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表观遗传学与核信号 组蛋白 HMG(热湿气体)
使用敲除细胞株进行验证重组拉布MAb

重组抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

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Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
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  • 抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

主要功能和细节

  • 重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全
  • 兔单克隆[EPR3507]到HMGB1
  • 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、WB、IHC-P
  • 敲除已验证
  • 反应对象:小鼠、大鼠、人类

共轭标志相关共轭物和制剂

Alexa Fluor®405 Alexa Fluor®488型 Alexa Fluor®555 Alexa Fluor®594公司 Alexa Fluor®647型 空气污染指数 无运营商 人力资源计划 体育课

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敲除
产品形象
人HMGB1敲除HeLa细胞系(ab255395)

查看更多相关产品

概述

  • 产品名称

    抗-HMGB1抗体[EPR3507]
    参阅全部 HMGB1标准一抗
  • 描述

    兔单克隆抗体[EPR3507]至HMGB1
  • 宿主

    兔子
  • 经测试应用

    适用于:流动周期(内部),国际商会/国际单项体育联合会,工作分解结构,IHC-P公司更多详细信息
    不适用于:IP(IP)
  • 种属反应性

    与反应:老鼠、老鼠、人
  • 免疫原

    合成肽。此信息为Abcam和/或其供应商专有。

  • 阳性对照

    • WB:SK-BR-3、HeLa、HepG2、Jurkat和野生型HAP1全细胞裂解物;大鼠脑组织裂解物。IHC-P:人体肾脏和扁桃体组织。ICC/IF:DU 145、HeLa、HAP1野生型和RAW 264.7细胞。流式细胞仪(内部):HeLa细胞。
  • 常规说明

    该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点:

    • -高批次一致性和再现性
    • -提高敏感性和特异性
    • -长期供应安全
    • -无动物制作
    有关更多信息请看这里.

    我们的RabMAb®该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。有关我们专利的详细信息,请参阅拉布MAb®专利.

    我们一直在努力确保为客户提供一流的抗体。由于这项工作,我们很高兴现在能够以纯化的形式提供这种抗体。我们正在更新数据表。纯化格式在我们的产品标签上指定为“PUR”。如果您对此更新有任何疑问,请联系我们的科学支持团队。

性能

  • 形式

    液体
  • 存放说明

    在4°C下装运。短期储存在+4°C下(1-2周)。交付时,等分。储存于-20°C。在-20°C下稳定12个月。
  • 存储溶液

    pH值:7.20
    防腐剂:0.01%叠氮化钠
    成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白
  • 浓度信息加载。。。
  • 纯度

    蛋白质A纯化
  • 克隆

    单克隆
  • 克隆编号

    EPR3507型
  • 同种型

    免疫球蛋白G
  • 研究领域

    • 表观遗传学与核信号
    • 组蛋白
    • HMG(热湿气体)
    • 表观遗传学与核信号
    • 转录
    • 域系列
    • HMG箱
    • 微生物学
    • 有机体
    • 病毒
    • RNA病毒
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    • 神经科学
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  • 兼容的辅助设备

    • 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)(约150077)
    • 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(约205718)
    • 山羊抗狂犬病IgG H&L(DyLight®488)预吸附(约96899)
  • 同位素控制

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  • KO细胞系

    • 人HMGB1敲除HeLa细胞系(约255395)
  • KO细胞裂解物

    • 人HMGB1敲除HeLa细胞裂解物(约263782)
  • 阳性对照

    • Hep G2核提取物裂解物(约14660)
  • 重组蛋白

    • 重组人HMGB1蛋白(约167718)
  • 相关产品

    • 预染蛋白阶梯-宽分子量(10-245 kDa)(约116028)

应用

Abpromise担保

阿布诺瓦™承诺保证使用约79823于以下的经测试应用

“应用说明”部分 下显示的仅为推荐的起始稀释度;实际最佳的稀释度/浓度应由使用者检定。

应用 抗体评论 说明
流动周期(内部)
1/30.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。

国际商会/国际单项体育联合会 (1)
1/250.
工作分解结构 (5)
1/10000 - 1/50000. 检测约25 kDa的带(预测分子量:25 kDa.)。
IHC-P公司 (1)
1/350 - 1/400. 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

请参见IHC抗原检索协议.

说明
流动周期(内部)
1/30.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。

国际商会/国际单项体育联合会
1/250.
工作分解结构
1/10000 - 1/50000. 检测约25 kDa的带(预测分子量:25 kDa.)。
IHC-P公司
1/350 - 1/400. 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

请参见IHC抗原检索协议.

应用说明
不适用于IP。

靶标

  • 功能

    多功能氧化还原敏感蛋白,在不同的细胞隔室中具有不同的作用。细胞核中是主要的染色质相关非组蛋白之一,作为DNA伴侣参与复制、转录、染色质重塑、V(D)J重组、DNA修复和基因组稳定性。建议成为一种通用的核酸生物传感器。促进宿主对无菌和感染信号的炎症反应,并参与先天性和适应性免疫反应的协调和整合。细胞质中作为免疫原核酸的传感器和/或伴侣,涉及TLR9介导的免疫反应的激活,并介导自噬。作为危险相关分子模式(DAMP)分子,在组织损伤期间增强免疫反应。释放到细胞外环境可以结合DNA、核小体、IL-1β、CXCL12、AGER亚型2/sRAGE、脂多糖(LPS)和脂磷壁酸(LTA),并通过多种表面受体的参与激活细胞。在细胞外室中,完全减少的HMGB1(由坏死释放)作为趋化因子,二硫键HMGB1作为细胞因子(积极分泌),磺酰HMGB1则(由凋亡细胞释放)促进免疫耐受(PubMed:23519706,PubMed:33446148,PubMet:23994764,PubMer:25048472)。具有促血管生成活性(根据相似性)。可能参与血小板活化(根据相似性)。与磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇酰胺结合(通过相似性)。与RAGE结合介导神经元生长信号(通过相似性)。可能在扩大聚谷氨酰胺(polyQ)蛋白质的积累中发挥作用,例如亨廷顿蛋白(HTT)或TBP(PubMed:23303669,PubMed:25549101)。
    核功能归因于HGMB1的完全降低。与染色质结合并结合DNA,优先选择非标准DNA结构,如单链DNA、含DNA的十字形或弯曲结构、超螺旋DNA和ZDNA。可以弯曲DNA并通过环化增强DNA的灵活性,从而通过增强转录因子结合和/或使远程调控序列接近,提供一种机制来促进各种基因启动子的活性(PubMed:20123072)。可能在核苷酸切除修复(NER)中起增强作用(通过相似性)。然而,使用体外系统在NER中的效果却有矛盾的报道(PubMed:19446504,PubMed:19360789)。可能参与错配修复(MMR)和基底切除修复(BER)通路(PubMed:15014079,PubMed:16143102,PubMet:17803946)。可能参与双绞线断裂修复,如非同源端接(NHEJ)(通过相似性)。作为RAG复合体的辅因子参与V(D)J重组:通过刺激保守重组信号序列(RSS)23 bp间隔区的裂解和RAG蛋白结合发挥作用(通过相似性)。体外可以从高度弯曲的DNA中置换组蛋白H1(根据相似性)。可以重组标准核小体,导致转录因子结合的结构约束放松(通过相似性)。增强固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)(如SREBF1)与其同源DNA序列的结合,并增加其转录活性(通过相似性)。促进TP53与DNA的结合(PubMed:23063560)。建议以与HSPB1相关的转录依赖方式参与线粒体质量控制和自噬;然而,这一功能受到了质疑(通过相似性)。可以调节端粒酶复合体的活性,并可能参与端粒的维持。
    在细胞质中,建议通过与BECN1的竞争性相互作用分离BECN1:BCL2复合物,导致自噬激活(PubMed:20819940)。参与氧化应激介导的自噬(PubMed:21395369)。可以保护BECN1和ATG5免受钙蛋白酶介导的分裂,从而控制其促自噬和促凋亡功能,并调节炎症相关细胞损伤的程度和严重程度(通过相似性)。在髓系细胞中,通过促进自噬对内毒素血症和细菌感染具有保护作用(通过相似性)。参与巨噬细胞对CpG-DNA的反应中TLR9的内体移位和激活。
    细胞外室(主动分泌或被动释放后)参与炎症反应的调节。完全降低的HGMB1(释放后会被氧化)与CXCL12相关,在组织损伤的初始阶段介导炎症细胞的募集;CXCL12:HMGB1复合物触发CXCR4同二聚化(PubMed:22370717)。诱导单核细胞衍生的未成熟树突状细胞的迁移,并似乎调节与AGER/RAGE和ITGAM相关的中性粒细胞的粘附和迁移功能(通过相似性)。可结合各种类型的DNA和RNA,包括微生物非甲基化CpG-DNA,以增强对核酸的先天免疫反应。建议在混杂的DNA/RNA传感中发挥作用,该传感与特定模式识别受体随后的区分传感相配合(通过相似性)。促进与AGER/RAGE相关的细胞外DNA诱导的AIM2炎症小体激活(PubMed:24971542)。二硫HMGB1与跨膜受体结合,如AGER/RAGE、TLR2、TLR4和可能的TREM1,从而激活其信号转导途径。调节细胞因子/趋化因子的释放,如TNF、IL-1、IL-6、IL-8、CCL2、CCL3、CCL4和CXCL10(PubMed:12765338,PubMed:18354232,PubMet:19264983,PubMed:20547845,PubMed:24474694)。促进巨噬细胞刺激的自然杀伤(NK)细胞与其他细胞因子如IL-2或IL-12协同分泌干扰素-γ(PubMed:15607795)。TLR4被认为是促进巨噬细胞活化的主要受体,通过TLR4进行信号传递似乎与LY96/MD-2有关(PubMed:20547845)。在细菌LPS或LTA介导的炎症反应中,炎症反应与内毒素结合,并将其转移到CD14,以向相应的TLR4:LY96和TLR2复合物发出信号(PubMed:18354232,PubMed:21660935,PubMet:25660311)。通过与ACER/RAGE的关联促进肿瘤增殖(通过相似性)。可通过IL1R1:IL1RAP受体复合物结合IL1-beta和信号(PubMed:18250463)。与A类CpG结合可激活与TLR9、MYD88和AGER/RAGE相关的浆细胞样树突状细胞中的细胞因子生成,并可激活自身反应性B细胞。通过含HMGB1的染色质免疫复合物,还可以通过B细胞受体(BCR)依赖性和ACER/RAGE依赖性机制(通过相似性)促进B细胞对内源性TLR9配体的反应。抑制巨噬细胞吞噬凋亡细胞;该功能依赖于多聚腺苷二磷酸核糖化,并与凋亡细胞细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合(根据相似性)。适应性免疫可能通过激活效应T细胞和抑制调节性T(TReg)细胞来增强免疫(PubMed:15944249,PubMed:22473704)。相反,在不涉及效应或调节性T细胞的情况下,表达淋巴毒素LTA:LTB异源三聚体的T细胞需要肿瘤浸润和激活,从而促进肿瘤恶性进展(通过相似性)。也有报道限制T细胞增殖(根据相似性)。释放HMGB1:凋亡过程中形成的核小体复合体可以通过TLR2发出信号,诱导细胞因子产生(PubMed:19064698)。参与凋亡细胞诱导免疫耐受;当凋亡细胞释放其促炎活性时,活性氧物种(ROS)依赖的氧化作用(特别是Cys-106)可中和其促炎作用(PubMed:18631454)。在巨噬细胞活化过程中,活化的淋巴细胞衍生的自凋亡DNA(ALD-DNA)促进ALD-DNA向内体的募集。
  • 组织特异性

    无处不在。以血小板表达(PubMed:11154118)。
  • 序列相似性

    属于HMGB家族。
    包含2个HMG盒DNA绑定域。
  • 结构域

    HMG盒2介导促炎细胞因子刺激活性并与TLR4结合(PubMed:12765338,PubMed:20547845)。然而,在凋亡诱导免疫耐受的背景下,不参与介导免疫原活性(PubMed:24474694)。
    酸性C末端结构域形成一个柔性结构,可以与HMG盒在分子内可逆地相互作用,并调节与DNA和其他蛋白质的结合(PubMed:23063560)。
  • 翻译后修饰

    丝氨酸残基磷酸化。NLS两个区域的磷酸化是细胞质易位和分泌所必需的(PubMed:17114460)。
    LPS刺激后在多个部位乙酰化(PubMed:22801494)。核定位信号(NLS1和NLS2)中赖氨酸残基的乙酰化导致细胞质定位和随后的分泌(通过相似性)。Lys-3上的乙酰化导致优先结合DNA末端并削弱DNA弯曲活性。
    半胱氨酸残基Cys-23、Cys-45和Cys-106的还原/氧化,以及可能的分子内二硫键(涉及Cys-23和Cys-44),在不同的细胞隔室中产生具有特定功能活性的不同氧化还原形式:1-完全还原HMGB1(HMGB1C23hC45hC106h),2-二硫化物HMGB1(HMGB1C23-C45C106h)和3-磺酰基HMGB1。
    LPS刺激后分泌的PARP1可使多聚ADP-核糖化。
    CASP1的体外裂解释放出一种含有HMG盒1的肽,该肽可能介导免疫原性活性;该肽拮抗凋亡诱导的免疫耐受(PubMed:24474694)。可被凝血酶水解:血栓调节蛋白复合物;减少与肝素的结合和促炎活性。
  • 细胞定位

    核心。染色体。细胞质。保密。细胞膜。内体。内质网-高尔基体中间隔室。基态主要为核。在细胞质和细胞核之间穿梭(PubMed:12231511,PubMed:17114460)。在自噬刺激下从细胞核转移到细胞质(PubMed:20819940)。巨噬细胞在细胞外环境中的释放需要激活NLRC4或NLRP3炎性体(根据相似性)。通过扩散将坏死细胞被动释放至细胞外环境,包括完全还原的HGMB1,随后被氧化(PubMed:19811284)。也由凋亡细胞释放(PubMed:16855214,PubMed:18631454)。各种免疫细胞和非免疫细胞(如巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞)对各种刺激(如脂多糖和细胞因子)的主动分泌涉及通过分泌溶酶体的非常规分泌过程(PubMed:12231511,PubMed:14532127,PubMet:15944249)。血浆细胞对LPS的反应而分泌(通过相似性)。发现于活化血小板表面(PubMed:11154118)。
  • 上述目标信息来自:UniProt加入P09429号UniProt财团
    2010年全球蛋白质资源(UniProt)
    核酸研究38:D142-D148(2010).

    UniProt提供的信息
  • 数据库链接

    • Entrez基因:3146人类
    • Entrez基因:100862258鼠标
    • Entrez基因:15289鼠标
    • Entrez基因:25459老鼠
    • Omim公司:163905人类
    • 瑞士保护银行:P09429号人类
    • 瑞士保护银行:第63158页鼠标
    • 瑞士保护银行:第63159页老鼠
    • 尤尼金:434102人类
    • 尤尼金:593339人类
    • 尤尼金:596078人类
    • 尤尼金:207047鼠标
    • 尤尼金:313345鼠标
    • 尤尼金:144565老鼠
    • 尤尼金:15185老鼠
    • 尤尼金:4121老鼠
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  • 别名

    • 两性激素抗体
    • 染色体蛋白、非组蛋白、HMG1抗体
    • DKFZp686A04236抗体
    • 高迁移率组1抗体
    • 高迁移率族盒1抗体
    • 高迁移率族蛋白1抗体
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    • 磺基葡萄糖醛酸糖结合蛋白抗体
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  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    所有车道:抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823),稀释度为1/10000

    车道1:野生型HeLa细胞裂解物
    车道2:HMGB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解物

    每车道20µg的裂解液/蛋白质。

    在还原条件下进行。

    预测的带宽大小:25千Da
    观察到的频带大小:30千Da为什么实际的频带大小与预测的不同?



    1-2车道:合并信号(红色和绿色)。绿色-在30 kDa下观察到ab79823。红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制(约8245)在37 kDa时观察到。

    western blot显示ab79823与野生型HeLa细胞中的HMGB1反应。当CRISPR/Cas9编辑细胞系时,观察到预期大小的信号丢失约255395(CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物约263782)已使用。在25kDa以下的通道2中观察到的带可能代表截断形式和劈开碎片。对野生型HeLa和HMGB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解液进行SDS-PAGE分析。在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。ab79823和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制(约8245)在4°C下过夜,分别以1/10000和1/20000稀释。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附床(ab216773号)和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床(约216776)二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    ab79823染色野生型HAP1细胞中的HMGB1(顶面板)和HMGB1敲除HAP1的细胞(底面板)。细胞用4%甲醛固定10分钟,用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。然后用ab79823以1/250的稀释度培养细胞,并约195889年以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附剂进一步孵育1小时(约150081)2μg/ml的二级抗体(以绿色显示)。核DNA用DAPI标记为蓝色。

    使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。

  • 免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    人类扁桃体组织用未纯化ab79823标记HMGB1(1/350)的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。使用预先稀释的HRP聚合物结合的抗兔IgG作为二级抗体。苏木精复染。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    所有车道:抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823),稀释度为1/10000

    车道1:野生型HAP1全细胞裂解物
    车道2:HMGB1敲除HAP1全细胞裂解物
    3号车道:Jurkat全细胞裂解物
    车道4:HeLa全细胞裂解物

    每车道20µg的裂解液/蛋白质。

    预测的带宽大小:25千Da



    1-4车道:合并信号(红色和绿色)。绿色-在30 kDa下观察到ab79823。红色-装载控制,约9484,在37 kDa下观察到。


    ab79823在野生型HAP1细胞中与HMGB1特异性反应,因为HMGB1敲除细胞中信号丢失。对野生型和HMGB1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。ab79823和约9484(小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/10000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸收床ab216773号和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸收床约216776二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)图片来自维琴蒂诺AR等人,《公共科学图书馆·综合》。2012;7(6):e39104.电子出版2012年6月18日。图4。;doi:10.1371/journal.pone.0039104;2012年6月18日,《公共科学图书馆·综合》7(6):e39104。

    未经处理(上面板)或经LPS处理(下面板)的小鼠RAW 264.7巨噬细胞的免疫荧光分析。HMGB1用未纯化的ab79823染色。
    细胞固定在多聚甲醛中,在BSA中封闭1小时,然后在10%Triton X-100中渗透30分钟。样品在4°C下与一级抗体孵育过夜。Alexa Fluor公司®用488-结合的抗兔IgG作为二级抗体。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    未纯化ab79823染色的DU 145(人前列腺癌细胞系)细胞的ICC/IF图像。细胞经4%甲醛固定(10分钟),然后在1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后将细胞与抗体ab79823以1/1000的稀释度在+4°C下孵育过夜。二级抗体(绿色)为DyLight®488山羊抗兔(约96899)以1/1000稀释度使用IgG(H+L)1小时。Alexa Fluor公司®594 WGA用于标记1/200稀释1h的质膜(红色)。采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    HeLa细胞的免疫细胞电泳/免疫荧光分析,用未纯化的ab79823标记HMGB1(红色)(1/350)。细胞用4%多聚甲醛固定。Alexa Fluor公司®用555结合的山羊抗兔IgG(1/200)作为二级抗体。DAPI(蓝色)复染。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    所有车道:抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823),1/10000稀释(纯化)

    车道1:SK-BR-3(人乳腺癌细胞系)细胞裂解物
    车道2:HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞裂解物

    每车道10µg的裂解液/蛋白质。

    次要
    所有车道:1/1000稀释度的过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)

    预测的带宽大小:25千Da
    观察到的频带大小:25千Da



    阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    1/10000稀释(纯化)的抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)+10µg的大鼠脑组织裂解物

    次要
    1/1000稀释度的过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)

    预测的带宽大小:25千Da
    观察到的频带大小:25千Da



    阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    所有车道:1/50000稀释(未净化)的抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    车道1:SK-BR-3细胞裂解物
    车道2:HeLa细胞裂解物
    3号车道:HepG2细胞裂解物

    每车道10µg的裂解液/蛋白质。

    次要
    所有车道:羊抗兔HRP结合物1/2000稀释

    预测的带宽大小:25千Da
    观察到的频带大小:25千Da

  • 免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    用未纯化ab79823在1/250稀释度下标记HMGB1的人肾组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。

    在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

  • 流式细胞术(细胞内)-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    流式细胞术(细胞内)-抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

    重叠直方图显示HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞用未纯化的ab79823(红线)染色。用甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab79823,1/20稀释)培养30分钟。使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L)(约96899)在22°C下,1/500稀释30分钟。同型对照抗体(黑线)为兔单克隆IgG(0.5µg/1x106电池)在相同条件下使用。采集了超过5000个事件。在相同条件下使用4%多聚甲醛/0.1%PBS-Tween 20渗透固定的HeLa细胞中,该抗体发出的信号减弱

     

     

  • 抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)
    抗-HMGB1抗体[EPR3507](ab79823)

实验方案

  • 流式细胞术协议
  • 免疫组织化学方案
  • 免疫细胞化学和免疫荧光协议
  • Western blot协议

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数据表及文件

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文献(195)

发表研究结果有使用约79823?请让我们知道,以便我们可以引用本数据表中的参考文章。

约79823被引用在 195文献中.

  • 肖Y等。 膝关节骨性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡与HMGB1分泌的关系。 分子医学代表23:不适用(2021年)。公共医学:33300062
  • 赵H等。 异丙酚通过PPAR抑制炎症和凋亡改善内毒素诱导的心肌细胞损伤/HMGB1/NLRP3轴。 分子医学代表23:不适用(2021年)。公共医学:33398367
  • 卡奈R等。 干扰素-?增强间充质干细胞对实验性肾纤维化的治疗作用。 科学代表11:850 (2021).公共医学:33441701
  • Dong H和Song JmiR-142-3p通过负调控HMGB1的细胞质定位降低人宫颈癌细胞的生存能力。 实验治疗学21:212 (2021).公共医学:33500702
  • 李·JJ等。 HMGB1通过TRIM30a调节癌细胞,调控STING介导的衰老。 细胞死亡发现7:28 (2021).公共医学:33558529
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1-8属于8 Abreviews或问答

免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)检测抗-HMGB1抗体[EPR3507]

杰出的
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应用程序
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)
样品
人体组织切片(扁桃体)
抗原检索步骤
热介导-使用的缓冲液/酶:徕卡ER2
渗透作用
不
规范
扁桃体
固定的
甲醛
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提交于 2021年5月13日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

杰出的
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应用程序
蛋白质印迹
样品
人细胞裂解物-全细胞(成纤维细胞)
凝胶运行条件
非还原非变性(天然)(凝胶12%)
装载量
30微克
治疗
100uM丙酮酸乙酯
规范
成纤维细胞
阻塞步骤
BSA作为封闭剂2小时零分钟·浓度:3%·温度:25°C
阅读更多信息
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Abcam用户社区

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提交于 2016年7月7日

抗-HMGB1抗体的免疫细胞化学/免疫荧光研究进展[EPR3507]

很好
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应用程序
免疫细胞化学/免疫荧光
阻塞步骤
血清作为阻断剂30分钟·浓度:100%·温度:25°C
样品
人细胞(人前列腺癌细胞系(PC-3))
规范
人前列腺癌细胞株(PC-3)
渗透作用
是-在-20C下冷却丙酮1'
固定的
甲醇
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已验证客户

提交于 2014年12月31日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

很好
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应用程序
蛋白质印迹
装载量
25微克
凝胶运行条件
减少变性
样品
人细胞裂解物-全细胞(肝脏)
规范
肝脏
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度:5%·温度:23°C
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Liyong Zhang博士

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提交于 2014年12月15日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

很好
Abreviews公司
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应用程序
蛋白质印迹
装载量
25微克
凝胶运行条件
减少变性
样品
小鼠细胞裂解物-全细胞(肝细胞)
规范
肝细胞
治疗
20 ug/ml聚乙烯(I:C)
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度:5%·温度:23°C
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提交于 2014年12月1日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

杰出的
Abreviews公司
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应用程序
蛋白质印迹
样品
小鼠组织裂解物-整体(肝脏)
装载量
10微克
规范
肝脏
凝胶运行条件
减少非变性(本机)(4-20%)
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度:5%·温度:24°C
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Abcam用户社区

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提交于 2012年8月29日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

杰出的
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应用程序
蛋白质印迹
样品
人组织裂解物-整体(293 FT细胞)
装载量
50微克
规范
293 FT电池
凝胶运行条件
减少变性
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂12小时零分钟·浓度:5%·温度:4°C
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已验证客户

提交于 2010年9月1日

问题

我会点,如果我现在点,它的浓度(大约)是多少?

当做

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Abcam社区

已验证客户

2012年5月16日被问及

答案

谢谢你的回复。

这种抗体的浓度取决于很多因素,在0.152和0.17 mg/mL之间。

我还想评论一下看似低浓度的问题:

兔产生的IgG比小鼠IgG具有更大的亲和力和更高的敏感性(约100-1000倍),同时兔杂交瘤产生的Ig G总量通常低于小鼠杂交瘤。

许多“资深”抗体使用者通常熟悉小鼠抗体提供的IgG数量,并可以根据浓度判断他们可能得到或需要使用多少反应。不幸的是,这种经验不能应用于兔单克隆抗体,因为浓度标度通常差别很大。

由于兔单克隆抗体的特异性和敏感性更高,因此每次反应所需的IgG更少。

我想再次向您保证,虽然IgG的数量可能无法与小鼠单克隆抗体相比较,但客户每管都会收到相当数量的反应/测试/斑点/染色。

我希望这些信息有帮助。如有任何其他问题,请随时与我联系。

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Abcam科学支持

回复于 2012年5月16日

请注意:所有产品均“仅供研究使用。不用于诊断程序”
有关许可查询,请联系partnerships@abcam.com

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  • 肿瘤研究
  • 心血管研究
  • 细胞生物学
  • 发育生物学
  • 染色质及细胞核信号转导研究
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