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谢谢你的快速回复。1.ab18180的订单号为:1145499(交货日期:2012年8月15日)。我没有ab7360的订单号,交货日期是2009年10月14日(地址见下文)。2.两种抗体均未使用渗透性。3.使用的二级抗体是Alexa Fluor 488山羊抗鼠抗体(xxxxxx),该抗体已成功与其他抗体结合使用。4.随附是用ab7360观察到的染色视图。当做,
Abcam社区
已验证客户
2012年11月12日被问及
感谢您提供这些额外的细节。我认为一个可能被证明有用的改变是在协议中引入许可步骤。抗体ab7360和ab18180是针对ABCA1蛋白的不同区域而产生的。根据SwissProt参考O95477,不容易确定使用的免疫原是针对细胞外还是细胞内区域。可能是从您观察到的结果来看,ab7360识别一个细胞外区域,因此不需要允许,而ab18180识别一个需要允许抗体到达的细胞内区域。我建议在室温下在PBS中使用0.2%吐温20 10分钟,并将0.1%吐温20引入阻塞和抗体稀释缓冲液。我最初会用1/100的稀释度来测试ab18180抗体。我希望这能有所帮助。如果这不能提高你的成绩,请务必告诉我。
回复于 2012年11月12日