Your browser does not have JavaScript enabled and some parts of this website will not work without it.
为了使您在阿布卡姆官网的浏览体验更顺畅,请使用最新版本的浏览器比如谷歌浏览器
看看我们的BETA网站,看看我们到目前为止做了什么。
搜索和浏览所选产品
通过通常的分销商购买
欢迎光临
您还没有帐户?
定制化产品和商务合作加速您的诊断和治疗项目
定制化产品
与我们成为伙伴
获取研究建议和支持
查看支持中心
一步一步完成您的实验
查看协议
活动说明、摘要提交、演讲者、注册方式及更多信息
查看全球活动安排
查看所有通路
查看交叉通路
我对这个工具包(ab100663)感兴趣,但想知道细胞采集中哪些缓冲液兼容,哪些不兼容。另外,这个套件和ab100662有什么区别?
Abcam社区
已验证客户
2012年4月20日被问及
感谢您联系Abcam了解我们的VEGF人ELISA试剂盒。 ab100663和ab100662之间的主要区别是可以分析的样本类型。Ab100663可用于分析细胞和组织,而ab100662应用于分析血清、血浆、细胞培养上清液和尿液。 请参阅以下有关细胞或组织裂解物样品制备的指南: 与该试剂盒一起使用的细胞或组织裂解物可以使用最传统的方法制备,例如在裂解缓冲液中使细胞或组织均匀化。一般的低盐溶解缓冲液可与以下警告一起使用: 1) 避免使用SDS或其他强变性洗涤剂。一般来说,非离子清洁剂,如Triton X-100或NP-40是最好的,尽管两性离子清洁剂(如CHAPS)或温和离子清洁剂如脱氧胆酸钠会起作用。 2) 使用的洗涤剂总量不超过2%v/v 3) 避免使用叠氮化钠 4) 避免使用还原剂,如二硫苏糖醇或巯基乙醇 通常,我们强烈建议您在均质之前向裂解缓冲液中添加某种类型的蛋白抑制剂鸡尾酒。由于对蛋白水解裂解的敏感性和裂解产物中存在的蛋白酶类型不同,我们不建议使用特定产品。相反,您应该根据您感兴趣的蛋白质和/或组织或细胞类型的文献搜索来选择使用哪种蛋白抑制剂组合。可以使用磷酸酶抑制剂,但除非试剂盒中使用的抗体专门识别蛋白质的磷酸化(激活)形式,否则无需使用。 溶解和均质方法的选择包括玻璃床粉碎、浸泡、冻融、超声波处理和用研钵和杵粉碎冰冻组织,甚至是这些方法的组合。对于所有样本类型,没有一种最佳方法,但对于某些样本类型,有些方法优于其他方法。您应该在对文献进行简要搜索后选择方法,以了解与您的样品类似的样品是如何在之前的调查中制备的。 均质后,旋转裂解物以去除细胞/组织碎片(10000 x g时5分钟或5000 x g时10分钟)并保存上清液。应尽快冷冻裂解液,并在-20℃(或-80℃,如果可能)下储存。在与抗体阵列孵育之前再次旋转它们。测定裂解液的蛋白质浓度(使用Bradford-Lowry型分析),并将用于每次分析提供相同数量总蛋白质的每个样品的体积标准化。 由于不同的细胞和组织可能含有不同数量的蛋白质,作为起点,我们建议每1x106细胞或10 mg组织使用500 uL裂解缓冲液。您可能需要根据结果进行调整。匀浆总蛋白浓度的目标应至少为1000 ug/mL,但2000 ug/mL更好。
回复于 2012年4月20日