异二聚酶琥珀酰辅酶A合成酶(SCS)的两种亚型存在于人类线粒体中。一个是针对ATP的,而另一个是专门针对GTP的。两者都催化可逆反应:琥珀酸+辅酶A+NTP⇌琥珀酰辅酶A+NDP+Pi,其中N表示腺苷或鸟苷。SCS最为人所知的是柠檬酸循环中的一种酶,在此反应生成NTP。相反,SCS补充酮体分解代谢和血红素合成所需的琥珀酰辅酶A。人们认为SCS需要核苷酸特异性形式来发挥其不同的代谢作用。核苷酸特异性存在于β亚基[1],人类ATP-特异性SCS的β亚基已被证明与红细胞特异性氨基乙酰丙酸合成酶(ALAS2)的C末端相互作用[2]。ALAS2催化血红素合成中的承诺步骤:琥珀酰辅酶A+甘氨酸5-氨基乙酰丙酸+辅酶A+CO2SCS和ALAS2之间的相互作用具有生物学意义,因为这可以提供琥珀酰辅酶A从SCS到ALAS2的通道。我们假设这种相互作用是与ATP-特异性SCSβ亚基的羧基末端发生的,因为序列比较表明,与其他SCSβ亚基相比,ATP-特异性SCS的β亚基具有羧基末端延伸。为了验证这一假设,我们在人类ATP-特异性SCS的α亚单位中添加了一个羧基末端His8-tag,并将Thr 396β的密码子突变为一个终止密码子。这种截短版本的人类ATP-特异性SCS已在大肠杆菌中产生并纯化。除了测试截短的人类ATP-特异性SCS是否与ALAS2相互作用外,我们还在结晶试验中使用截短的版本。全长人类ATP-特异性SCS的晶体衍射仅为3.2º,我们的目标是获得ATP与截短人类ATP--特异SCS复合物的更好衍射晶体。