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使用敲除细胞株进行验证重组拉布MAb

重组抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

评论(7)问答（1）参考文献（195）
Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 流式细胞术（细胞内）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
  • 抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

主要功能和细节

  • 重组生产（无动物），实现高批次一致性和长期供应安全
  • 兔单克隆[EPR3507]到HMGB1
  • 适用于：流式细胞周期（内部）、ICC/IF、WB、IHC-P
  • 敲除已验证
  • 反应对象：小鼠、大鼠、人类

共轭标志相关共轭物和制剂

Alexa Fluor®405 Alexa Fluor®488型 Alexa Fluor®555 Alexa Fluor®594公司 Alexa Fluor®647型 空气污染指数 无运营商 人力资源计划 体育课

概述

  • 产品名称

    抗-HMGB1抗体[EPR3507]
    参阅全部 HMGB1标准一抗

  • 描述

    兔单克隆抗体[EPR3507]至HMGB1

  • 宿主

    兔子

  • 经测试应用

    适用于:流动周期（内部）,国际商会/国际单项体育联合会,工作分解结构,IHC-P公司更多详细信息
    不适用于:IP（IP）

  • 种属反应性

    与反应:老鼠、老鼠、人

  • 免疫原

    合成肽。此信息为Abcam和/或其供应商专有。

  • 阳性对照

    • WB:SK-BR-3、HeLa、HepG2、Jurkat和野生型HAP1全细胞裂解物；大鼠脑组织裂解物。IHC-P：人体肾脏和扁桃体组织。ICC/IF:DU 145、HeLa、HAP1野生型和RAW 264.7细胞。流式细胞仪（内部）：HeLa细胞。

  • 常规说明

    该产品是一种重组单克隆抗体，具有以下优点：

    • -高批次一致性和再现性
    • -提高敏感性和特异性
    • -长期供应安全
    • -无动物制作
    有关更多信息请看这里.

    我们的RabMAb®该技术是一种基于杂交瘤的专利技术，用于制备兔单克隆抗体。有关我们专利的详细信息，请参阅拉布MAb®专利.

    我们一直在努力确保为客户提供一流的抗体。由于这项工作，我们很高兴现在能够以纯化的形式提供这种抗体。我们正在更新数据表。纯化格式在我们的产品标签上指定为“PUR”。如果您对此更新有任何疑问，请联系我们的科学支持团队。

性能

应用

Abpromise担保

阿布诺瓦™承诺保证使用约79823于以下的经测试应用

“应用说明”部分 下显示的仅为推荐的起始稀释度；实际最佳的稀释度/浓度应由使用者检定。

应用 抗体评论 说明
流动周期（内部）
1/30.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。
国际商会/国际单项体育联合会 (1)
1/250.
工作分解结构 (5)
1/10000 - 1/50000. 检测约25 kDa的带（预测分子量：25 kDa.）。
IHC-P公司 (1)
1/350 - 1/400. 在开始IHC染色方案之前，使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

请参见IHC抗原检索协议.
说明
流动周期（内部）
1/30.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。
国际商会/国际单项体育联合会
1/250.
工作分解结构
1/10000 - 1/50000. 检测约25 kDa的带（预测分子量：25 kDa.）。
IHC-P公司
1/350 - 1/400. 在开始IHC染色方案之前，使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

请参见IHC抗原检索协议.
应用说明
不适用于IP。

靶标

  • 功能

    多功能氧化还原敏感蛋白，在不同的细胞隔室中具有不同的作用。细胞核中是主要的染色质相关非组蛋白之一，作为DNA伴侣参与复制、转录、染色质重塑、V（D）J重组、DNA修复和基因组稳定性。建议成为一种通用的核酸生物传感器。促进宿主对无菌和感染信号的炎症反应，并参与先天性和适应性免疫反应的协调和整合。细胞质中作为免疫原核酸的传感器和/或伴侣，涉及TLR9介导的免疫反应的激活，并介导自噬。作为危险相关分子模式（DAMP）分子，在组织损伤期间增强免疫反应。释放到细胞外环境可以结合DNA、核小体、IL-1β、CXCL12、AGER亚型2/sRAGE、脂多糖（LPS）和脂磷壁酸（LTA），并通过多种表面受体的参与激活细胞。在细胞外室中，完全减少的HMGB1（由坏死释放）作为趋化因子，二硫键HMGB1作为细胞因子（积极分泌），磺酰HMGB1则（由凋亡细胞释放）促进免疫耐受（PubMed:23519706，PubMed:33446148，PubMet:23994764，PubMer:25048472）。具有促血管生成活性（根据相似性）。可能参与血小板活化（根据相似性）。与磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇酰胺结合（通过相似性）。与RAGE结合介导神经元生长信号（通过相似性）。可能在扩大聚谷氨酰胺（polyQ）蛋白质的积累中发挥作用，例如亨廷顿蛋白（HTT）或TBP（PubMed:23303669，PubMed:25549101）。
    核功能归因于HGMB1的完全降低。与染色质结合并结合DNA，优先选择非标准DNA结构，如单链DNA、含DNA的十字形或弯曲结构、超螺旋DNA和ZDNA。可以弯曲DNA并通过环化增强DNA的灵活性，从而通过增强转录因子结合和/或使远程调控序列接近，提供一种机制来促进各种基因启动子的活性（PubMed:20123072）。可能在核苷酸切除修复（NER）中起增强作用（通过相似性）。然而，使用体外系统在NER中的效果却有矛盾的报道（PubMed:19446504，PubMed:19360789）。可能参与错配修复（MMR）和基底切除修复（BER）通路（PubMed:15014079，PubMed:16143102，PubMet:17803946）。可能参与双绞线断裂修复，如非同源端接（NHEJ）（通过相似性）。作为RAG复合体的辅因子参与V（D）J重组：通过刺激保守重组信号序列（RSS）23 bp间隔区的裂解和RAG蛋白结合发挥作用（通过相似性）。体外可以从高度弯曲的DNA中置换组蛋白H1（根据相似性）。可以重组标准核小体，导致转录因子结合的结构约束放松（通过相似性）。增强固醇调节元件结合蛋白（SREBPs）（如SREBF1）与其同源DNA序列的结合，并增加其转录活性（通过相似性）。促进TP53与DNA的结合（PubMed:23063560）。建议以与HSPB1相关的转录依赖方式参与线粒体质量控制和自噬；然而，这一功能受到了质疑（通过相似性）。可以调节端粒酶复合体的活性，并可能参与端粒的维持。
    在细胞质中，建议通过与BECN1的竞争性相互作用分离BECN1:BCL2复合物，导致自噬激活（PubMed:20819940）。参与氧化应激介导的自噬（PubMed:21395369）。可以保护BECN1和ATG5免受钙蛋白酶介导的分裂，从而控制其促自噬和促凋亡功能，并调节炎症相关细胞损伤的程度和严重程度（通过相似性）。在髓系细胞中，通过促进自噬对内毒素血症和细菌感染具有保护作用（通过相似性）。参与巨噬细胞对CpG-DNA的反应中TLR9的内体移位和激活。
    细胞外室（主动分泌或被动释放后）参与炎症反应的调节。完全降低的HGMB1（释放后会被氧化）与CXCL12相关，在组织损伤的初始阶段介导炎症细胞的募集；CXCL12:HMGB1复合物触发CXCR4同二聚化（PubMed:22370717）。诱导单核细胞衍生的未成熟树突状细胞的迁移，并似乎调节与AGER/RAGE和ITGAM相关的中性粒细胞的粘附和迁移功能（通过相似性）。可结合各种类型的DNA和RNA，包括微生物非甲基化CpG-DNA，以增强对核酸的先天免疫反应。建议在混杂的DNA/RNA传感中发挥作用，该传感与特定模式识别受体随后的区分传感相配合（通过相似性）。促进与AGER/RAGE相关的细胞外DNA诱导的AIM2炎症小体激活（PubMed:24971542）。二硫HMGB1与跨膜受体结合，如AGER/RAGE、TLR2、TLR4和可能的TREM1，从而激活其信号转导途径。调节细胞因子/趋化因子的释放，如TNF、IL-1、IL-6、IL-8、CCL2、CCL3、CCL4和CXCL10（PubMed:12765338，PubMed:18354232，PubMet:19264983，PubMed:20547845，PubMed:24474694）。促进巨噬细胞刺激的自然杀伤（NK）细胞与其他细胞因子如IL-2或IL-12协同分泌干扰素-γ（PubMed:15607795）。TLR4被认为是促进巨噬细胞活化的主要受体，通过TLR4进行信号传递似乎与LY96/MD-2有关（PubMed:20547845）。在细菌LPS或LTA介导的炎症反应中，炎症反应与内毒素结合，并将其转移到CD14，以向相应的TLR4:LY96和TLR2复合物发出信号（PubMed:18354232，PubMed:21660935，PubMet:25660311）。通过与ACER/RAGE的关联促进肿瘤增殖（通过相似性）。可通过IL1R1:IL1RAP受体复合物结合IL1-beta和信号（PubMed:18250463）。与A类CpG结合可激活与TLR9、MYD88和AGER/RAGE相关的浆细胞样树突状细胞中的细胞因子生成，并可激活自身反应性B细胞。通过含HMGB1的染色质免疫复合物，还可以通过B细胞受体（BCR）依赖性和ACER/RAGE依赖性机制（通过相似性）促进B细胞对内源性TLR9配体的反应。抑制巨噬细胞吞噬凋亡细胞；该功能依赖于多聚腺苷二磷酸核糖化，并与凋亡细胞细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合（根据相似性）。适应性免疫可能通过激活效应T细胞和抑制调节性T（TReg）细胞来增强免疫（PubMed:15944249，PubMed:22473704）。相反，在不涉及效应或调节性T细胞的情况下，表达淋巴毒素LTA:LTB异源三聚体的T细胞需要肿瘤浸润和激活，从而促进肿瘤恶性进展（通过相似性）。也有报道限制T细胞增殖（根据相似性）。释放HMGB1：凋亡过程中形成的核小体复合体可以通过TLR2发出信号，诱导细胞因子产生（PubMed:19064698）。参与凋亡细胞诱导免疫耐受；当凋亡细胞释放其促炎活性时，活性氧物种（ROS）依赖的氧化作用（特别是Cys-106）可中和其促炎作用（PubMed:18631454）。在巨噬细胞活化过程中，活化的淋巴细胞衍生的自凋亡DNA（ALD-DNA）促进ALD-DNA向内体的募集。

  • 组织特异性

    无处不在。以血小板表达（PubMed:11154118）。

  • 序列相似性

    属于HMGB家族。
    包含2个HMG盒DNA绑定域。

  • 结构域

    HMG盒2介导促炎细胞因子刺激活性并与TLR4结合（PubMed:12765338，PubMed:20547845）。然而，在凋亡诱导免疫耐受的背景下，不参与介导免疫原活性（PubMed:24474694）。
    酸性C末端结构域形成一个柔性结构，可以与HMG盒在分子内可逆地相互作用，并调节与DNA和其他蛋白质的结合（PubMed:23063560）。

  • 翻译后修饰

    丝氨酸残基磷酸化。NLS两个区域的磷酸化是细胞质易位和分泌所必需的（PubMed:17114460）。
    LPS刺激后在多个部位乙酰化（PubMed:22801494）。核定位信号（NLS1和NLS2）中赖氨酸残基的乙酰化导致细胞质定位和随后的分泌（通过相似性）。Lys-3上的乙酰化导致优先结合DNA末端并削弱DNA弯曲活性。
    半胱氨酸残基Cys-23、Cys-45和Cys-106的还原/氧化，以及可能的分子内二硫键（涉及Cys-23和Cys-44），在不同的细胞隔室中产生具有特定功能活性的不同氧化还原形式：1-完全还原HMGB1（HMGB1C23hC45hC106h），2-二硫化物HMGB1（HMGB1C23-C45C106h）和3-磺酰基HMGB1。
    LPS刺激后分泌的PARP1可使多聚ADP-核糖化。
    CASP1的体外裂解释放出一种含有HMG盒1的肽，该肽可能介导免疫原性活性；该肽拮抗凋亡诱导的免疫耐受（PubMed:24474694）。可被凝血酶水解：血栓调节蛋白复合物；减少与肝素的结合和促炎活性。

  • 细胞定位

    核心。染色体。细胞质。保密。细胞膜。内体。内质网-高尔基体中间隔室。基态主要为核。在细胞质和细胞核之间穿梭（PubMed:12231511，PubMed:17114460）。在自噬刺激下从细胞核转移到细胞质（PubMed:20819940）。巨噬细胞在细胞外环境中的释放需要激活NLRC4或NLRP3炎性体（根据相似性）。通过扩散将坏死细胞被动释放至细胞外环境，包括完全还原的HGMB1，随后被氧化（PubMed:19811284）。也由凋亡细胞释放（PubMed:16855214，PubMed:18631454）。各种免疫细胞和非免疫细胞（如巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞）对各种刺激（如脂多糖和细胞因子）的主动分泌涉及通过分泌溶酶体的非常规分泌过程（PubMed:12231511，PubMed:14532127，PubMet:15944249）。血浆细胞对LPS的反应而分泌（通过相似性）。发现于活化血小板表面（PubMed:11154118）。
  • UniProt提供的信息

  • 数据库链接

    查看所有内容

  • 别名

    • 两性激素抗体
    • 染色体蛋白、非组蛋白、HMG1抗体
    • DKFZp686A04236抗体
    • 高迁移率组1抗体
    • 高迁移率族盒1抗体
    • 高迁移率族蛋白1抗体
    • 高迁移率族蛋白B1抗体
    • 高迁移率组（非组蛋白染色体）蛋白1抗体
    • HMG-1抗体
    • HMG1抗体
    • HMG3抗体
    • HMGB 1抗体
    • HMGB1抗体
    • HMGB1_HUMAN抗体
    • 非组织染色体蛋白HMG1抗体
    • SBP 1抗体
    • 磺基葡萄糖醛酸糖结合蛋白抗体
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图片

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    所有车道：抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823），稀释度为1/10000

    车道1：野生型HeLa细胞裂解物
    车道2：HMGB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解物

    每车道20µg的裂解液/蛋白质。

    在还原条件下进行。

    预测的带宽大小：25千Da
    观察到的频带大小：30千Da为什么实际的频带大小与预测的不同？



    1-2车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-在30 kDa下观察到ab79823。红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制(约8245)在37 kDa时观察到。

    western blot显示ab79823与野生型HeLa细胞中的HMGB1反应。当CRISPR/Cas9编辑细胞系时，观察到预期大小的信号丢失约255395（CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物约263782)已使用。在25kDa以下的通道2中观察到的带可能代表截断形式和劈开碎片。对野生型HeLa和HMGB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解液进行SDS-PAGE分析。在室温下，将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。ab79823和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制(约8245)在4°C下过夜，分别以1/10000和1/20000稀释。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye®800CW）预吸附床(ab216773号)和山羊抗鼠IgG H&L（IRDye®680RD）预吸附床(约216776)二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    ab79823染色野生型HAP1细胞中的HMGB1（顶面板）和HMGB1敲除HAP1的细胞（底面板）。细胞用4%甲醛固定10分钟，用0.1%Triton X-100渗透5分钟，然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。然后用ab79823以1/250的稀释度培养细胞，并约195889年以1/250稀释度（以伪红色显示）在+4°C下过夜，然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488）预吸附剂进一步孵育1小时(约150081)2μg/ml的二级抗体（以绿色显示）。核DNA用DAPI标记为蓝色。

    使用共焦显微镜（Leica-Microsystems，TCS SP8）拍摄图像。

  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    人类扁桃体组织用未纯化ab79823标记HMGB1（1/350）的免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析。使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。使用预先稀释的HRP聚合物结合的抗兔IgG作为二级抗体。苏木精复染。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    所有车道：抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823），稀释度为1/10000

    车道1：野生型HAP1全细胞裂解物
    车道2：HMGB1敲除HAP1全细胞裂解物
    3号车道：Jurkat全细胞裂解物
    车道4：HeLa全细胞裂解物

    每车道20µg的裂解液/蛋白质。

    预测的带宽大小：25千Da



    1-4车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-在30 kDa下观察到ab79823。红色-装载控制，约9484，在37 kDa下观察到。


    ab79823在野生型HAP1细胞中与HMGB1特异性反应，因为HMGB1敲除细胞中信号丢失。对野生型和HMGB1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。ab79823和约9484（小鼠抗GAPDH负荷对照）分别在4°C下以1/10000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye®800CW）预吸收床ab216773号和山羊抗鼠IgG H&L（IRDye®680RD）预吸收床约216776二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）图片来自维琴蒂诺AR等人，《公共科学图书馆·综合》。2012;7（6）：e39104.电子出版2012年6月18日。图4。；doi:10.1371/journal.pone.0039104；2012年6月18日，《公共科学图书馆·综合》7（6）：e39104。

    未经处理（上面板）或经LPS处理（下面板）的小鼠RAW 264.7巨噬细胞的免疫荧光分析。HMGB1用未纯化的ab79823染色。
    细胞固定在多聚甲醛中，在BSA中封闭1小时，然后在10%Triton X-100中渗透30分钟。样品在4°C下与一级抗体孵育过夜。Alexa Fluor公司®用488-结合的抗兔IgG作为二级抗体。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    未纯化ab79823染色的DU 145（人前列腺癌细胞系）细胞的ICC/IF图像。细胞经4%甲醛固定（10分钟），然后在1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时，以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后将细胞与抗体ab79823以1/1000的稀释度在+4°C下孵育过夜。二级抗体（绿色）为DyLight®488山羊抗兔(约96899)以1/1000稀释度使用IgG（H+L）1小时。Alexa Fluor公司®594 WGA用于标记1/200稀释1h的质膜（红色）。采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核（蓝色）进行染色。

  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    HeLa细胞的免疫细胞电泳/免疫荧光分析，用未纯化的ab79823标记HMGB1（红色）（1/350）。细胞用4%多聚甲醛固定。Alexa Fluor公司®用555结合的山羊抗兔IgG（1/200）作为二级抗体。DAPI（蓝色）复染。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    所有车道：抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823），1/10000稀释（纯化）

    车道1：SK-BR-3（人乳腺癌细胞系）细胞裂解物
    车道2：HeLa（宫颈腺癌人上皮细胞系）细胞裂解物

    每车道10µg的裂解液/蛋白质。

    次要
    所有车道：1/1000稀释度的过氧化物酶结合山羊抗兔IgG（H+L）

    预测的带宽大小：25千Da
    观察到的频带大小：25千Da



    阻塞/稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    1/10000稀释（纯化）的抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）+10µg的大鼠脑组织裂解物

    次要
    1/1000稀释度的过氧化物酶结合山羊抗兔IgG（H+L）

    预测的带宽大小：25千Da
    观察到的频带大小：25千Da



    阻塞/稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

  • Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    Western blot-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    所有车道：1/50000稀释（未净化）的抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    车道1：SK-BR-3细胞裂解物
    车道2：HeLa细胞裂解物
    3号车道：HepG2细胞裂解物

    每车道10µg的裂解液/蛋白质。

    次要
    所有车道：羊抗兔HRP结合物1/2000稀释

    预测的带宽大小：25千Da
    观察到的频带大小：25千Da

  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    用未纯化ab79823在1/250稀释度下标记HMGB1的人肾组织的免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析。

    在开始IHC染色方案之前，使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

  • 流式细胞术（细胞内）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    流式细胞术（细胞内）-抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

    重叠直方图显示HeLa（宫颈腺癌人上皮细胞系）细胞用未纯化的ab79823（红线）染色。用甲醇固定细胞（5分钟），然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞，以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab79823，1/20稀释）培养30分钟。使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG（H+L）(约96899)在22°C下，1/500稀释30分钟。同型对照抗体（黑线）为兔单克隆IgG（0.5µg/1x106电池）在相同条件下使用。采集了超过5000个事件。在相同条件下使用4%多聚甲醛/0.1%PBS-Tween 20渗透固定的HeLa细胞中，该抗体发出的信号减弱

     

     

  • 抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）
    抗-HMGB1抗体[EPR3507]（ab79823）

文献(195)

发表研究结果有使用约79823？请让我们知道，以便我们可以引用本数据表中的参考文章。

约79823被引用在 195文献中.

  • 肖Y等。 膝关节骨性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡与HMGB1分泌的关系。 分子医学代表23：不适用（2021年）。公共医学：33300062
  • 赵H等。 异丙酚通过PPAR抑制炎症和凋亡改善内毒素诱导的心肌细胞损伤/HMGB1/NLRP3轴。 分子医学代表23：不适用（2021年）。公共医学：33398367
  • 卡奈R等。 干扰素-？增强间充质干细胞对实验性肾纤维化的治疗作用。 科学代表11:850 (2021).公共医学：33441701
  • Dong H和Song JmiR-142-3p通过负调控HMGB1的细胞质定位降低人宫颈癌细胞的生存能力。 实验治疗学21:212 (2021).公共医学：33500702
  • 李·JJ等。 HMGB1通过TRIM30a调节癌细胞，调控STING介导的衰老。 细胞死亡发现7:28 (2021).公共医学：33558529
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免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）检测抗-HMGB1抗体[EPR3507]

 杰出的
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应用程序
免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）
样品
人体组织切片（扁桃体）
抗原检索步骤
热介导-使用的缓冲液/酶：徕卡ER2
渗透作用
不
规范
扁桃体
固定的
甲醛
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提交于 2021年5月13日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

 杰出的
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应用程序
蛋白质印迹
样品
人细胞裂解物-全细胞（成纤维细胞）
凝胶运行条件
非还原非变性（天然）（凝胶12%）
装载量
30微克
治疗
100uM丙酮酸乙酯
规范
成纤维细胞
阻塞步骤
BSA作为封闭剂2小时零分钟·浓度：3%·温度：25°C
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提交于 2016年7月7日

抗-HMGB1抗体的免疫细胞化学/免疫荧光研究进展[EPR3507]

 很好
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应用程序
免疫细胞化学/免疫荧光
阻塞步骤
血清作为阻断剂30分钟·浓度：100%·温度：25°C
样品
人细胞（人前列腺癌细胞系（PC-3））
规范
人前列腺癌细胞株（PC-3）
渗透作用
是-在-20C下冷却丙酮1'
固定的
甲醇
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提交于 2014年12月31日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

 很好
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应用程序
蛋白质印迹
装载量
25微克
凝胶运行条件
减少变性
样品
人细胞裂解物-全细胞（肝脏）
规范
肝脏
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：23°C
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Liyong Zhang博士

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提交于 2014年12月15日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

 很好
Abreviews公司
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应用程序
蛋白质印迹
装载量
25微克
凝胶运行条件
减少变性
样品
小鼠细胞裂解物-全细胞（肝细胞）
规范
肝细胞
治疗
20 ug/ml聚乙烯（I:C）
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：23°C
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提交于 2014年12月1日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

 杰出的
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应用程序
蛋白质印迹
样品
小鼠组织裂解物-整体（肝脏）
装载量
10微克
规范
肝脏
凝胶运行条件
减少非变性（本机）（4-20%）
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：24°C
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提交于 2012年8月29日

抗-HMGB1抗体[EPR3507]的Western blot检测

 杰出的
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应用程序
蛋白质印迹
样品
人组织裂解物-整体（293 FT细胞）
装载量
50微克
规范
293 FT电池
凝胶运行条件
减少变性
阻塞步骤
牛奶作为封闭剂12小时零分钟·浓度：5%·温度：4°C
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提交于 2010年9月1日

问题

我会点，如果我现在点，它的浓度（大约）是多少？

当做

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答案

谢谢你的回复。

这种抗体的浓度取决于很多因素，在0.152和0.17 mg/mL之间。

我还想评论一下看似低浓度的问题：

兔产生的IgG比小鼠IgG具有更大的亲和力和更高的敏感性（约100-1000倍），同时兔杂交瘤产生的Ig G总量通常低于小鼠杂交瘤。

许多“资深”抗体使用者通常熟悉小鼠抗体提供的IgG数量，并可以根据浓度判断他们可能得到或需要使用多少反应。不幸的是，这种经验不能应用于兔单克隆抗体，因为浓度标度通常差别很大。

由于兔单克隆抗体的特异性和敏感性更高，因此每次反应所需的IgG更少。

我想再次向您保证，虽然IgG的数量可能无法与小鼠单克隆抗体相比较，但客户每管都会收到相当数量的反应/测试/斑点/染色。

我希望这些信息有帮助。如有任何其他问题，请随时与我联系。

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请注意：所有产品均“仅供研究使用。不用于诊断程序”
有关许可查询，请联系partnerships@abcam.com