主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR3945]到MSH6 适用人群:WB、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类

相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 中国 [EPR3945]至MSH6 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 人MSH6 aa 1-100内的合成肽(N末端)。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 第52701页 -
阳性对照 WB:A431、HeLa、HAP1和SW480细胞裂解物; 大鼠脑裂解物。 IHC-P:人结肠和结肠腺癌组织; 大鼠肝组织 ICC/IF:HeLa和HAP1细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存温度为-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
解离常数 (K) 天 ) -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR3945型 -
同种型
免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
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应用
靶标
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功能 复制后DNA错配修复系统(MMR)的组成部分。 与MSH2异二聚体形成MutSα,与DNA错配结合,从而启动DNA修复。 当结合时,MutS-alpha弯曲DNA螺旋并屏蔽大约20个碱基对,并识别DNA中的单碱基错配和二核苷酸插入-删除环(IDL)。 错配结合后,与MutLα异二聚体形成三元复合物,该复合物被认为负责指导下游MMR事件,包括链识别、切除和再合成。 ATP结合和水解在失配修复功能中起着关键作用。 与MutS-alpha相关的ATP酶活性调节与分子开关类似的结合:不匹配的DNA激发ADP-->ATP交换,导致可识别的构象转换,将MutS-alpha转换为滑动钳,能够沿DNA主干水解诱导依赖性扩散。 这种转换对于不匹配修复至关重要。 MutSα也可能在DNA同源重组修复中发挥作用。 -
疾病相关 MSH6缺陷是遗传性非息肉病5型结直肠癌(HNPCC5)的病因[MIM:600678]。 多个基因位点的突变可能单独或联合参与HNPCC表型的产生(也称为Lynch综合征)。 大多数临床上公认的HNPCC家族都有MLH1或MSH2基因突变。 HNPCC是一种常染色体显性遗传疾病,与癌症易感性显著增加相关。 其特征是家族易患早期结直肠癌(CRC)和胃肠道、泌尿系统和女性生殖道结肠癌。 据报道,HNPCC是西方世界最常见的遗传性结直肠癌。 HNPCC中的癌症起源于称为腺瘤的良性肿瘤性息肉。 临床上,HNPCC通常分为两个亚组。 I型:结肠直肠癌的遗传易感性,发病年龄小,近端结肠癌。 II型:患者患某些组织癌症的风险增加,例如子宫、卵巢、乳腺、胃、小肠、皮肤和喉部,以及结肠。 经典型HNPCC的诊断基于阿姆斯特丹标准:3个或更多受结直肠癌影响的亲属,其中一个是其他两个的一级亲属; 2代或2代以上受影响; 一个或多个结直肠癌在50岁之前出现; 排除遗传性息肉病综合征。 MSH6突变似乎与非典型HNPCC有关,特别是与子宫内膜癌或非典型子宫内膜增生的发生有关,子宫内膜增生是子宫内膜癌的假定前驱。 MSH6缺陷也存在于不符合阿姆斯特丹HNPCC标准的家族性结直肠癌(可疑或不完整的HNPCC)中。 MSH6缺陷是子宫内膜癌(ENDMC)易感性的一个原因[MIM:608089]。 -
序列相似性 属于DNA错配修复mutS家族。 包含1个PWWP域。 -
翻译后修饰 N端被阻塞。 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 PRKCZ磷酸化,可通过泛素蛋白酶体途径阻止MutSα降解。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 DNA错配修复蛋白Msh6抗体 G/T错配结合蛋白抗体 G/T错配结合蛋白抗体
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图片
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用稀释1/500的纯化ab92471对石蜡包埋的人结肠进行免疫组织化学染色。 使用兔/鼠IgG的预稀释HRP聚合物作为二级抗体,并用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照,如插图所示。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-MSH6抗体[EPR3945](ab92471) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: MSH6敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 153千Da 观察到的波段大小: 160千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在160 kDa时观察到ab92471。 124 kDa时观察到的红色抗V蛋白抗体[VIN-54]。 western blot显示ab92471与野生型HeLa细胞中的MSH6反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255410型 (敲除细胞裂解物 约263763 )已使用。 对野生型HeLa和MSH6敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab92471和抗-Vinculin抗体[VIN-54]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 邮编:216773 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab92471染色野生型HAP1细胞中的MSH6(顶部面板)和MSH6敲除HAP1的细胞(底部面板)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton X-100透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后用ab92471以1μg/ml和 公元195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
用稀释1/500的纯化ab92471对石蜡包埋大鼠肝脏进行免疫组织化学染色。 使用兔/鼠IgG的预稀释HRP聚合物作为二级抗体,并用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照,如插图所示。 -
1/1000稀释(纯化)的抗-MSH6抗体[EPR3945](ab92471)+10µg的大鼠大脑 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 153千Da 观察到的频带大小: 160千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 稀释1/1000的抗-MSH6抗体[EPR3945](ab92471) 车道1: HAP1 WT细胞裂解物 车道2: MSH6 KO HAP1细胞裂解物 每车道50µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 稀释1/3000的驴抗兔IgG-HRP 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 153千Da 暴露时间: 5分钟
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以1/6000稀释度纯化+SW480细胞裂解液以10µg纯化 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 153千Da 观察到的频带大小: 160千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
不同批次的ab92471在0.2µg/ml的大鼠脑裂解液中进行测试。 每条通道中装载15µg裂解液。 在160 kDa下观察到的谱带。 -
1/2000稀释(未净化)的抗-MSH6抗体[EPR3945](ab92471)+10µg的SW480细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 153千Da 观察到的频带大小: 160千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
未纯化ab92471,1/100稀释,用免疫组织化学方法检测石蜡包埋的人类结肠腺癌组织中的MSH6。 HRP结合抗兔抗体检测。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
非纯化ab92471(1/500)染色非同步HeLa细胞(绿色)中的MSH6。 细胞固定在多聚甲醛中,用0.5%Triton X100/PBS渗透,用DAPI复染,以突出细胞核(红色)。 有关进一步的实验细节,请参阅abreview。 -
在免疫组织化学分析中使用“ab92471”对“抗-MSH6抗体[EPR3945]”进行组织微阵列染色。该表提供了每种测试样本类型的阳性(勾号)和阴性(交叉标记)染色的详细概述。使用Bond热介导抗原检索对切片进行预处理 ™ 表位检索溶液2(pH 9.0)20分钟。 将切片与ab92471在室温下孵育30分钟,然后使用即用兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 ). 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® RX仪器。 -
在免疫组织化学分析中使用“ab92471”对“抗-MSH6抗体[EPR3945]”进行组织微阵列染色。该表提供了每种测试样本类型的阳性(勾号)和阴性(交叉标记)染色的详细概述。使用Bond热介导抗原检索对切片进行预处理 ™ 表位检索溶液2(pH 9.0)20分钟。 将切片与ab92471在室温下孵育30分钟,然后使用即用兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 ). 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® RX仪器。
数据表及文件
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文献 (52)
Takano S公司 等。 对所有阶段胰腺癌患者通过内镜获得的组织进行下一代测序。 癌症科学 113:1069-1077 (2022). 公共医学:34962016 科斯特S 等。 在患者衍生的子宫颈外器官中模拟衣原体和HPV的共同感染揭示了不同的细胞重编程。 国家公社 13:1030 (2022). 公共医学:35210413 廖毅 等。 PD-1抑制剂联合贝伐单抗治疗晚期子宫内膜癌错配修复缺陷(dMMR)/高水平微卫星不稳定性(MSI-H)患者的疗效。 医学科学Monit 28:e934493(2022)。 公共医学:35322001 关B 等。 疑似Lynch综合征的上尿路上皮癌种系突变的鉴定。 前Oncol 12:774202 (2022). 公共医学:35372080 卡丁DB 等。 阿维鲁单抗治疗小肠腺癌的安全性和疗效。 临床结直肠癌 21:236-243 (2022). 公共医学:35450836