氯菊酯介导的内吞作用(CME)是真核细胞内化细胞外分子的过程。FCHo1和FCHo2参与CME的初始氯氰菊酯组装步骤[1,2]。这些蛋白质包含N端的脂质结合EFC/F-BAR结构域[3]和C端的μ同源结构域(μHD)。这些蛋白质的μHD与富含内吞支架蛋白Eps15的重复序列基序Asp-Pro-Phe(DPF)的区域相互作用。Eps15包含15个DPF图案。SGIP1也参与CME,并且在C末端包含与FCHo1/2高度同源的μHD,后者也与Eps15相互作用。这些蛋白质的μHD与衔接蛋白复合体的μ亚单位(例如AP-2)具有弱氨基酸序列同源性,AP-2连接CME中的货物蛋白和网格蛋白。为了研究FCHo1/FCHo2/SGIP1μHD对Eps15的识别机制,我们首先通过使用SGIP1微HD的相互作用研究确定了保留与μHD相互作用能力的最小Eps15片段。我们发现两个由Eps15衍生的11-残基肽,每个肽含有两个DPF基序,由一个短的2–3残基连接子连接,与SGIP1μHD以适度的亲和力相互作用(Kd=15–20μM)。相反,仅含有一个DPF基序的肽不会与μHD结合。因此,SGIP1μHD需要两个DPF基序进行绑定。此外,SGIP1μHD与含有两个DPF基序的肽的复合物的结构表明,SGIP2μHD广泛识别两个相邻的串联DPF基模,而不接触侧翼残基,这与相互作用研究一致。这种识别模式不同于AP-2附件域对Eps15 DPF基序的识别,这为FCHo1/2向新生的内吞位点招募Eps15提供了理论基础,同时允许FCHo1/2结合的Eps15与Eps15的DPF重复区的不同部分招募AP-2复合物用于氯氰菊酯的组装。