Ca(2+)-ATP酶是由至少4个基因编码的质膜泵家族:染色体12q21上的ATP2B1(108731);ATP2B2;Xq28上的ATP2B3(300014);和ATP2B4(108732)在1q25上。
Brandt等人(1992年)从人类胎儿大脑cDNA文库中分离并表征了人类PMCA2基因的cDNA。1190氨基酸蛋白与大鼠蛋白的序列同源性大于98%。
Brandt等人(1992年)通过PCR检测了大脑、肝脏、脊髓和肾上腺中PMCA2的表达。脊髓中有2个PCR产物,表明存在PMCA2剪接变异体。
Santiago-Garcia等人(1996年)通过RT-PCR发现人类胎儿心脏发育过程中PMCA和SERCA(见108730)基因的可变表达。在测试的3个阶段中,胎盘或胎儿心脏中未检测到PMCA2,但在成人心房中检测到3种PMCA2剪接变体。
Street等人(1998年)指出,ATP2B2基因经历了选择性剪接。所有4个ATP2B蛋白都预测有10个跨膜跨域,约80%的蛋白质量位于细胞质中。T2和T3之间的细胞内环路编码将ATP水解与钙转运耦合的转导域。T4和T5之间最大的细胞内环路包括磷酸酶形成残基和核苷酸结合域。细胞内C末端包含钙调素结合、蛋白激酶C、cAMP依赖性激酶和酸性磷脂调节域。
Elwess等人(1997年)发现替代剪接变异体PMCA2a和PMCA2b对钙调蛋白的亲和力比相应形式的PMCA4高得多。在高钙调素浓度下,PMCA2b表现出更高的钙亲和力。钙亲和力定位于C末端。Elwess等人(1997年)得出结论,PMCA2变异体保持低游离胞浆钙浓度。
Street等人(1998年)在小鼠听觉和前庭毛细胞中发现了Atp2b2的表达,表明该通道提供了从静纤毛中去除钙的方法。
通过对人脑cDNA表达库的酵母2杂交分析,DeMarco等人(2002年)发现PCMA2b与NHERF2相互作用(SLC9A3R2;606553)。免疫共沉淀分析表明,这种相互作用是特异性和选择性的,因为PCMA4b与NHERF2或NHERF1(SLC9A3R1;604990)都没有相互作用,并且PCMA2b更喜欢NHERF2而不是NHERF1。荧光标记的PCMA2b在犬肾上皮细胞的顶膜上表达,并与靶向NHERF2共定位。DeMarco等人(2002年)假设,PCMA2b-NHERF2相互作用可能允许PMCA2b在多蛋白Ca(2+)信号复合物中组装。
Chicka和Strehler(2003)发现PMCA2b定位于极化上皮细胞的顶膜和基底外侧膜。蛋白质的不同剪接变异体显示出不同的膜靶向性。
Brandt等人(1992年)利用PMCA2 cDNA来探测人-啮齿动物体细胞杂交DNA的Southern blots,将PMCA2基因定位到人类第3染色体上。Wang等人(1994年)通过荧光原位杂交、体细胞杂交分析和CEPH家族的遗传连锁分析,证实ATP2B2基因与3p26-p25的结合。
Richards等人(1993)报告称,位于3p上的PMCA2基因位于von Hippel-Lindau病(193300)基因(VHL;608537)的着丝粒上。他们报告了其他结果,排除了PMCA2作为VHL突变位点。
在来自5个常染色体显性聋82(DFNA82;619804)的无关家族的11名患者中,Smits等人(2019)确定了ATP2B2基因中的杂合无义、剪接位点或移码突变(参见例如108733.0002-108733.0005)。通过全基因组测序发现并经Sanger测序证实的突变在2名无关患者中从头发生,在其余3个家族中以常染色体显性遗传模式分离。未进行变异的功能研究和患者细胞的研究,但所有研究都预计会导致ATP2B2功能丧失和单倍体不足。遗传分析表明,大多数患者在CDH23基因(605516)或其他可能改变表型的基因中也携带了意义不明的杂合变异体,尽管作者排除了这些变异的主要影响,并得出结论,ATP2B2突变是这些家族中单基因性耳聋的潜在原因。ATP2B2突变影响大鼠体内外毛细胞表达的ATP2B2 w/a亚型的同源性;Atp2b2基因突变的小鼠患有进行性耳聋(见动物模型)。Smits等人(2019年)得出结论认为,耳部ATP2B2功能的丧失可能导致钙细胞毒性,导致内外毛细胞退化和进行性听力损失。
Street等人(1998年)证明,失聪的蹒跚学步鼠(dfw)突变体具有Atp2b2基因突变,该突变体失聪并表现出前庭/运动失衡。dfw DNA中的A到G核苷酸转换导致在高度保守的氨基酸位置发生甘氨酸到丝氨酸的替换,而第二个突变等位基因携带2 bp的缺失,导致了预计会导致截短蛋白质的移码。在耳蜗中,Atp2b2蛋白定位于野生型小鼠的静纤毛和毛细胞的基底外侧壁,但在失聪摇摆小鼠中未检测到。研究结果表明,Atp2b2的突变可能通过影响立纤毛的感觉传导以及基底外侧膜的神经递质释放而导致耳聋和失衡。这些影响Atp2b2的突变是首次在哺乳动物质膜钙泵中发现的,并定义了一类直接影响毛细胞生理学的新的耳聋基因。
PMCA2表现出高度限制的组织分布,表明它比其他PMCA亚型具有更特殊的生理功能。耳蜗外毛细胞和螺旋神经节细胞中PMCA2的高水平表达表明了其在听力中的独特作用。为了分析PMCA2的生理作用,Kozel等人(1998)通过基因靶向产生了PMCA2缺陷小鼠。纯合子PMCA2-null小鼠比杂合子和野生型小鼠生长缓慢,步态不稳,难以保持平衡。对突变和野生型小鼠小脑和内耳的组织学分析表明,无效突变使Purkinje神经元数量略有增加(PMCA2在其中高度表达),分子层厚度减少,前庭系统中没有耳蜗,Corti器官出现一系列异常。对听觉诱发脑干反应的分析表明,纯合子突变体是聋子,杂合子小鼠有明显的听力损失。这些数据表明,PMCA2对平衡和听力都是必需的,并表明它可能是用于耳蜗形成和维持的钙的主要来源。
Reinhardt等人(2004年)指出,PMCA2bw亚型在哺乳期间表达约100倍,表达水平与产奶量和钙分泌相关。他们发现,与杂合型或野生型小鼠相比,纯合型Pmca2缺失小鼠产奶的钙含量减少了60%。在空白小鼠中,全身钙代谢没有改变。研究结果表明,Pmca2bw亚型可以使酶在顶膜上发挥高亲和力钙挤压系统的作用,是牛奶中产生高水平钙所必需的,并且是通过钙泵直接分泌产生的。
Bortolozzi等人(2010)对Tommy(tmy)突变小鼠进行了表征,这些小鼠是在N-乙基-N-亚硝基脲诱变筛选中产生的。Tmy/Tmy小白鼠出生时就严重失聪,比它们的同窝小白鼠还小。他们出现了严重的共济失调,步态蹒跚不定,后肢频繁过度伸展。Tmy杂合子小鼠在12周龄时发生耳聋,30周时完全外显。Bortolozzi等人(2010年)将tmy突变确定为Atp2b2基因第7外显子的非保守G-to-a转换,导致Atp2b2-w/a中的gln629-to-lys(E629K)替代,Atp2b2-w/a是在毛细胞中表达的Atp2b2亚型(该替代对应于Atp2b2z/b亚型中的E584K,其缺乏Atp2b2-a w/a中45-氨基酸插入)中国仓鼠卵巢细胞中突变体Atp2b2的表达导致钙分泌受损,长期非刺激性钙输出受到抑制。新生儿胞囊感觉上皮器官型培养的记录证实,在快速钙释放后,tmy/tmy和tmy/+小鼠的钙输出受损。对tmy/tmy小鼠Corti器官的免疫荧光分析显示,在出生后第40天,毛细胞的顶端退化呈进行性基础。