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问题描述无带样品-物种:小鼠-细胞系或组织:原始264.7和FL83B-细胞提取物或核提取物:细胞提取物-纯化蛋白或重组蛋白:纯化蛋白初级抗体初级抗体-种类:小鼠-对:小鼠的反应-你测试过这种抗体的稀释度:1:500-使用了什么稀释缓冲液:在TBST(0.1%吐温20)中的5%脱脂牛奶中-培养时间:过夜-培养温度:4℃-进行了什么洗涤步骤:在TBST(0.1%吐温20)中10分钟3次检测方法ECl+未使用阳性和阴性对照,但许多研究发现Raw264.7会表达ABCA1抗体储存条件-20℃样品制备-使用的裂解缓冲液:裂解缓冲液含有0.5%Nonide P-40、150mm NaCl、1mM EDTA、1mM EGTA(pH8.0)、10mM Tris(pH7.4)、1%Triton X-100-使用的蛋白酶抑制剂:钙生物化学蛋白酶抑制剂鸡尾酒组I。类别号539131-使用的加载缓冲液:4X Tris-Cl/SDS(pH6.8)7mL,甘油3.8mL,SDS 1g,DTT 0.93g,溴酚蓝1.2mg磷酸酶抑制剂:否-是否加热样品:温度和时间:100℃10分钟负载蛋白质量50μg和200μg电泳/凝胶条件-还原或非还原凝胶:还原-还原剂:DTT-凝胶百分比:5%和7.5%转移和阻塞条件-转移条件:(膜类型,验证蛋白质转移):PVDF膜转移300mA 2小时5。封闭条件-缓冲液:含0.1%吐温20.-的三缓冲盐水阻断剂:牛奶、牛血清白蛋白、血清,百分含量:5%牛奶-培养时间:1小时-培养温度:室温次级抗体-品种:山羊-对:小鼠的反应-在何种稀释度下测试该抗体:1:2500-培养时间1小时-清洗步骤:10分钟,TBST中3次(0.1%吐温20)-荧光色素或酶偶联物:HRP偶联物-你知道你所遇到的问题是否来自次级?不您试用了多少次该应用程序?三您是否运行了“无主”控制?不,你每次都得到相同的结果吗?是的
Abcam社区
已验证客户
2012年3月15日提问
感谢您填写了western blot问卷并附上了westernblot图片。我同意这瓶ab18180没有按预期工作。如果您在过去6个月左右的时间内收到此产品,我很乐意提供替换产品或信用卡。
回复于 2012年3月15日