重组Anti-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

1-4车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-40 kDa时观察到ab52922。红色-装载控制，ab7291（小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]在55kDa时观察到。

westernblot显示ab52922与A431野生型细胞中的HLA-A反应。当使用HLA-A基因敲除样本时，观察到信号丢失。用SDS-PAGE检测A431野生型和HLA-A基因敲除细胞裂解物。在TBS-T（0.1%吐温）的3%牛奶中，膜被封闭^®)与AB922孵育前ab7291（小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]在4℃下过夜，稀释度分别为1/10000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye）制备印迹^®800CW）预吸收(ab216773号)山羊抗鼠IgG H&L（IRDye^®680RD）预吸收(ab216776号)二级抗体在成像前在室温下稀释1小时。

人Burkitt淋巴瘤Raji细胞免疫细胞化学/免疫荧光分析纯化ab52922 1/100标记HLA A。细胞用4%多聚甲醛固定，0.1%曲通X-100渗透。ab150077一辆Alexa Fluor^®以488株羊抗兔IgG（1/1000）为二级抗体。DAPI（蓝色）被用作核子染色。ab7291，小鼠抗微管蛋白（1/1000）和ab150120型一辆Alexa Fluor^®594只山羊抗鼠IgG（1/1000）也被使用。

对照1：一级抗体（1/100）和二级抗体，ab150120型一辆Alexa Fluor^®594例山羊抗鼠IgG抗体（1/500）。

控制2：ab7291（1/1000）和次级抗体，ab150077一辆Alexa Fluor^®488例羊抗兔IgG（1/500）。

阻断缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。
稀释缓冲液及浓度：5%NFDM/TBST。

ab52922（纯化）在THP-1全细胞裂解液中免疫沉淀HLA-A。输入液中含有10微克细胞裂解液。对于western blotting，一种用于IP检测试剂的HRP偶联Veriblot(ab131366号)（1/10000）用于检测。兔单克隆IgG(ab172730)被用于阿布128913作为阴性对照（车道3）。

阻断缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

稀释缓冲液及浓度：5%NFDM/TBST。

流式细胞术分析Raji细胞用纯化的ab52922在1/40（红色）标记HLA A。细胞用2%多聚甲醛固定。以FITC结合的羊抗兔IgG（1/500）作为次级抗体。黑-同型对照，兔单克隆IgG。蓝色-未标记对照组，未与一级和二级抗体孵育的细胞。

未纯化ab52922染色MCF7细胞的ICC/IF图像。4%甲醛固定（10min），然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1h，使细胞通透性增强，阻断非特异性的蛋白-蛋白质相互作用。然后用抗体（ab52922，5µg/ml），在+4°C下过夜。次级抗体（绿色）为Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG（H+L），在1/1000稀释度下使用1h。Alexa Fluor®594 WGA在1/200稀释度下标记质膜（红色），并在1.43µM浓度下对细胞核（蓝色）进行染色。

阻断缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。
稀释缓冲液及浓度：5%NFDM/TBST。

ab52922免疫组化法（IHC-P-多聚甲醛固定石蜡包埋切片）对人扁桃体组织切片HLA-A的染色。组织用甲醛固定，3%H封闭₂O₂在25°C下保持10分钟；通过在pH值为6.0的柠檬酸盐缓冲液中进行热调解来回收抗原。将样品与一级抗体（1/3000）在25℃下孵育20分钟。使用未稀释的HRP结合山羊抗兔IgG多克隆作为次级抗体。

见Abreview

Ab52922 1/250稀释染色人扁桃体；石蜡包埋。

ab52922（纯化）在A549全细胞裂解液中免疫沉淀HLA-A。输入液中含有10微克细胞裂解液。对于western blotting，一种用于IP检测试剂的HRP偶联Veriblot(ab131366号)（1/10000）用于检测。兔单克隆IgG(ab172730)被用于阿布128913作为阴性对照（车道3）。

阻断缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

稀释缓冲液及浓度：5%NFDM/TBST。