概述
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产品名称 人 DHCR24敲除A-431细胞 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 A431型 -
有机体 人类 -
突变描述 CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=2 bp缺失; 移帧:99.61% -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS),Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab280473-人DHCR24敲除A431细胞裂解物 1 x 100微克 ab263973-人类野生型A-431细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 表皮样癌 -
性别 女性
靶标
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功能 催化甾醇中间体的δ-24双键的还原。 在氧化应激诱导的细胞凋亡过程中,通过降低胱天蛋白酶3的活性来保护细胞免受氧化应激。 还可防止淀粉样β肽诱导的细胞凋亡。 -
组织特异性 在大脑和肾上腺中高表达,在肝、肺、脾、前列腺和脊髓中中度表达。 心脏、子宫和前列腺低表达。 血细胞中检测不到。 在大脑中,强烈表达于皮质区、黑质、尾状核、海马、延髓和脑桥。 在受阿尔茨海默病影响的大脑中,颞下叶的表达明显低于额叶。 -
通路 类固醇生物合成; 胆固醇生物合成。 -
疾病相关 桥粒甾醇中毒(DESMOS)[MIM:602398]:罕见的常染色体隐性遗传病,其特征是多发性先天性异常和血浆、组织和培养细胞中胆固醇前体桥粒甾醇水平升高。 注:该疾病是由影响本条目中所示基因的突变引起的。 -
序列相似性 属于FAD-结合氧化还原酶/转移酶4型家族。 包含1个FAD绑定PCMH类型域。 -
细胞定位 内质网膜。 高尔基体膜。 -
UniProt提供的信息 -
别名 24脱氢胆固醇还原酶 24-脱氢胆固醇还原酶 3-β-羟基甾醇δ24还原酶
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美国
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图片
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CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=2 bp缺失; 移帧:99.61% -
车道1: 野生型A-431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 车道2: DHCR24敲除物A-431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: Hep G2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约181062 在51 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。
ab181062年 Western blot显示与野生型A-431细胞中的DHCR24发生反应。当DHCR24敲除细胞系时,观察到信号丢失 约262480 使用敲除细胞裂解物ab263920。 对野生型A-431和DHCR24敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 约181062 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1:2000和1:20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。
实验方案
数据表及文件
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