主要功能和细节
样品类型:粘附细胞、悬浮细胞、组织匀浆
概述
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产品名称 蛋白 羰基分析(Western Blot) -
样品类型 粘附细胞,悬浮细胞,组织匀浆 -
产品概述 蛋白质羰基分析试剂盒(Western Blot)ab178020用于测量蛋白质氧化产生的蛋白质羰基。 这可以通过与臭氧或氮氧化物反应,或通过金属催化氧化来实现。
在蛋白质羰基分析方案中,蛋白质侧链中的羰基通过与DNPH反应衍生为DNP-腙。 使用抗DNP抗体和western blotting检测DNP部分。
使用免疫印迹方法进行蛋白质羰基测定的优点是通过SDS-PAGE从复杂混合物中分离和鉴定单个氧化的蛋白质。 每个蛋白质的氧化状态可以在样品之间进行比较。
蛋白质羰基分析方案总结: -用提取缓冲液从样品中提取蛋白质,培养20分钟,18000 x g离心20分钟,保留上清液 -SDS溶液变性蛋白质 -与DNPH孵育15分钟 -添加中和溶液 -在聚丙烯酰胺凝胶上运行样品 -将蛋白质转移到膜 -阻塞1小时 -用DNP抗体孵育3小时,然后清洗 -用HRP山羊抗兔二级抗体孵育1小时,洗净 -与ECL一起开发并获取图像
注: RIPA缓冲区与ab178020不兼容 -
说明 以前称为氧化蛋白检测试剂盒(Western blot)。 氧衍生自由基在衰老、凋亡和癌症中起着重要作用。 这些高反应性化学物质还参与多种临床疾病,如动脉粥样硬化、白内障、神经变性疾病、慢性炎症疾病、肺部疾病和心血管疾病。 相关产品 其他蛋白质羰基含量分析包括: - 蛋白质羰基含量测定(DNPH)ab126287 (最流行的蛋白质羰基含量测定) - 蛋白质羰基含量测定(荧光法)ab235631 - 蛋白质羰基含量ELISA(DNPH)ab238536 查看 氧化应激标记物和分析指南 了解更多关于氧化应激的测定。
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 100次测试 12%十二烷基硫酸钠 1 x 2毫升 1X 2,4-二硝基苯肼(DNPH)溶液 1 x 4毫升 1X衍生化控制溶液 1 x 4毫升 2X提取缓冲 1 x 4毫升 5000X HRP结合Scondaria抗体 1 x 100微升 5000X初级抗DNP抗体 1 x 100微升 中和溶液 1 x 4毫升 含有DNP残基的标准蛋白 1 x 1毫升 -
研究领域
图片
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DNP衍生BSA的连续稀释证明了DNP检测的敏感性。 车道1:5 ng BSA 车道2:10 ng BSA 车道3:20 ng BSA 车道4:40 ng BSA 车道5:80 ng BSA 车道6:160 ng BSA -
DNP衍生H证明的DNP检测示例 2 O(运行) 2 处理过的Hela细胞。 通道1:MW梯形图 通道2(DNPH):0.1 mM H的HeLa电池 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 通道3(阴性对照):0.1 mM H的HeLa细胞 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 4号通道(DNPH):1 mM H的HeLa电池 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 通道5(阴性对照):1 mM H的HeLa细胞 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 通道6(DNPH):HeLa电池,10 mM H 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 通道7(阴性对照):高度为10 mM的HeLa细胞 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 通道8(DNPH):HeLa电池,0 mM H 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 泳道9(阴性对照):具有0mM H的HeLa细胞 2 O(运行) 2 ,15分钟治疗。 10巷(DNPH):BSA与DNPH衍生。 11号通道(阴性对照):BSA与DNPH衍生。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (50)
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