概述
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产品名称 -
生产商 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲本细胞系 THP-1型 -
有机体 人类 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 西部印迹(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权的必要性,以供其预期用途。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
年 1套 ab277989-人CASP1(Caspase-1)敲除THP-1细胞裂解物 1 x 100微克 ab282895-人类野生型THP-1细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 急性单核细胞白血病 -
疾病 急性单核细胞白血病 -
性别 男性
靶标
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功能 硫醇蛋白酶,在天冬氨酸和丙氨酸之间裂解IL-1β,释放参与多种炎症过程的成熟细胞因子。 对防御病原体很重要。 分裂并激活固醇调节元件结合蛋白(SREBP)。 还可以促进细胞凋亡。 -
组织特异性 在脾脏和肺部大量表达。 在肝脏、心脏、小肠、结肠、胸腺、前列腺、骨骼肌、外周血白细胞、肾脏和睾丸中检测到。 大脑中没有表达。 -
序列相似性 属于肽酶C14A家族。 包含1个卡域。 -
翻译后修饰 这两个亚基是通过自催化机制从前体序列衍生而来的。 -
细胞定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
别名 CASP-1型 CASP1公司 CASP1_人
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KO细胞系
应用
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图片
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车道1: 野生型THP-1细胞裂解液40µg 车道2: THP-1细胞裂解液40µg 3号车道: HeLa细胞裂解液20µg 车道4: HEK-293细胞裂解液20µg Western blot假彩色图像:稀释1/1000的抗-CASP1抗体染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,抗体显示与CASP1特异性结合。 在野生型THP-1细胞裂解液中35-40,48 kDa处观察到一条带,在CASP1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约276116 (敲除细胞裂解物ab277988)。 为了生成此图像,分析了野生型和CASP1敲除THP-1细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在与一级抗体在4°C下孵育过夜之前,将膜封闭在荧光蛋白质印迹(基于TBS)封闭溶液中。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸收抗体( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
车道1: 野生型THP-1细胞裂解物40μg 车道2: CASP1敲除THP-1细胞裂解物40μg 3号车道: HeLa细胞裂解物20μg 车道4: HEK-293细胞裂解物20μg Western blot假彩色图像:抗天冬氨酸酶-1抗体[EPR19672]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约207802 显示与Caspase-1特异结合。 在野生型THP-1细胞裂解液中在22、35-40、48 kDa处观察到一条带,在CASP1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约276116 (敲除细胞裂解物ab277988)。 为了生成此图像,分析了野生型和CASP1敲除THP-1细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4℃与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜 ° C.在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载