鹿西尼亚斯®病原基因检测PCR试剂盒(用于腹泻原性大肠杆菌)2
腹泻原性大肠杆菌(Diarrheagenic E.coli)是引起人腹痛、腹泻症的大肠杆菌的总称,根据性质和症状的不同分为5种以及其他的腹泻原性大肠杆菌。另外,近年来,与大肠杆菌近缘的腹泻症起因菌Escherichia albertii(E.albertii)为原因的食物中毒和集体感染事例屡次发生。本产品通过多重PCR法,在腹泻原性大肠杆菌中主要的5种EHEC/VTEC(肠道出血性/贝洛毒素产生性大肠杆菌)、EPEC(肠道病原性大肠杆菌)、ETEC(肠道毒素原性大肠杆菌)、EIEC(肠道侵入性大肠杆菌)、EAggEC(肠道凝集附着性大肠杆菌)及E。可以同时检测与albertii致病性相关的基因。
特性
■使用2种引物混合,可以同时、区别检测大肠杆菌及E.albertii的菌种特异性基因和7种病原性因子*1。
*1致病因子麻黄素1,2型(VT1,2)基因(stx1,2)、耐热性恩特罗毒素(ST)基因(est)、易热性恩特罗毒素(LT)基因(elt)、亚胺基因(eae)、凝集附着性相关因子(aggR)、肠道侵入性相关因子(invE)
■通过将检测结果数值化,可以明确判定结果。
■附带了积极控制等PCR所需的试剂。
■根据内部控制的检测结果,可以确认有无PCR阻碍。
套件配置
| 个别名称 | 容量 | 数量 |
试剂A |
AptaTaq DNA Master(5已重命名Conc.)* |
400µL |
一根 |
试剂B |
PCR补充剂 |
700µL |
一根 |
试剂C |
底漆1 |
200µL |
一根 |
试剂D |
底漆混合2 |
200µL |
一根 |
试剂E |
正控制 |
250µL |
一根 |
试剂F |
6个已重命名装载缓冲器 |
400µL |
一根 |
*AptaTaq DNA Master(5已重命名Conc.)是Roche诊断K.K.的产品。
操作步骤
增菌·分离培养 |
分离菌株 |
DNA提取 |
鹿西尼亚斯®用DNA提取试剂制备模板DNA |
PCR |
进行2种多路PCR |
电泳 |
进行3%琼脂糖凝胶电泳 |
查找 |
用溴化乙炔溶液检测PCR片段 |
判定 |
在专用的计算表中输入结果,进行病原型的判定 |
电泳模式

︓100bp DNA Ladder,P︓积极控制,1︓E。coli ATCC35150(EHEC/VTEC)
2︓E。coli ATCC43887(EPEC),3︓E。coli ATCC35401(ETEC),4︓E。coli NCTC11603(ETEC)
5︓E。coli分离株(EAggEC),6︓E。coli ATCC43893(EIEC),7︓E。coli ATCC11775(非病原性)
8︓E。albertii分离株(stx2f阳性),9︓E。albertii LMG20976,10︓Citrobacter freundii ATCC8090
负控制(TE缓冲液)
分析结果
| 样本编号 |
1个 | 2 | 3 | 4个 | 5 | 6个 | 7 | 8个 | 9 | 10 |
系数合计 |
97 |
1个 |
第二十四节: |
16 |
2 |
4个 |
0 |
65 |
1个 |
10 |
病原型的判定 |
EHEC/VTEC(stx1+stx2+eae+) |
EPEC(eae+) |
ETEC(est+elt+) |
ETEC(est+) |
EAggEC(aggR+) |
EIEC(invE+) |
大肠杆菌 |
E.albertii(stx2+eae+) |
E.albertii(eae+) |
不能判定菌种 |
检测基因及其PCR扩增产物大小
| 系数 | 放大尺寸(bp) | 目标区域 |
读取,读取 mixture1 |
-是的 |
652 |
uidA(E.coli判定区域) |
32 |
532 |
stx1 |
64 |
413 |
stx2 |
-是的 |
252 |
lysp(E.albertii判定区域) |
1个 |
199 |
eae |
-是的 |
120 |
内部控制 |
读取,读取 mixture2 |
2 |
499 |
aggR |
4个 |
379 |
invE |
8个 |
270 |
金属板,金属板 |
16 |
191 |
est |
-是的 |
120 |
内部控制 |
在本工具包中
*志贺痢疾菌所持有的志贺毒素基因也作为stx1检测。
*E.albertii拥有的stx2f变型也会检测为stx2。
*还可以找到Citrobactor属拥有的eae。
*检测est的猪型(STp)和人型(STh)。
*因为也能检测出大部分痢疾菌所持有的uidA,所以不能区分痢疾菌和大肠菌。
合计点位和病原型(大肠杆菌时)
合计点数 | 病原型 |
0 |
EHEC/VTEC、EPEC、ETEC、EIEC、EAggEC以外大肠杆菌 |
1个 |
EPEC(eae+) |
2 |
EAggEC(aggR+) |
4-7 |
EIEC(invE+) |
8-15 |
ETEC(elt+) |
16~23 |
ETEC(est+) |
24-31 |
ETEC(est+单击功能区上elt+) |
32~63 |
EHEC/VTEC(stx1+) |
64-95 |
EHEC/VTEC(stx2+) |
96~127 |
EHEC/VTEC(stx1+,stx2+) |
上述以外 |
请同时使用生化性状等进行判断 |
产品信息
产品编号 |
产品名称 |
保存温度 |
标准 |
包装 |
价格 |
08178-96 |
鹿西尼亚斯DNA提取试剂 Cica geneus DNA extraction reagent |
冷藏 |
分子生物学用 |
1次(120次) |
¥24000 |
08377-96 |
鹿西尼亚斯病原基因检测PCR试剂盒(用于腹泻原性大肠杆菌)2 Cica geneus Pathogenessis Gene Detection PCR Kit(for Diarrheagenic E.coli)2 |
冷冻 |
分子生物学用 |
1次(50次) |
¥53000 |
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・购买和使用试剂时
小册子
鹿西尼亚斯®病原基因检测PCR试剂盒(用于腹泻原性大肠杆菌)
基因检测相关产品指南
使用说明书
病原基因检测PCR试剂盒(用于腹泻原性大肠杆菌)
计算表(ZIP文件、Excel)
分析用Excel表
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