腹泻原性大肠杆菌E. coli）是引起人腹痛、腹泻症的大肠杆菌的总称，根据性质和症状的不同，分为7种。
本试剂盒通过多重PCR进行基因扩增，确认其扩增产物，可以确认日本主要报告的5种病原基因的持有状况。

特性

●使用3种引物混合物，可检测与肠道病原性大肠杆菌（EPEC）、肠道出血性大肠杆菌（EHEC）、肠道毒素性大肠杆菌（ETEC）、肠道侵入性大肠杆菌（EIEC）、肠道凝集性大肠杆菌（EAEC）的病原性相关的基因
●通过将检测结果数值化，可以容易地进行判定

套件配置

＊AptaTaq DNA Master（5×Conc.）是Roche诊断K.K.的产品。

操作步骤

电泳模式

100:100bp DNA梯度
P：积极控制
1：ATCC^®35150（EHEC）
2：ATCC^®43887（EPEC）
3：ATCC^®35401（ETEC）
4：ATCC^®43893（EIEC）
5：ATCC^®25922（非致病性大肠杆菌）
6～10：临床分离株

游泳条件为3%琼脂糖KANTO HC（1×TBE缓冲液），使用Mupid-exU，100V设定为35分钟。使用13个孔的梳子，将样品μ装置游泳了。
＊使用的琼脂糖凝胶是在一张凝胶上插入3个13孔科姆制作而成的。

检测基因及其PCR扩增产物大小

＊InvE基因可能会脱落，因为它是质粒上的侵入性基因。
①根据3个多路PCR的电泳结果读取带型。
②使用该电泳带有无的结果，在解析用Excel表中用二进制输入，进行病原型的判定。
③16s rDNA阳性时，可以推测是大肠杆菌。

合计点和腹泻原性大肠杆菌的病原型

＊不能区分EIEC和痢疾菌。合计积分为36的情况下，怀疑有志贺痢疾菌的可能性。
*stx2（志贺毒素2型产生基因）可能无法通过变型检测。例）stx2f

产品列表

产品编号	产品名称	保存温度	标准	包装	价格
08178-96	鹿西尼亚斯R DNA提取试剂 Cica geneusR DNA extraction reagent	冷藏	分子生物学用	1次（120次）	¥24,000
08087-96	鹿西尼亚斯R病原基因检测PCR试剂盒（用于腹泻原性大肠杆菌） Cica geneusR Pathogenesis Gene Detection PCR Kit (for Diarrheagenic E.coli)	冷冻	分子生物学用	1次（100次）	¥89,000

有关其他厂商商品的许可证专利，请向各厂商确认。

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产品编号	产品名称	保存温度	标准	包装	价格
08062-96	鹿西尼亚斯R分子流行病学分析POT试剂盒（用于不动杆菌） Cica geneusR Acineto POT KIT	冷冻	分子生物学用	1次（30次）	¥44,000
08362-97	鹿西尼亚斯R分子流行病学分析POT试剂盒（大肠杆菌用） Cica geneusR E.coli POT kit	冷冻	分子生物学用	1次（30次）	¥44,000
08187-96	鹿西尼亚斯R分子流行病学分析POT试剂盒（绿脓菌用） Cica geneusR Pseudo POT kit	冷冻	分子生物学用	1次（50次）	¥67,000
08179-96	鹿西尼亚斯R同工酶检测组 Cica geneusR staph coaglase detection set	冷冻	分子生物学用	1次（50次）	¥53,000
08180-96	鹿西尼亚斯R分子流行病学分析POT试剂盒（金黄色葡萄球菌用） Cica geneusR staph POT kit	冷冻	分子生物学用	1次（120次）	¥87,000
08180-97	鹿西尼亚斯R分子流行病学分析POT试剂盒（金黄色葡萄球菌用） Cica geneusR staph POT kit	冷冻	分子生物学用	1次（30次）	¥40,000
08115-96	鹿角R毒素基因检测试剂盒（用于C.difficile） Cica geneusR Toxin Gene Detection KIT (for C. difficile)	冷冻	分子生物学用	1次（30次）	¥44,000

分离培养基

产品编号	产品名称	保存温度	包装	价格
72090	黑木耳STEC生培养基 CHROMagar STEC (Prepared media)	冷藏	十张	¥2,700

电泳相关

产品编号	产品名称	保存温度	标准	包装	价格
01089-23	琼脂糖KANTO HC（用于短片段） Agarose KANTO HC		电泳用	100g	¥29,500
14575-43	溴化乙炔溶液 Ethidium bromide solution	冷藏	电泳用	10mL	¥5,400
24080-96	6倍浓缩装载缓冲区 6×Loading buffer	冷藏	电泳用	1pack	¥9,000
49881-04	快速加载100bp DNA梯形图 Quick-Load 100 bp DNA Ladder	冷藏		125 gel lanes	¥14,600
46510-79	10×TBE缓冲液 10×TBE Buffer		电泳用	1L	¥5,300
49881-60	三代100bp DNA梯形图 TriDye 100bp DNA Ladder	冷藏		125 gel lanes	¥13,600

参考文献

1）公立大学法人大阪市立大学、株式会社KALS、株式会社二共刃型工业；“腹泻原性大肠杆菌检测方法”专利公开2008-283895
2) Ruttler, M.E.at el,Biocell, 30（2）: 301-308, 2006
3）Hiroe, Aet al,Appl, Environ, Microbiol,78（9）： 3177-3184, 2012

小册子

鹿西尼亚斯® 病原基因检测PCR试剂盒（用于腹泻原性大肠杆菌）（436KB）
基因检测相关产品指南（2.3MB）

使用说明书

病原基因检测PCR试剂盒（用于腹泻原性大肠杆菌）（390KB）

计算表（ZIP文件、Excel）

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