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我们目前正在使用LAT1 ab85226进行Western blotting,但信号非常低(即使我们增加了Ab的量)。我想换成ab134121。我们还会测量相同的LAT1蛋白吗?我们正在人体肌肉中测量它。我有几个问题(列举出来以便参考): 1) 这是RabMAb的适当应用吗? 2) 我们需要使用什么辅助抗体? 3) 我们将一切标准化到老鼠标准。RabMAb对老鼠没有反应,对吗?我需要买ab89545作为阳性对照?我还能将我的未知数标准化为HeLa阳性对照吗? 4) 实际上,我们将使用什么样的稀释?(我想确保我从同一批号订购了足够的数量) 如果这些问题中有一些是基本的,我很抱歉;免疫印迹不是我的强项。
Abcam社区
已验证客户
2013年2月26日被问及
感谢您与我们联系。 是的,ab85226和ab134121都检测到相同的SLC7A5(LAT1)蛋白。http://www.uniprot.org/uniprot/Q01650我们将保证ab134121在WB、IP和IHC-P中使用人体样本。我们知道它对Flow Cyt、ICC/IF和大鼠或小鼠样本不起作用。 Cat#ab89545是一种EEA1抗体,在我们的目录中不再提供。你的意思是ab29545,HeLa细胞裂解物。是的,这将是一个很好的阳性对照,用于ab134121。在ab134141的WB中,我们建议工作稀释度为1/1000-1/10000。您需要的数量将取决于样品中的数量。例如,我们网站上生成的图像是用1/1000稀释的。 一个合适的次级抗体是山羊对兔IgG-H&L的多克隆次级抗体(HRP),用于ECL检测,如我们的ab133406。https://www.abcam.com/Goat-polyclonal-Secondary-Antibody-to-Rabbit-IgG-HL-HRP-ab97051.htmlhttps://www.abcam.com/optiblot-ecl-detect-kit-23pg-187ng-ab133406.html您可以在这里找到我们所有的Optiblot WB试剂:https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=14709&source=pagetrap&viapagetrap=optiblot 我希望这些信息对你有帮助。如果您需要更多建议或信息,请随时联系我们。
回复于 2013年2月26日