重组抗乳酸脱氢酶[EP1566Y]（ab52488）

ab52488用ICC/IF（免疫细胞化学/免疫荧光）染色HeLa（人宫颈腺癌）细胞中的乳酸脱氢酶。细胞用4%的聚甲醛固定，并用0.1%的Triton X-100渗透。样品与一级抗体以1/100的稀释度孵育。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor®488）(约150077)以1/1000的稀释度作为二级抗体。约7291和ab150120型作为一抗ab52488和二抗的副染色约150077分别用DAPI作核染色。

阴性对照1：兔一级抗体和抗鼠二级抗体(ab150120型)
阴性对照2：小鼠初级抗体(约7291)和抗兔二级抗体(约150077)

Raw264.7（小鼠abelson小鼠白血病病毒诱导肿瘤）全细胞裂解物的细胞内流式细胞术分析，用纯化的ab52488标记1/190（红色）的乳酸脱氢酶。细胞用4%多聚甲醛固定。Alexa荧光粉^®使用488缀合的山羊抗兔IgG（1/500）作为第二抗体。黑色-同位素对照，兔单克隆IgG。蓝色-未标记对照，细胞未与初级和次级抗体孵育。 

ab52488免疫沉淀乳酸脱氢酶。将10µg细胞裂解液与1/30稀释度的一级抗体和用于IP检测试剂（HRP）的VeriBlot孵育(阿布131366)稀释度为1/10000。

车道1：HeLa（人子宫颈腺癌）全细胞裂解物（10ug）
车道2：HeLa（人宫颈腺癌）全细胞裂解物
3号车道：兔单克隆IgG(约172730)在HeLa（人宫颈腺癌）全细胞裂解液中代替ab52488

未纯化ab52488染色HeLa细胞的ICC/IF图像。细胞被100%甲醇固定（5分钟），然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中培养1小时，以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后将细胞与抗体（ab52488，1µg/ml）在+4°C下孵育过夜。二级抗体（绿色）为Alexa Fluor^®488只山羊抗兔IgG（H+L），以1/1000稀释度使用1小时。Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜（红色）1小时。采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核（蓝色）进行染色。

ab52488免疫组织化学染色小鼠肝组织切片中的乳酸脱氢酶（IHC-P-副甲醛固定，石蜡包埋切片）。用多聚甲醛固定组织，在EDTA缓冲液中通过热介导回收抗原。样品与一级抗体孵育，稀释度为1/2000。山羊抗兔IgG H&L（HRP）ab97051型以1/500的稀释度作为二级抗体。

阴性对照1：PBS代替一级抗体。

用免疫组织化学方法（IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片）对人乳腺癌组织切片中的乳酸脱氢酶进行ab52488染色。用多聚甲醛固定组织，在EDTA缓冲液中通过热介导回收抗原。样品与一级抗体孵育，稀释度为1/2000。ab97051型作为二级抗体。

阴性对照1：PBS代替一级抗体。

使用1/50稀释度的未纯化ab52488对石蜡包埋人肝癌进行免疫组织化学分析。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

ab52488免疫组织化学染色小鼠肝组织切片中的乳酸脱氢酶（IHC-P-副甲醛固定，石蜡包埋切片）。用多聚甲醛固定组织，在EDTA缓冲液中通过热介导回收抗原。样品与一级抗体孵育，稀释度为1/2000。山羊抗兔IgG H&L（HRP）ab97051型以1/500的稀释度作为二级抗体。

阴性对照1：PBS代替一级抗体。

重叠直方图显示HeLa细胞用未纯化ab52488染色（红线）。用甲醇固定细胞（5分钟），然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞，以阻止非特异性蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab52488，1/50稀释）培养30分钟。使用的二级抗体是DyLight^®488山羊抗兔IgG（H+L）(约96899)在22°C下，1/500稀释30分钟。同型对照抗体（黑线）为兔单克隆IgG（1µg/1x10⁶电池）在相同条件下使用。采集了超过5000个事件。该抗体在用4%多聚甲醛（10分钟）固定/在相同条件下用0.1%PBS-Tween渗透的HeLa细胞中发出轻微降低的信号。