研究论文\(第5em段)

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同步加速器
辐射
国际标准编号:1600-5775

双能X射线束荧光成像

十字标记徽标

英国伦敦大学学院医学物理与生物医学工程系,b条英国迪德科特OX11 0QX费米大道哈维尔科技创新校园钻石光源,c(c)的里雅斯特大学工程与建筑系,Via Alfonso Valerio 6/1,的里雅斯特34127,意大利d日意大利的里雅斯特34127,Via Alfonso Valerio 6/1,Trieste大学物理系
*通信电子邮件:s.cipiccia@ucl.ac.uk

编辑:A.Bergamaschi,Paul Scherrer Institute,Switzerland(收到日期:2021年3月2日; 2021年8月19日接受; 2021年10月5日在线)

X射线透视和X射线荧光是互补的纳米级成像技术,分别提供结构和元素信息。这两种方法都是通过扫描样品上的局域光束来获取数据的。X射线光刻术处理与样品相互作用的相干照明的传输信号,以产生分辨率比照明点和步长更精细的图像。通过增大光斑和步长,该技术可以有效地覆盖扩展区域。X射线荧光记录样品通过局域光束扫描时的发射光谱,其空间分辨率受到光斑和步长的限制。快速验光和高分辨率荧光的必要条件似乎不相容。在这里,提出了一种新的方案来缓解需求差异。该方法在样品处使用两个不同尺寸的探针,这两个探针使用两种不同的能量和彩色聚焦光学元件产生。与标准单光束扫描相比,不同的探针尺寸可以减少联合荧光-眼底成像扫描的采集步骤,同时成像相同的视野。用两个波荡器谐波、菲涅耳波带片和能量辨别器对新方法进行了实验验证光子计数探测器。

1.简介

X射线眼科成像术(罗登堡等。, 2007[罗登堡·J·M、赫斯特·A·C、库利斯·A·G、多布森·B·R、菲佛·F、邦克·O、大卫·C、杰菲莫夫斯·K·约翰逊·I(2007)。《物理评论稿》98、034801。])和X射线荧光(XRF)成像技术已经成功地结合在一起,可以同时生成高分辨率的结构图像和2D(藤蔓等。, 2012【Vine,D.J.,Pelliccia,D.,Holzner,C.,Baines,S.B.,Berry,A.,McNulty,I.,Vogt,S.,Peele,A.G.&Nugent,K.A.(2012),Opt.Express,20,18287-18296.】; 等。, 2015[Deng,J.,Vine,D.J.,Chen,S.,Nashed,Y.S.G.,Jin,Q.,Phillips,N.W.,Peterka,T.,Ross,R.,Vogt,S.&Jacobsen,C.J.(2015),美国国家科学院院刊,112,2314-2319。], 2017[Deng,J.,Vine,D.J.,Chen,S.,Jin,Q.,Nashed,Y.S.G.,Peterka,T.,Vogt,S.&Jacobsen,C.(2017).科学报告7,445.])和3D(邓等。, 2018[Deng,J.,Lo,Y.H.,Gallagher-Jones,M.,Chen,S.,Pryor,A.,Jin,Q.,Hong,Y.P.,Nashed,Y.S.,Vogt,S.、Miao,J.&Jacobsen,C.(2018),《科学促进》4,eaau4548]; 胜利者等。, 2018[Victor,T.W.,Easthon,L.M.,Ge,M.,O'Toole,K.H.,Smith,R.J.,Huang,X.,Yan,H.,Allen,K.N.,Chu,Y.S.&Miller,L.M(2018).科学报告8,13415.]). 尽管两者都是扫描技术,但扫描要求不同。在X射线光刻术中,样品以重叠方式相对于光束进行扫描,同时记录远场中的衍射图案强度。重叠产生了一个信息丰富的数据集,允许对相位问题通过迭代算法(Marchesini等。, 2016【Marchesini,S.、Krishnan,H.、Daurer,B.J.、Shapiro,D.A.、Perciano,T.、Sethian,J.A.和Maia,F.R.N.C.(2016),《应用结晶杂志》第49期,第1245-1252页。】;Enders&Thibault,2016年【Enders,B.&Thibault,P.(2016年),Proc.R.Soc.A,47220160640.】; Maiden&Rodenburg,2009年【Maiden,A.M.和Rodenburg,J.M.(2009)。超微显微镜,109,1256-1262。】; Guizar-Sicairos&Fienup,2008年[Guizar Sicairos,M.和Fienup,J.R.(2008)。Opt.Express,1677264-7278。]). 验光扫描中的典型光束重叠范围在60到80%之间(Edo等。, 2013【Edo,T.B.,Batey,D.J.,Maiden,A.M.,Rau,C.,Wagner,U.,Pešić,Z.D.,Waigh,T.A.&Rodenburg,J.M.(2013),《物理评论A》,87,053850。】). 样品处的照明尺寸和可达到的分辨率取决于X射线能量和实验几何形状。在相干衍射成像(CDI)中,样品处照明的最大空间范围(模数),D类,受奈奎斯特采样条件的限制。远场采样间距必须足够精细,以解决来自照明光束边缘的干涉条纹。因此,D类由提供

[D={{lambda}\在{2\sin\Delta\theta_{\rm{p}}}}上,\eqno(1)]

哪里λ是X射线波长,以及Δθ第页探测器像素间距所对的角度。通过调整扫描步长(Edo等。, 2013【Edo,T.B.,Batey,D.J.,Maiden,A.M.,Rau,C.,Wagner,U.,Pešić,Z.D.,Waigh,T.A.&Rodenburg,J.M.(2013),《物理评论A》,87,053850。】; 贝蒂,2014年【Batey,D.J.(2014),英国谢菲尔德大学论文。】; da Silva&Menzel,2015年[Silva,J.C.da&Menzel,A.(2015),Opt.Express,23,33812-33821.]). 然而,当照明度大于方程式(1)规定的照明度时[链接]使用时,重建算法需要上采样(Batey等。, 2014【Batey,D.J.,Edo,T.B.,Rau,C.,Wagner,U.,Pešić,Z.D.,Waigh,T.A.&Rodenburg,J.M.(2014),《物理学评论A》,89,043812。】)并且在计算上变得更加昂贵。因此,CDI采样条件通常在实验中用于设置心电扫描,在这里介绍的实验中也使用了它。

重建像素大小d日取决于波长λ以及探测器有效面积所对的角度,α,

[d={{lambda}\在{2\sin\alpha}}.\eqno(2)上]

相反,在XRF成像中,像素大小由扫描步长定义,分辨率取决于样品的光束强度分布的大小,并且该技术不需要光束重叠。世界各地已经在纳米探针光束线上产生了具有纳米级分辨率的XRF图像(Chen等。, 2016【Chen,S.,Paunesku,T.,Yuan,Y.,Deng,J.,Jin,Q.,Hong,Y.P.,Vine,D.J.,Lai,B.,Flachenecker,C.,Hornberger,B.,Brister,K.,Jacobsen,C.,Woloschak,G.E.&Vogt,S.(2016年)。AIP Conf.Proc.1696,020028。】; 胜利者等。, 2018[Victor,T.W.,Easthon,L.M.,Ge,M.,O'Toole,K.H.,Smith,R.J.,Huang,X.,Yan,H.,Allen,K.N.,Chu,Y.S.&Miller,L.M(2018).科学报告8,13415.]; 施泰因曼等。, 2020[Steinmann,R.G.、Martinez Criado,G.、Salomon,D.、Vitoux,H.、Tucoulou,R.、Villanova,J.、Laboure,S.、Eymery,J.和Segura Ruiz,J.(2020)。《同步辐射杂志》,第271074-1079页。]; 鲁曼切夫等。, 2020[Rumancev,C.,Gräfenstein,A.,Vöpel,T.,Stuhr,S.,von Gundlach,A.R.,Senkbeil,T..,Garrevoet,J.,Jolmes,L.,König,B.,Falkenberg,G.,Ebbinghaus,S.、Schroeder,W.H.和Rosenhahn,A.(2020)。J.Synchrotron Rad.27,60-66。]). 当结合XRF和X射线透视时,对光束大小与步长比的要求不匹配。Ptychography需要2.5–5:1的比率(基于60–80%的重叠),而XRF需要1:1的比率。当使用大于步长的光束时,XRF分辨率不再受步长限制,而是由光束大小控制。通过光学成像提供的探针知识可用于反褶积荧光图像并提高分辨率(Vine等。, 2012【Vine,D.J.,Pelliccia,D.,Holzner,C.,Baines,S.B.,Berry,A.,McNulty,I.,Vogt,S.,Peele,A.G.&Nugent,K.A.(2012),Opt.Express,20,18287-18296.】),减轻了不同的扫描要求。

我们提出了一种新的方法,通过减少扫描步骤和采集的数据,可以进一步改进同步XRF-ptycho扫描参数。该方法基于以下规范:

(i) X射线束谱由两个能量峰组成,E类1E类2,使用E类1<E类2,由分隔ΔE类;E类1用于眼科造影和E类2激发XRF。

(ii)E类1E类2在样品处具有不同的光束尺寸,D类1D类2分别是。D类1满足方程(1)[链接],同时D类2等于ptychography扫描步长(20%D类180%重叠)。

(iii)能量分辨X射线光子计数探测器(XPCD)的能量分辨率优于ΔE类在远场中记录E类1拆卸时E类2.

我们使用Pixirad-1/Pixie-III XPCD(Bellazzini等。, 2015【Bellazzini,R.,Brez,A.,Spandre,G.,Minuti,M.,Pinchera,M..,Delogu,P.,de Ruvo,P.L.&Vincenzi,A.(2015),《仪器学杂志》第10期,第C01032页。】).

2.方法

I13-1波束线专门用于多模式3D眼科成像(Cipiccia等。, 2019【Cipiccia,S.、Batey,D.、Shi,X.、Williams,S.、Wanelik,K.、Wilson,A.、Martin,P.、Scott,T.和Rau,C.(2019)。AIP Conf.Proc.2054,050005。】; 马丁等。, 2019【Martin,P.G.,Louvel,M.,Cipiccia,S.,Jones,C.P.,Batey,D.J.,Hallam,K.R.,Yang,I.A.X.,Satou,Y.,Rau,C.,Mosselmans,J.F.W.,Richards,D.A.&Scott,T.B.(2019),《国家通讯》第10卷,第2801页。】; 韦伯等。, 2020[Weber,S.、Abel,K.L.、Zimmermann,R.T.、Huang,X.、Bremer,J.、Rihko-Struckmann,L.K.、Batey,D.、Cipiccia,S.,Titus,J.,Poppitz,D.、Kübel,C.、Sundmacher,K.、Gläser,R.&Sheppard,T.L.(2020)。催化剂,10,1471.]). X射线源由一个2.8米长、25毫米周期的波荡器组成。微型贝塔配置(Rau,2017[Rau,C.(2017)。同步辐射。新闻,30(5),19-25。])结合215米的大源距采样距离,提供了高水平的相干通量。实验箱中的横向相干长度可以通过调节一组前端狭缝来调节。光束线配备有三重成熟镜(Si、Pt、Ro)、金属滤光盒和Si(111)双晶单色器(DCM)。通过从X射线路径(Batey)上移除DCM,光束线可以在单色或粉色光束模式下运行等。, 2019【Batey,D.J.、Cipiccia,S.、Van Assche,F.、Vanheule,S.,Vanmechelen,J.、Boone,M.N.和Rau,C.(2019),科学报告9,12278。】; 布伦、迪·特拉帕尼、贝蒂等。, 2020【Brun,F.,Di Trapani,V.,Batey,D.,Cipiccia,S.&Rau,C.(2020),科学报告10,6526。】).

2.1、。Pixirad探测器

Pixirad-1/Pixie III是一款采用混合架构构建的直接检测XPCD,其中半导体传感器通过倒装芯片键合技术与ASIC耦合。650µm厚的CdTe传感器是肖特基型二极管阵列,在像素上收集电子。探测器有效面积(3.17 cm×2.49 cm)由512×402个像素方阵组成,间距为62µm。Pixirad-1/Pixie-III实现了一种专门设计的采集模式,可提高能量分辨率和探测效率通过补偿费用分摊问题(Delogu等。, 2016【Delogu,P.、Oliva,P.,Bellazzini,R.、Brez,A.、de Ruvo,P.L.、Minuti,M.、Pinchera,M、Spandre,G.和Vincenzi,A.(2016),《仪器学杂志》第11期,第1015页。】; 迪·特拉帕尼等。, 2018[Trapani,V.D.,Bravin,A.,Brun,F.,Dreossi,D.,Longo,R.,Mittone,A.、Rigon,L.&Delogu,P.(2018),《仪器学杂志》第13期,2008年第1期。], 2020【Di Trapani,V.、Bravin,A.、Brun,F.、Dreossi,D.、Longo,R.、Mittone,A.,Rigon,L.和Delogu,P.(2020)。《物理研究方法汇编》第955卷第163220页。】). 通过实现两个可编程能量阈值(thr1和thr2)探测器可以在单色或双色模式下工作。在单色模式下,设置单个阈值:能量高于此全局阈值的所有事件都会收集在单个图像中。在双色模式下,Pixirad在一次采集中输出两幅图像:一幅采集的事件在thr之间具有能量1和thr2,第二个收集能量高于thr的事件2.该探测器已证明其对单次发射的有效性K(K)-使用多色实验室源(Brun、Di Trapani、Albers)的边缘减影计算机断层扫描(KES-CT)等。, 2020【Brun,F.、Di Trapani,V.、Albers,J.、Sacco,P.、Dreossi,D.、Brombal,L.、Rigon,L.和Longo,R.、Mittone,A.、Dullin,C.、Bravin,A.和Delogu,P.(2020),《物理医学生物学》65,055016。】)并且最近被用作使用同步加速器X射线粉红色光束的边缘相减ptychography成像的谐波选择器(Brun,Di Trapani,Batey等。, 2020【Brun,F.,Di Trapani,V.,Batey,D.,Cipiccia,S.&Rau,C.(2020),科学报告10,6526。】).

2.2. 实验装置

我们用粉红色光束进行实验。波荡器间隙设置为13.0 mm,产生10.64 keV的四次谐波(E类1)和13.35keV的五次谐波(E类2)(见图1中的光谱[链接]),使用ΔE类=E类2E类1大于Pixirad的能量分辨率[2.3 keV,在11 keV(Di Trapani等。, 2020【Di Trapani,V.、Bravin,A.、Brun,F.、Dreossi,D.、Longo,R.、Mittone,A.,Rigon,L.和Delogu,P.(2020)。《物理研究方法汇编》第955卷第163220页。】)]. 所有波动器谐波E类1E类2使用滤镜和镜子组合抑制:1.34毫米热解石墨,0.7 mm铝和硅镜条。E类2,高于 吸收边缘XRF用于激发测试样品的荧光。

[图1]
图1
在显示两种能量的实验箱中测量的滤波波荡谱E类1E类2. TheX射线强度使用电离室用DCM扫描X射线能量时放置在样品前。

实验装置如图2所示[链接],其中E类1以绿色显示,并且E类2蓝色。高效(~20%)镀金菲涅尔波带片(FZPs)(Gorelick等。, 2011【Gorelick,S.,Vila-Comamala,J.,Guzenko,V.A.,Barrett,R.,Salomé,M.&David,C.(2011),《同步辐射杂志》第18期,第442-446页。】)使用直径为400µm、最外层宽度为150 nm的E类2。在I13-1中,由于微型底座的配置,X射线束是散光的(Rau,2017[Rau,C.(2017)。同步辐射。新闻,30(5),19-25。]),为了为实验产生对称光束,我们对XRF进行了离焦操作,样品处的光斑尺寸为D类2=2µm。放置在FZP焦点位置的10µm针孔E类2阻止衍射级数>1E类2同时,针孔定义了照明点D类1对于E类1通过只传递其零阶。D类1=10µm满足等式(1)的采样要求[链接]D类2=2µm与ptychography扫描步骤匹配,重叠80%D类1(参见图2中的插图[链接]).

[图2]
图2
双光束荧光成像方法的设置,不按比例。这两种能量E类1(绿色)和E类2(蓝色)在样品处具有不同的光束尺寸,D类1D类2分别是。远场XPCD探测器记录E类1,而中央光束挡块阻挡直射光束。插图:双光束扫描法中光束重叠的示意图,其中XRF的探针尺寸(蓝色)与ptychography扫描的步长(绿色)相匹配。

安装在六轴样品台上的金色Siemens星形测试样品以2µm步长在38×38光栅网格中以0.9 Hz的频率进行扫描。激发的荧光E类2使用与样品平面成微小角度放置的单元素硅漂移涡流检测器进行收集,以最大限度地减少自吸收。在样品和Pixirad探测器之间放置一根10米长的充氦管,以减少衍射光束的空气散射。在探测器前面放置一个直径700µm、厚度100µm的金色中央光束挡块,以阻挡直射光束。Pixirad的两个阈值分别设置为9 keV和10 keV,以选择E类1在远场。thr(星期三)2设置如下E类1尽量减少来自E类2由于XPCD的有限能量分辨率,以峰值效率损失为代价E类1.

使用DCM扫描8.5至13.5keV之间的X射线束能量,测量探测器在应用阈值下的有效能量带宽。探测器的带宽测量为2.3 keV FWHM,如图3所示[链接],与文献一致(迪·特拉帕尼等。, 2020【Di Trapani,V.、Bravin,A.、Brun,F.、Dreossi,D.、Longo,R.、Mittone,A.,Rigon,L.和Delogu,P.(2020)。《物理研究方法汇编》第955卷第163220页。】).

[图3]
图3
实测探测器有效带宽:FWHM 2.3 keV。积分计数由样品上游测得的光束强度和带电离室的光学元件归一化。

3.结果

用双光束法进行的扫描结果如图4所示[链接]像素大小为2µm的38×38像素荧光图像[图4[链接]()]使用内部脚本,根据Vortex获得的频谱生成。荧光图像的空间分辨率为4µm,如图4的线轮廓所示[链接](d日). 通过PtyREX包(Batey,2014【Batey,D.J.(2014),英国谢菲尔德大学论文。】). 输出物体相位和照明模量如图4所示[链接](b条)和4[链接](c(c)):重建像素大小为77 nm,分辨率为248 nm,使用傅里叶环相关估计,如图4所示[链接](电子).

[图4]
图4
Ptycho-荧光结果:()通过双光束设置获得的西门子恒星的荧光图像。(b条c(c))利用能量滤波数据对西门子恒星的相位图像和探针模量进行了光学重建。重建像素大小:77纳米。(d日)显示分辨率为4µm的荧光图像的线条轮廓,受到最小光束尺寸的限制D类2=2µm。(电子)傅里叶环相关分析用于显示0.31像素分辨率的ptychography重建−1,对应于248nm。

结果表明,双光束法成功地在样品处产生了不同的探针尺寸:对于XRF,D类2=2µm允许4µm的分辨率,而对于ptychography,照明尺寸通过重建算法从探测器过滤的粉色光束数据中检索D类1=10µm。

4.讨论

我们在这里提出了一种同步X射线透视成像和X射线荧光成像的新方法,该方法通过在样品处使用具有不同能量和照明尺寸的双能量光束来缓解两种技术的扫描要求差异。一旦选择了XRF的分辨率(即最小的光束尺寸),可以将第二束设置为五倍大,以便在减少数据点数量和采集时间的同时执行ptycho-XRF。

我们通过产生双光束和使用能量鉴别检测器分离远场能量,对该方法进行了实验验证。标准的单光束设置预计需要多达25倍的采集,从而减少可能的开销来源,从而减少扫描时间和数据,以执行XRF和ptychography的组合,以拍摄相同的视野。

使用FZP和针孔组合生成双光束:在此设置中,在样品之前不能使用光束挡块,否则会阻塞E类1因此E类2达到样品时,会模糊XRF分辨率。然而,实验中使用的FZP针对第一衍射级进行了优化,与第一衍射级相比,零级的强度可以忽略不计(Gorelick等。, 2011【Gorelick,S.,Vila-Comamala,J.,Guzenko,V.A.,Barrett,R.,Salomé,M.&David,C.(2011),《同步辐射杂志》第18期,第442-446页。】).

实验使用粉红色光束进行,用于眼科成像的四次谐波带宽为160 eV(图1[链接]),对应于150 nm的最大可实现分辨率(Spence等。2004年【Spence,J.C.H.,Weierstall,U.和Howells,M.(2004)。超微显微镜,101,149-152。】). 在报告的实验中,ptychography成像的空间分辨率被测量为248nm,因此不受带宽的限制。分辨率的限制因素是光子统计:使用针孔来定义ptychography照明不允许充分利用可用的相干光通量。为了平衡低光子统计,我们将曝光时间设置为1.1 s,并且由于采集率低(0.9 Hz),因此执行了步进扫描,而不是飞行扫描。然而,该方法本身与扫描类型、步长或飞行无关。由于样品前没有光束挡板,因此需要在探测器前设置光束挡板,以防止直射光束损坏传感器。探测器处的光束停止消除了心电数据集的低频空间频率,该数据集在重构物相中在西门子恒星的较大辐条周围产生光晕,如图4所示[链接](b条).

对于第一次原理验证,FZP和针孔配置是首选配置,因为它易于资源和实现。XRF的设置不对焦;这一选择是由I13-1仪器的特定特性(像散光束)决定的,但该方法可以应用于对焦配置。

该系统可以通过将FZP和针孔结构替换为2×1/2离轴FZP系统来改进,以在样品处生成两种能量(Döring)的不同探针尺寸等。, 2019【Döring,F.,Risch,M.,Rösner,B.,Beye,M..,Busse,P.,Kubiček,K.,Glaser,L.,Miedema,P.S.,Soltau,J.,Raiser,D.,Guzenko,V.A.,Szabadics,L). 1/2 FZP和1/2 FZP配置将允许在样品前而不是在检测器处使用光束挡块,从而解决缺少低频空间频率的问题。此外,1/2 FZP和1/2 FZP配置将允许更好地利用相干通量通过将横向相干长度与光学孔径匹配。越高通量将允许更短的曝光,适用于更快的飞行扫描采集,实现更高的分辨率,并最终在定义ptychography光束尺寸方面提供额外的灵活性,以适应聚焦XRF扫描,特别是与纳米探针光束线相关的扫描。

致谢

我们要感谢INFN–Pisa部门的Pasquale Delogu教授进行了有益的讨论,感谢Diamond Light Source的Simon Logan先生帮助建立了实验。FZP由钻石光源-PSI合作提供(Christian David、Jeroen Bosgra)。钻石光源获得了第MG21767-1号提案项下提供的资金和光束时间。

资金筹措信息

导致这一结果的研究得到了CALIPSOplus项目的支持,该项目是根据欧盟2020年研究与创新水平框架计划(EU Framework Programme for research and Innovation HORIZON 2020)的拨款协议730872进行的。

参考文献

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