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关于用ab75850对人体样本进行IHC-P染色的电话。观察到有背景的微弱染色。在4℃下使用了1/100过夜。希望使用ab377994优化双重染色方案。
Abcam社区
已验证客户
2011年11月24日被问及
正如在电话中讨论的那样,我已经查看了我们的双重染色协议,看看我是否可以为我们的对话提出进一步的建议。如前所述,我们网站上的协议相对简单,在每次培养之间,通过单独的阻断和清洗步骤,对初级抗体进行连续培养。https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=11458 IHC world的一项协议建议的内容大致相同:http://www.ihcworld.com/_protocols/general_IHC/imunofl_double_squential.htm 如前所述,我将首先单独优化每个染色,一旦您满意,将两种方案结合起来。这可能是因为两种主要抗体来自同一物种,所以你会经历一些非特异性染色。这可以通过使用阻塞步骤进行优化。或者,可以使用未结合的Fab抗体片段,以“改变一种主要抗体的种类”或阻断首次应用的二级抗体的游离位点。如果你想了解更多关于如何应用的细节,我可以向你发送更全面描述的协议。至于您目前使用ab75850进行的染色,如果您没有看到与阳性对照组织讨论的建议有任何改进,请务必告诉我。
回复于 2011年11月24日