重组抗Ki67抗体[SP6]（ab16667）

在免疫组织化学分析中，使用1/200稀释度（0.145μg/ml）的“ab16667”对“抗Ki67抗体[SP6]”进行染色的组织微阵列。该表提供了阳性（勾号）和阴性（交叉号）的详细概述每个测试样本类型的染色。以小鼠脾组织为例，Ki67在正常肝组织中几乎不表达或表达水平很低，IHC试验结果通常为阴性。而Ki67在脾组织增殖细胞中的表达上调，IHC试验结果为阳性。
切片使用热介导的抗原回收进行预处理约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。切片在+4°C下与ab16667孵育过夜，然后使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880). 苏木精用作反染色。

福尔马林固定石蜡包埋人结肠癌组织切片中ab16667染色Ki67的IHC图像。用ab16667在1/200（0.145μg/ml）稀释液中孵育切片，并准备使用山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880)被用作二次内酰脲。人结肠癌的阳性染色。该切片在4°C下与ab16667孵育过夜。用苏木精对切片进行复染。 

热介导抗原检索使用约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。

用1/200（0.145µg/ml）ab16667标记Ki67的石蜡包埋小鼠肾组织，然后用现成的LGoat抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）二级抗体进行免疫组织化学分析(约214880).低表达：仅在小鼠肾脏增殖细胞（箭头）上呈阳性染色。将切片在4°C下用ab16667孵育过夜，并用苏木精复染。

仅二级抗体对照：二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880).

热介导抗原检索使用约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。

用1/200（0.145µg/ml）的ab16667标记石蜡包埋小鼠肝组织Ki67，然后用现成的LGoat抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）二级抗体进行免疫组织化学分析(约214880).低表达：仅在小鼠肝脏的增殖细胞（箭头）上呈阳性染色。将切片在4°C下用ab16667孵育过夜，并用苏木精复染。

仅二级抗体对照：二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880).

热介导抗原检索使用约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。

用1/200（0.145µg/ml）的ab16667对石蜡包埋的人肾组织标记Ki67进行免疫组织化学分析，然后使用现成的LGoat抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）二级抗体(约214880).低表达：阳性染色仅见于人肾脏的增殖细胞（箭头）。将切片在4°C下用ab16667孵育过夜，并用苏木精复染。

仅二级抗体对照：二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880).

热介导抗原检索使用约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。

用1/200（0.145µg/ml）的ab16667对石蜡包埋的人肝组织标记Ki67进行免疫组织化学分析，然后使用现成的LGoat抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）二级抗体(约214880).低表达：阳性染色仅见于人肝脏的增殖细胞（arrow）。将切片在4°C下用ab16667孵育过夜，并用苏木精复染。

仅二级抗体对照：二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880).

热介导抗原检索使用约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。

在免疫组织化学分析中，使用1/200稀释度（0.145μg/ml）的“ab16667”对“抗Ki67抗体[SP6]”进行染色的组织微阵列。该表提供了阳性（勾号）和阴性（交叉号）的详细概述每个测试样本类型的染色。以人结肠组织为例，正常结肠组织中Ki67几乎不表达或表达水平很低，IHC检测结果通常为阴性。而Ki67的表达可以在结肠组织的增殖细胞中上调，并且IHC测试结果可能是阳性的。
切片使用热介导的抗原回收进行预处理约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。切片在+4°C下与ab16667孵育过夜，然后使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP聚合物）(约214880). 苏木精用作反染色。

ab16667染色野生型HAP1细胞中的Ki67（顶面板）和Ki67敲除HAP1的细胞（底面板）。细胞用100%甲醇固定5分钟，用0.1%Triton X-100渗透5分钟，然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。然后用ab16667以1/250的稀释度培养细胞，并公元195889年以1/250稀释（显示为伪红色），在+4°C下过夜，然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488）预吸附（ab150081）二级抗体浓度为2μg/ml（以绿色显示）。核DNA用DAPI标记为蓝色。

这张图片是由杂交瘤版本生成的。

1-3车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-在359 kDa下观察到ab16667。红色-装载控制，约130007在125 kDa时观察到。  

在野生型HeLa细胞中，ab16667与Ki67反应。敲除细胞系时观察到信号丢失约255407（敲除细胞裂解物约263762)已使用。对野生型和Ki67基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。ab16667和抗V蛋白抗体[VIN-54](约130007)分别在4°C下以1/100稀释度和1/20000稀释度培养过夜。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye^®800CW）预吸附床(邮编：216773)和山羊抗鼠IgG H&L（IRDye^®680RD）预吸附床(约216776)二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。

福尔马林固定石蜡包埋人扁桃体切片的免疫组织化学分析，以1/200（0.156µg/mL）的ab16667标记Ki67。 

图像A: 
第二抗体是现成的山羊抗兔IgG H&L（HRP聚合物）
人类扁桃体组织与ab16667在+4°C下孵育过夜。
热介导抗原检索约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。
人类扁桃体上的核染色。该切片在+4°C下与ab16667孵育过夜。

图像B：
二级抗体是现成的LeicaDS9800（Bond™ 聚合物精制检测）
在徕卡生物系统BOND上用ab16667培养人扁桃体组织^®RX仪器。
用柠檬酸缓冲液（pH 6.0，表位检索溶液2）进行20分钟的热介导抗原检索。

福尔马林固定石蜡包埋大鼠脾组织切片中ab16667染色Ki67的IHC图像。用热介导抗原回收（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）对切片进行预处理。然后用ab16667，1/200（0.156µg/mL）稀释液对切片进行培养，并使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）抗体进行检测。大鼠脾脏的核染色。该切片在+4°C下与ab16667孵育过夜。DAB被用作显色剂。然后用苏木精对切片进行复染。 

福尔马林固定石蜡包埋人扁桃体组织切片中ab16667染色Ki67的IHC图像。使用热介导抗原检索对切片进行预处理约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。然后用ab16667，1/200（0.156µg/ml）稀释液培养切片，并使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）抗体进行检测。观察到人类扁桃体的核染色。该切片在+4°C下与ab16667孵育过夜。DAB被用作显色剂。然后用苏木精对切片进行复染。 

正常人扁桃体组织的荧光多重免疫组织化学分析（福尔马林固定石蜡包埋切片）。

抗PD1融合染色(ab237728号; 橙色；蛋白石™520），抗PDL1(第237726页; 绿色；蛋白石™540），抗CD68(约192847年; 黄色的；蛋白石™570），抗CD3(公元16669年; 红色；蛋白石™620），抗Ki67（ab16667；浅蓝色；蛋白石™650）和防PanCK(约7753; 灰色；蛋白石™690）。

在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色^®带有蛋白石的RX仪器™ 7色自动IHC套件（NEL821001KT，Akoya Biosciences^®).

切片在六轮染色中培养；按照…的顺序ab237728号（1/500稀释），第237726页（1/500稀释），约192847年（1/300稀释），公元16669年（1/300稀释），ab16667（1/200稀释）和约7753（1/200稀释）；每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。

柠檬酸钠抗原检索（徕卡ER1，pH6.0，30分钟）用于轮间酪胺信号放大，以去除前一轮的抗体，避免任何交叉反应。

DAPI（深蓝色）用作核反染剂。

单个蛋白石的显微镜和假染色™ 使用Vectra Polaris进行染色。

这张图片是由杂交瘤版本生成的。

人扁桃体标记PD1的免疫组织化学（福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片）分析约243644在1/500稀释度（1.02µg/mL）下（D），Ki67和ab16667在1/200稀释度（0.15μg/mL）下（B），PD-L1和约228462稀释度为1/100（0.52μg/ml）（C）。蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体，DAPI用于核反染。用柠檬酸缓冲液（pH 6.0，表位检索溶液1）进行20分钟的热介导抗原检索。

A组：抗Ki67融合染色（洋红；蛋白石™690），抗PD-L1（红色；蛋白石™570）和抗PD1（绿色；蛋白石™520）。
B组：增殖细胞核抗Ki67染色。
C组：参与T细胞抑制的细胞膜上的抗PD-L1染色。
图D：在抗原刺激的T细胞上染色的抗PD1。

切片经过三轮染色培养：按照ab16667的顺序培养10分钟，约24364430分钟约228462在室温下保持10分钟。每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。

在莱卡生物系统BOND®RX仪器上使用蛋白石进行免疫染色™ 四色套装。使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。

福尔马林固定石蜡包埋小鼠脾组织切片中ab16667染色Ki67的IHC图像。使用热介导抗原检索对切片进行预处理约93678（柠檬酸缓冲液，pH 6.0）。然后用ab16667，1/200（0.156µg/mL）稀释液培养切片，并使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）抗体进行检测。小鼠脾脏的核染色。该切片在+4°C下与ab16667孵育过夜。DAB被用作显色剂。然后用苏木精对切片进行复染。 

仅二级抗体对照：二级抗体为约1500771000稀释度（2µg/mL）的山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488）。

仅二级抗体对照：二级抗体为约1500771000稀释度（2µg/mL）的山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488）。

4%多聚甲醛固定90%甲醇渗透亲本HAP1（野生型对照人慢性粒细胞白血病近单倍体细胞系）细胞的细胞内流式细胞术分析，在1/500稀释度（0.1ug）（红色）下用ab16667标记Ki67，与兔单克隆IgG比较(约172730)（黑色）同型对照和未标记对照（未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞）（蓝色）。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor®488，约150077)以1/2000稀释液作为二级抗体。

重叠直方图显示用ab16667染色的HAP1野生型（绿线）和HAP1-MKI67敲除细胞（红线）。用80%甲醇固定细胞（5分钟），然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清中培养细胞，以阻止非特异性蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab16667,1/1000）培养30分钟。使用的二级抗体是山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor^®488）预吸附层(约150081)二级抗体在22°C下以1/2000稀释30分钟。兔IgG同型控制抗体(约172730)在与第一抗体相同的浓度和条件下使用（HAP1野生型-黑线，HAP1-MKI67敲除-灰线）。未标记样本也用作对照（为了简单起见，未显示此行）。使用50 mW蓝光激光器（488nm）和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。这张图片是从杂交瘤版本生成的。 

用1/250稀释度的ab16667标记Ki67的人心脏干细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。细胞固定在多聚甲醛中，用Triton x-100渗透，0.01%。细胞在室温下用BSA封闭1小时。多克隆鸡抗兔Alex Fluor^®488第二抗体以1/500稀释使用。 

这张图片是由杂交瘤版本生成的。

参见Abreview

用免疫组织化学方法（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）对人睾丸中Ki67进行ab16667染色。用甲醛固定组织，并使用柠檬酸盐缓冲液执行热介导抗原回收步骤。然后在21℃下用1%的BSA封闭样品10分钟，然后在1/100的温度下用一级抗体孵育2小时。使用生物素结合的山羊抗兔多克隆作为次级抗体，稀释度为1/250。

这张图片是由杂交瘤版本生成的。

参见Abreview

ab16667用ICC/IF（免疫细胞化学/免疫荧光）染色人HEp-2细胞中的Ki67-增殖标记物。细胞用多聚甲醛固定，并用Triton X-100 0.25%在PBS中渗透。样品与一级抗体（DPBS中的1/50）在21°C下孵育1小时。使用Atto488缀合的驴抗兔多克隆（1/50）作为第二抗体。

这张图片是由杂交瘤版本生成的。

参见Abreview