特技

  • 附带条件

    抗HMGB1抗体[EPR3507]
    HMGB1基因
  • 特惠

    HMGB1中的EPR3507[EPR3507]
  • 特技

    兔子
  • 临时合同

    专利:ICC/IF世界银行流式细胞术IHC-P更多细节
    障碍:知识产权
  • 附带条件

    专利:小鼠,大鼠,人
  • 附带条件

    在人HMGB1 AA 150中合成肽到C-末端(C末端)。确切的序列是专有的。
    数据库链接:P09429

  • 生殖器官

    • WB:SK-BR-3、HeLa、HepG2、Jurkat和野生型HAP1全细胞裂解物;大鼠脑组织裂解物。②IHC-P:人肾和扁桃体组织。I/IC:DIU 145、HeLa、HAP1野生型和生264.7细胞。
  • 附带条件

    我们的拉伯®技术是一种专利的杂交瘤技术,用于制备兔单克隆抗体。有关我们专利的详情,请参阅拉巴卜®专利.

    我们一直在努力确保我们为客户提供一流的抗体。作为这项工作的结果,我们很高兴现在提供这种抗体的纯化格式。我们正在更新我们的数据表。提纯的格式在产品标签上标有“PUR”字样。如果您有任何关于这个更新的问题,请联系我们的科学支持小组。

    这个产品是重组兔单克隆抗体.

特技

  • 特技

    液体
  • 临时抵押

    发货于4°C店,在4°C短期(1-2周)。交货时等分。在20°C储存,在20℃下稳定12个月。
  • 附带条件

    pH值:7.20
    防腐剂:0.01%叠氮化钠
    成分:PBS,40%甘油,0.05%牛血清白蛋白
  • 集中信息加载…
  • 特技

    纯化蛋白A
  • 船尾

    特技
  • 证券交易

    EPR3507
  • 附带条件

    IgG
  • 附带条件

船首

我们的保证担保覆盖使用AB79823在以下测试应用中。

应用注意事项包括推荐的起始稀释液;最佳稀释/浓度应由最终用户确定。

船首 AB型 特技
ICC/IF 1/250。
世界银行 1/10000—1/50000。检测大约25 kDa的带(预测分子量:25 kDa)。
流式细胞术 1/30。

AB17230-兔单克隆IgG,适合用作该抗体的同种型对照。

IHC-P 1/350—1/400。在IHC染色方案开始之前用TrIS/EDTA缓冲液pH 9进行热介导的抗原修复。

抗原检索协议.

  • 附带条件
    不适合IP。
  • 特效药

    • 特技

      多功能氧化还原敏感蛋白在不同的细胞室中具有不同的作用。在细胞核中,主要的染色质相关非组蛋白是一种参与复制、转录、染色质重塑、V(D)J重组、DNA修复和基因组稳定性的DNA伴侣。提出了一种通用的核酸生物传感器。促进宿主对无菌和感染信号的炎症反应,参与先天免疫和适应性免疫应答的协调和整合。在细胞质中作为免疫原性核酸的传感器和/或伴侣,提示TLR9介导的免疫反应的激活,并介导自噬。作为危险相关的分子模式(潮湿)分子,在组织损伤过程中扩增免疫应答。释放到细胞外环境可以结合DNA、核小体、IL-1β、CXCL12、GER亚型2/SRAGE、脂多糖(LPS)和脂磷壁酸(LTA),并通过多个表面受体的参与激活细胞。在细胞外室中,完全减少的HMGB1(由坏死释放)充当趋化因子,二硫键HMGB1(主动分泌)作为细胞因子,磺酰HMGB1(从凋亡细胞释放)促进免疫耐受(PubMed:23519706,PubMed:23446148,PubMed:23994764,PubMed:25048472)。具有血管活动性(通过相似性)。可能参与血小板活化(通过相似性)。结合磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇酰胺(通过相似性)。结合RAGE介导神经生长的信号传导(通过相似性)。可能发挥作用,在膨胀的多聚谷氨酰胺(聚谷氨酸)蛋白的积累,如亨廷顿(HTT)或TBP(PubMed:23303669,PubMed:25549101)。
      核功能归因于完全减少的HGBM1。与染色质结合,并与非标准DNA结构如单链DNA、含有十字形或弯曲结构的DNA、超螺旋DNA和ZDNA的DNA结合。可以弯曲DNA并通过循环增强DNA灵活性,从而提供一种机制,通过增强转录因子结合和/或使远距离调控序列接近(PubMed:20123072)来促进各种基因启动子的活性。可能在核苷酸切除修复(NER)中具有增强作用(通过相似性)。然而,在NER使用体外系统的影响已被报道冲突(PubMed:19446504,PubMed:19360789)。可能参与错配修复(MMR)和碱基切除修复(BER)途径(PubMed:15014079,PubMed:16143102,PubMed:17803946)。可能涉及双链断裂修复,如非同源末端连接(NHEJ)(通过相似性)。通过作为RAG复合体的辅因子参与V(D)J重组:通过在保守的重组信号序列(RSS)的23 bp间隔处刺激裂解和RAG蛋白结合(通过相似度)。在体外可以取代组蛋白H1从高度弯曲的DNA(通过相似性)。可以重构规范的核小体,导致转录因子结合的结构约束松弛(通过相似度)。增强固醇调节元件结合蛋白(SREBPS),如SRBEF1与它们同源DNA序列的结合,并通过相似性增加它们的转录活性。促进TP53与DNA的结合(PubMed:23063560)。建议参与线粒体质量控制和自噬的转录依赖性方式暗示HSPB1;然而,这个功能一直受到质疑(通过相似性)。可以调节端粒酶复合物的活性,并可能参与端粒维持。
      在细胞质中,通过与BECN1的竞争性相互作用导致BeCN1: BCL2复合物离解,导致自噬激活(PubMed:20819940)。参与氧化应激介导的自噬(PubMed:21395369)。可以保护钙蛋白酶介导的BECN1和ATG5的裂解,从而提出控制其自噬和促凋亡功能,并调节炎症相关细胞损伤的程度和严重程度(通过相似性)。髓系细胞通过促进自噬(通过相似性)对内毒素血症和细菌感染具有保护作用。涉及巨噬细胞内CpG DNA的内体易位和TLR9活化。
      在细胞外室(以下是主动分泌或被动释放)参与炎症反应的调节。完全减少的HGBM1(随后在释放后被氧化)与CXCL12相关,介导了在组织损伤的初始阶段中炎症细胞的募集;CXCL12:HMGB1复合物触发CXCR4同质二聚(PubMed:22370717)。诱导单核细胞来源的未成熟树突状细胞的迁移,并似乎调节中性粒细胞的粘附和迁移功能暗示着AGER/RAGE和ITGAM(通过相似性)。可结合多种类型的DNA和RNA,包括微生物未甲基化的CpG DNA,以增强对核酸的先天免疫应答。建议在混杂DNA /RNA检测中起作用,其与特定模式识别受体(通过相似性)进行随后的鉴别感测。促进细胞外DNA诱导的AIM2炎性体激活暗示AGER/RAGE(PubMed:24971542)。二硫化物HMGB1与跨膜受体结合,如AGER/RAGE、TLR2、TLR4以及可能的TrR1,从而激活它们的信号转导途径。介导细胞因子/趋化因子的释放,如TNF、IL-1、IL-6、IL-8、CCl2、CCl3、CCl4和CXCl10(PubMed:12765338,PubMed:18354232,PubMed:19264983,PubMed:20547845,PubMed:24474694)。通过巨噬细胞刺激的自然杀伤(NK)细胞促进干扰素γ与其他细胞因子如IL-2或IL-12的协同作用(PubMed:15607795)。TLR4被认为是促进巨噬细胞活化的主要受体,通过TLR4似乎暗示Ly96/MD-2(PubMed:20547845)。在细菌LPS-或LTA介导的炎症反应结合内毒素,并将其转移到CD14,以分别向相应的TLR4:Ly96和TLR2复合物发出信号(PubMed:18354232,PubMed:21660935,PubMed:25660311)。有助于肿瘤增殖与宏碁/ RAGE(相似度)。可以结合IL1β和信号通过IL1R1:IL1RAP受体复合物(PubMed:18250463)。结合A类CpG激活浆细胞样树突状细胞中的细胞因子产生,提示TLR9、MyD88和AGER/RAGE可激活自身反应性B细胞。通过含有HMGB1的染色质免疫复合物,也可以通过B细胞受体(BCR)依赖性和宏碁/ RAGE独立机制(通过相似性)来促进B细胞对内源性TLR9配体的应答。抑制巨噬细胞吞噬凋亡细胞;该功能依赖于多聚腺苷二磷酸核糖基化,并参与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸(通过相似度)。适应性免疫可能涉及通过激活效应T细胞和调节调节性T(Treg)细胞的抑制来增强免疫力(PubMed:15944249,PubMed:22473704)。相反,不牵涉效应或调节性T细胞,需要肿瘤浸润和激活表达淋巴毒素LTA:LTB异三聚体的T细胞,从而促进肿瘤恶性进展(通过相似性)。还报道了限制T细胞增殖(通过相似性)。释放的HMGB1:细胞凋亡过程中形成的核小体复合物可通过TLR2信号诱导细胞因子产生(PubMed:19064698)。通过凋亡细胞诱导免疫耐受;凋亡细胞释放的促炎活性通过活性氧(ROS)依赖于Cys-106(PubMed:18631454)上的氧化而被中和。在活化的淋巴细胞来源的自凋亡DNA(ALD DNA)激活巨噬细胞期间,促进ALD DNA向内体的募集。
    • 情结

      无所不在的在血小板中表达(PubMed:11154118)。
    • 情态动词

      属于HMGB家族。
      包含2个HMG盒DNA结合结构域。
    • 圣餐仪式

      HMG盒2介导促炎性细胞因子刺激活性和结合TLR4(PubMed:12765338,PubMed:20547845)。然而,不参与介导的免疫原性活动的背景下,细胞凋亡诱导免疫耐受(PubMed:24474694)。
      酸性C-末端结构域形成柔性结构,该结构可可逆地与HMG盒分子内相互作用,并调节与DNA和其他蛋白质的结合(PubMed:23063560)。
    • 证券交易所

      在丝氨酸残基处磷酸化。两个NLS区域的磷酸化需要细胞质易位,随后分泌(PubMed:17114460)。
      用LPS刺激(PubMed:22801494)在多个位点上乙酰化。核定位信号(NLS 1和NLS 2)赖氨酸残基上的乙酰化导致细胞质定位和随后的分泌(通过相似性)。LYS-3上的乙酰化导致与DNA末端的优先结合并损害DNA弯曲活性。
      半胱氨酸残基Cys23、Cys45和Cys-106的还原/氧化以及可能涉及Cys23和Cys45的分子内二硫键在不同的细胞室中产生不同的氧化还原形式,具有特定的功能活性:1 -完全还原的HMGB1(HMGB1C23 HC45 HC106H)、2二硫化物HMGB1(HMGB1C23-C45 C106H)和3磺酰基HMGB1(HMGB1C23 SOC45 SOC106SO)。
      多聚腺苷二磷酸腺苷经PARP1核糖体化后,用LPS刺激后分泌。
      用CASP1体外裂解可释放HMG盒1-肽,其介导免疫原活性;肽拮抗细胞凋亡诱导免疫耐受(PubMed:24474694)。可由凝血酶水解:血栓调节蛋白复合物;减少与肝素和促炎活性的结合。
    • 附带条件

      细胞核。染色体。细胞质。分泌的细胞膜。内体Endoplasmic reticulum Golgi中间隔室。在基态中以核为主。在细胞质和细胞核之间穿梭(PubMed:12231511,PubMed:17114460)。自噬刺激(PubMed:20819940)从细胞核转移到细胞质。在细胞外环境中从巨噬细胞释放需要NLRC4或NLRP3炎性体的激活(通过相似性)。被动地从扩散细胞释放到细胞外环境,包括随后被氧化的完全还原的HgMb1(PubMed:19811284)。也从凋亡细胞释放(PubMed:16855214,PubMed:18631454)。从各种免疫和非免疫细胞如巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞的活性分泌,响应于各种刺激,如LPS和细胞因子,涉及分泌分泌溶酶体的非常规分泌过程(PubMed:12231511,PubMed:14532127,PubMed:15944249)。由LPS(通过相似度)响应于浆细胞分泌。在活化血小板表面发现(PubMed:11154118)。
    • UniProt信息
    • 附带条件

    • 特赦

      • 两性霉素抗体
      • 染色体蛋白、非组蛋白、HMG1抗体
      • DKFZP66A04266抗体
      • 高迁移率族1抗体
      • 高迁移率族蛋白1抗体
      • 高迁移率族蛋白1抗体
      • 高迁移率族蛋白B1抗体
      • 高迁移率族(非组蛋白染色体)蛋白1抗体
      • HMG-1抗体
      • HMG1抗体
      • HMG3抗体
      • HMGB- 1抗体
      • HMGB1抗体
      • HMGB1-人抗体
      • 非组蛋白染色体蛋白HMG1抗体
      • SBP 1抗体
      • 磺葡糖基糖结合蛋白抗体
      查看全部

    船首

    • 第1巷:野生型HAP1全细胞裂解液(20μg)
      第2巷:HMGB1基因敲除HAP1全细胞裂解液(20μg)
      第3巷:Jurkat全细胞裂解液(20μg)
      第4巷:Hela全细胞裂解液(20μg)

      1 - 4车道:合并信号(红色和绿色)。绿色-AB79823在30 kDa处观察到。红色负载控制,AB984,观察到37 kDa。

      AB79823在野生型HAP1细胞中与HMGB1特异性反应,信号消失在HMGB1敲除细胞中。野生型和HMGB1敲除样品进行SDS-PAGE。AB79823和AB984(小鼠抗GAPDH负荷控制)分别于1/10000℃和1/20000℃下分别在4℃下孵育。山羊抗兔IgG H&L印迹(Ir染酶)®800厘米)预吸收AB21673山羊抗小鼠IgG H&L(Ir染病)®第六百八十)预吸收AB21677二次抗体在室温下稀释1/20000小时,成像前1小时。

    • AB79823在野生型HAP1细胞(顶板)和HMGB1敲除HAP1细胞(下盘)中染色HMGB1。用4%甲醛固定10分钟,经0.1% Triton X-100渗透5分钟,然后用1% BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1% PBS吐温1小时内封闭。然后用AB79823在1/250稀释液中孵育细胞。AB19589在1/250稀释液(以伪彩色红色显示)在4±4℃过夜,然后在室温下进一步孵育1小时。山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)预吸附(AB1500)第二抗体在2μg/ml(绿色显示)。用DAPI标记蓝色核DNA。

      采用共焦显微镜(徕卡MyStices,TCS SP8)拍摄图像。

    • 免疫组化(福尔马林/PFA固定石蜡切片)分析未经纯化的AB79823的扁桃体组织标记HMGB1(1/350)。使用TrIS/EDTA缓冲液pH 9进行热介导的抗原检索。用预稀释的HRP聚合物缀合的抗兔IgG作为第二抗体。苏木精复染。

    • 小鼠原始264.7巨噬细胞的免疫荧光分析,未经处理(上板)或用LPS(底面板)处理。用未纯化的AB79823染色HMGB1。
      将细胞固定在多聚甲醛中,在BSA中阻断1h,然后在10% Triton X-100中通透30分钟。样品在4°C孵育一次抗体,Aexa For。®488抗兔IgG作为第二抗体。

    • 未纯化的AB79823染色的DC/145(人前列腺癌细胞)细胞的ICC/IF图像。将细胞固定于4%甲醛(10分钟),然后在1% BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育1pB-TWEN 1h,使细胞通透,阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后用抗体AB79823在1/1000±4℃过夜孵育细胞,第二抗体(Green)为DyLight。®488山羊抗兔AB96899IgG(H+L)在1/1000稀释液中使用1h。Alexa Fluor®用594 WGA标记细胞膜(红色),稀释1/200小时,用DAPI染色1.43μm的细胞核(蓝色)。

    • 用未纯化的AB79823标记HeMa细胞(HeLa)的HeLa细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析(1/350)。用4%多聚甲醛固定细胞。阿列克萨氟®555的山羊抗兔IgG(1/200)作为第二抗体。用DAPI(蓝色)复染。

    • 所有车道:1/10000稀释(纯化)的抗HMGB1抗体[EPR3507](AB79823)

      第1巷:人乳腺癌细胞系SK-BR-3细胞裂解物
      第2巷:人宫颈上皮癌细胞系Hela细胞裂解物

      裂解物/蛋白质,每车道10盎司。

      次要的
      所有车道:Peroxidase结合羊抗兔IgG(H+L)1/1000稀释

      预测波段大小:25 kDa
      观察波段大小:25 kDa



      阻隔/稀释缓冲液和浓度:5% NFDM/TBST。

    • 抗HMGB1抗体[EPR3507](AB79823)在1/10000稀释(纯化)+大鼠脑组织裂解物中10μg

      次要的
      Peroxidase结合羊抗兔IgG(H+L)1/1000稀释

      预测波段大小:25 kDa
      观察波段大小:25 kDa



      阻隔/稀释缓冲液和浓度:5% NFDM/TBST。

    • 所有车道:1/50000稀释(未纯化)的抗HMGB1抗体[EPR3507](AB79823)

      第1巷:SK-BR-3细胞裂解液
      第2巷:HeLa细胞裂解液
      第3巷:HepG2细胞裂解物

      裂解物/蛋白质,每车道10盎司。

      次要的
      所有车道:1/2000稀释率山羊抗兔HRP偶联物

      预测波段大小:25 kDa
      观察波段大小:25 kDa

    • 未纯化的AB79823在1/250稀释下标记人肾组织HMGB1的免疫组化(福尔马林/PF-固定石蜡切片)分析

    • 重叠直方图显示HeLa(人宫颈上皮癌细胞系腺癌)细胞用未纯化的AB79823(红线)染色。用甲醇(5分钟)固定细胞,然后用0.1%个PBS TWEN通透20分钟。然后将细胞在1X PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育,以阻断非特异性蛋白-蛋白相互作用,随后抗体(AB79823,1/20稀释)在22℃下30分钟,第二抗体使用DyLoT。®488羊抗兔IgG(H+L)AB96899在1/500℃稀释30 min,22℃时,同种型对照抗体(黑线)为兔单克隆IgG(0.5μg/1x10)。细胞)在相同条件下使用。术后随访5000例。该抗体在HeLa细胞中与0.1%个PBS TWEN 20在相同条件下使用4%的多聚甲醛/渗透的固定的信号降低。

    特技

    该产品已被引用:

    • 李杰等。 miR627/HMGB1/NF-?B调节环调节TGF-β1诱导的肺纤维化。 J细胞生物化学 一百二十:29 83-29 963(2019)。阅读更多(PubMed:30536600)
    • 陈Z等。 与纳米金刚石结合的阿霉素和游离形式使胶质母细胞瘤细胞发生异型命运。 Nanomedicine(朗德) 十四:33~351(2019)。阅读更多(PubMed:30676239)
    参见本产品的所有85个出版物

    一级标准

    -属于8评论或问答

    应用
    蛋白质印迹法
    样品
    人细胞裂解液-全细胞(成纤维细胞)
    凝胶运行条件
    非还原非变性(天然)(凝胶12%)
    装载量
    30μg
    治疗
    100M丙酮酸乙酯
    规格
    成纤维细胞
    阻塞步骤
    BSA作为2小时(S)和0分钟(S)·浓度的阻滞剂:3%℃:温度25℃

    用户社区

    核实客户

    07月2016日

    应用
    免疫细胞化学/免疫荧光
    阻塞步骤
    血清阻断剂为30分钟(S)·浓度:100%℃:25℃
    样品
    人细胞(人前列腺癌细胞系(PC-3))
    规格
    人前列腺癌细胞系(PC-3)
    透化作用
    是-冷却丙酮为1℃-20℃
    固定剂
    甲醇

    用户社区

    核实客户

    12月31日2014

    应用
    蛋白质印迹法
    装载量
    25μg
    凝胶运行条件
    变性变性
    样品
    人细胞裂解液-全细胞(肝)
    规格
    肝脏
    阻塞步骤
    牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度23℃

    李永张博士

    核实客户

    12月15日2014

    应用
    蛋白质印迹法
    装载量
    25μg
    凝胶运行条件
    变性变性
    样品
    小鼠细胞裂解液-全细胞(肝细胞)
    规格
    肝细胞
    治疗
    20μg/ml聚(I:C)
    阻塞步骤
    牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度23℃

    用户社区

    核实客户

    DEC 01 DEC 2014

    应用
    蛋白质印迹法
    样品
    小鼠组织裂解物-全肝
    装载量
    10μg
    规格
    肝脏
    凝胶运行条件
    还原Non Denaturing(天然)(4-20%)
    阻塞步骤
    牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度24℃

    用户社区

    核实客户

    8月29日2012

    答案

    谢谢你的回复。

    我很高兴地确认,我们目前的批次的浓度在0.10和0.15毫克/毫升之间。

    我也想就低浓度的问题发表评论:

    兔子产生的IgG比小鼠IgG(约100-1000倍)具有更大的亲和力和更大的敏感性,同时兔杂交瘤产生的IgG的总量一般低于小鼠杂交瘤。

    许多“老兵”抗体使用者一般都熟悉从小鼠抗体中提供的IgG量,并且可以判断他们可以根据浓度获得或需要使用多少反应。不幸的是,这种经验是不可转让的兔单克隆抗体,因为浓度尺度通常是非常不同的。

    由于兔单克隆抗体的特异性和敏感性要高得多,所以每反应需要较少的IgG。

    我想向您保证,虽然IgG的量可能与小鼠单克隆抗体不可比,但客户正在接受相当数量的反应/试验/印迹/每管染色。

    我希望这些信息是有用的。请不要犹豫,联系我在这个问题上的任何其他问题。

    阅读更多

    答案

    谢谢你的询价。

    AB79823的浓度有很大的依赖性。请告诉我你收到了多少。

    我期待着您的答复。

    阅读更多
    应用
    蛋白质印迹法
    样品
    人体组织裂解物(293英尺细胞)
    装载量
    50μg
    规格
    293英尺电池
    凝胶运行条件
    变性变性
    阻塞步骤
    牛奶为12小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度4℃

    用户社区

    核实客户

    SEP第01 SEP第2010期

    请注意:所有产品仅用于研究用途。不用于诊断程序
    有关许可证查询,请联系PosisSts@ ABCAMC.

    特惠