bp插入 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
经测试应用 -
生物安全水平 2 -
常规说明 建议控制: 人野生型HEK293T细胞系( 约255449 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/暂停 粘附剂 -
组织 肾 -
单元格类型 上皮的 -
STR分析 Amelogenin X蛋白 D5S818:8、9 D13S317:12、14 D7S820:11 D16S539:9、13 vWA:16、19 TH01:7、9.3 第三方:11 CSF1PO:11、12 -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶标
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功能 破坏通常在细胞内产生的对生物系统有毒的超氧阴离子自由基。 -
疾病相关 SOD2基因变异与6型糖尿病(MVCD6)微血管并发症易感性相关[MIM:612634]。 这些是糖尿病在许多组织和器官中形成的病理状态。 包括糖尿病视网膜病变、导致终末期肾病的糖尿病肾病和糖尿病神经病变。 糖尿病视网膜病变仍然是糖尿病成人新发失明的主要原因。 其特征是血管通透性增加,组织缺血和血管生成增加。 -
序列相似性 属于铁/锰超氧化物歧化酶家族。 -
翻译后修饰 氧化应激下硝化。 硝化与氧化结合抑制催化活性。 -
细胞定位 线粒体基质。 -
UniProt提供的信息
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KO细胞裂解物 -
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应用
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图片
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所有车道: 抗SOD2/MnSOD抗体[EPR2560Y]( 约68155 )稀释度为1/1000 车道1: SHSY5Y细胞裂解物 车道2: A549细胞裂解物 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道4: SOD2敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 24千帕 其他波段位于: 37 kDa(可能的负载控制) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约68155 在22 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约68155 在野生型HEK-293T中显示与SOD2/MnSOD反应。 敲除细胞系ab255434(敲除细胞裂解物 约263835 )已使用。 野生型和SOD2/MnSOD敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约68155 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:第2外显子16 bp缺失 -
等位基因2:外显子2插入1 bp。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载