主要功能和细节
检测类型:酶活性 检测方法:荧光法 平台:缩微板阅读器 测定时间:1小时 样品类型:细胞培养提取物、组织提取物
概述
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产品名称 -
检测方法 荧光 -
样品类型 细胞培养提取物、组织提取物 -
检测类型 酶活性 -
检测时间 1小时 00米 -
种属反应性 与反应: 哺乳动物 -
产品概述 组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性检测试剂盒(荧光法)ab156064检测裂解物中的HDAC活性。
HDAC活性测定试剂盒主要用于使用粗HDAC馏分评估HDAC抑制剂。 此外,如果使用适当剂量的HDAC特异性抑制剂,例如曲古抑菌素A,则可以使用试剂盒对任何培养的原代细胞、细胞系或组织匀浆进行HDAC活性分析。
HDAC活性测定协议基于与AMC偶联的乙酰化肽。 AMC是一种荧光染料,当与肽结合时,其荧光被猝灭。 当HDAC去乙酰化肽时,它很容易被酶(显影剂成分)分解。 然后释放出自由AMC,可以使用荧光微孔板阅读器(Ex/Em 355/460 nm)进行测量。
HDAC分析已证明可检测HDAC家族的活性,至少检测人类或动物细胞裂解液或柱馏分中的I类HDAC。 该分析显示样品响应具有良好的线性。 该分析可用于HDAC的纯化,也可用于检测细胞裂解液中HDAC的存在。 -
说明 此套件的应用程序包括: 1.监测HDACs的净化,包括HDAC1、2、3和8。 2.筛选HDAC抑制剂或活化剂。 3.检测药物对HDAC的影响。 HDAC的背景信息 组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)是一类负责核心组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)N末端赖氨酸残基脱乙酰化的酶,使组蛋白能够更紧密地包裹DNA。 基于功能和DNA序列相似性,HDAC蛋白分为四类(I类、IIA类、IIB类、III类和IV类)。 类别I、IIA和IIB被认为是“经典”HDAC,其活性受到曲古菌素A(TSA)的抑制,而类别III是NAD+依赖蛋白(sirtuins)家族,不受TSA的影响。 类别IV被认为是一个非典型类别,仅基于与其他类别DNA序列的相似性。 -
平台 缩微板阅读器
性能
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存放说明 请参阅协议。 -
组件 100次测试 原油HDAC 1 x 500微升 开发商 1 x 500微升 氟脱乙酰肽(0.2 mM) 1 x 100微升 荧光底物肽(0.2 mM) 1 x 500微升 HDAC测定缓冲液 2 x 1毫升 HDAC停止解决方案 2 x 1毫升 曲古菌素A(10µM) 1 x 500微升 -
研究领域 -
功能 负责核心组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)N末端赖氨酸残基的脱乙酰化。 组蛋白脱乙酰化为表观遗传抑制提供了标签,并在转录调节、细胞周期进展和发育事件中发挥重要作用。 组蛋白脱乙酰酶通过形成大型多蛋白复合物发挥作用。 去乙酰化SP蛋白SP1和SP3,并调节其功能。 BRG1-RB1-HDAC1复合物的成分,负调节休息神经元中CREST介导的转录。 钙刺激后,HDAC1从复合物中释放,CREBBP被招募,从而促进转录激活。 去乙酰化TSHZ3并调节其转录阻遏物活性。 RELA中的去乙酰化酶“Lys-310”,从而抑制NF-kappa-B的转录活性。 -
组织特异性 无处不在,心脏、胰腺和睾丸中含量较高,肾脏和大脑中含量较低。 -
序列相似性 属于组蛋白脱乙酰酶家族。 HD 1型亚家族。 -
翻译后修饰 Lys-444和Lys-476上的Sumoylated; 促进酶活性。 由SENP1进行脱氨。 Ser-421和Ser-423上的磷酸化促进酶活性以及与NuRD和SIN3复合物的相互作用。 CHFR泛素化,导致其被蛋白酶体降解。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
别名 DKFZp686H12203型 去10 HD1型
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图片
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丁酸、丙酸和TSA抑制HUVEC中HDAC的活性。 丁酸盐和丙酸盐处理抑制了HUVEC中HDAC的活性。 使用对照品将结果归一化为100%。 -
8 uL(相当于6.7e6细胞)核提取物( 约113474 )对HL60细胞进行动力学评估(+/-SD)。 -
不同体积的阳性对照,含抑制剂(TA),动力学读数(+/-SD)。 -
根据组蛋白脱乙酰酶(HDAC)活性测定试剂盒(荧光法)(ab156064)协议,使用抗HDAC1抗体在免疫沉淀样品中测量HeLa细胞内源性HDAC1。 -
根据组蛋白脱乙酰酶(HDAC)活性测定试剂盒(荧光法)(ab156064)协议,使用抗HDAC2抗体在免疫沉淀样品中测量HeLa细胞内源性HDAC2。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (36)
Jiménez-Alcántar P 等。 PaDef(Persea americana var.drymifolia),一种植物抗菌肽,在急性淋巴细胞白血病细胞系中触发细胞凋亡并诱导组蛋白3的全局表观遗传学修饰。 前Mol Biosci 9:801816 (2022). 公共医学:35141282 泰亚罗L 等。 吉维诺司他脂质体:对2D和3D胶质母细胞瘤模型的抗肿瘤作用和药代动力学。 癌症(巴塞尔) 14:不适用(2022年)。 公共医学:35740641 元S 等。 组蛋白修饰阅读器ZCWPW1通过调节组蛋白修饰的串扰和减数分裂热点的染色质可及性,促进双链断裂修复。 基因组生物学 23:187 (2022). 公共医学:36068616 锤子SS 等。 禁食和模拟禁食治疗激活SIRT1/LXRa并缓解糖尿病引起的系统和微血管功能障碍。 糖尿病学 64:1674-1689 (2021). 公共医学:33770194 Lee IS公司 等。 4-己基间苯二酚对大鼠颅面生长的影响。 国际分子科学杂志 22:不适用(2021年)。 公共医学:34445640