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使用敲除细胞株进行验证重组拉布MAb

重组抗人类白细胞抗原A联合物[EP1395Y]（ab52922）

评论(15)问答（8）参考文献（96）
Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 流式细胞术（细胞内）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫沉淀-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 流式细胞术（细胞内）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 免疫沉淀-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
  • 抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

主要功能和细节

  • 重组生产（无动物），实现高批次一致性和长期供应安全
  • 兔抗HLA A单克隆抗体[EP1395Y]
  • 适用于：Flow Cyt（Intra）、WB、IP、IHC-P、ICC/IF
  • 敲除已验证
  • 反应对象：人类

共轭标志相关偶联物和制剂

Alexa Fluor®647型 无运营商 人力资源计划

概述

  • 产品名称

    抗-HLA A[EP1395Y]
    参阅全部 HLA A一抗

  • 描述

    兔单克隆抗体[EP1395Y]至HLA A

  • 宿主

    兔子

  • 经测试应用

    适用于:流动周期（内部）,工作分解结构,IP（IP）,IHC-P公司,国际商会/国际单项体育联合会更多详细信息

  • 种属反应性

    与反应:人类

  • 免疫原

    人类HLA A aa 50-150内的合成肽。确切的顺序是专有的。
    数据库链接：P04439号

  • 阳性对照

    • IHC-P：人类扁桃体组织。ICC/IF:MCF7和Raji细胞。WB:A431、Jurkat、THP-1、A549、HL-60和Raji细胞裂解物。IP:THP-1和A549细胞裂解物。流动细胞（内部）：Raji细胞。

  • 常规说明

    该产品是一种重组单克隆抗体，具有以下优点：

    • -高批次一致性和再现性
    • -提高敏感性和特异性
    • -长期供应安全
    • -无动物制作
    有关更多信息请看这里.

    我们的RabMAb®该技术是一种基于杂交瘤的专利技术，用于制备兔单克隆抗体。有关我们专利的详细信息，请参阅拉布MAb®专利.

性能

  • 形式

    液体

  • 存放说明

    在4°C下装运。短期储存在+4°C下（1-2周）。交付时，等分。储存于-20°C。避免冷冻/解冻循环。

  • 存储溶液

    pH值：7.20
    防腐剂：0.01%叠氮化钠
    成分：PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白
  • 浓度信息加载。。。

  • 纯度

    蛋白质A纯化

  • 克隆

    单克隆

  • 克隆编号

    EP1395Y型

  • 同种型

    免疫球蛋白G

  • 研究领域

应用

Abpromise担保

Abpromise™公司承诺保证使用ab52922号于以下的经测试应用

“应用说明”部分 下显示的仅为推荐的起始稀释度；实际最佳的稀释度/浓度应由使用者检定。

应用 阿布雷特 说明
流动周期（内部）
1/10 - 1/100.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。
工作分解结构 (4)
1/2000. 预测分子量：41 kDa。

用于1/10000-1/50000的未净化使用。
IP（IP）
1/20.

用于1/30的未净化使用。
IHC-P公司 (5)
1/100. 在开始IHC染色方案之前，使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

用于1/250-1/500的未净化使用。

请参见IHC抗原检索协议.
国际商会/国际单项体育联合会 (1)
1/100.

用于1/250-1/500的未净化使用。
说明
流动周期（内部）
1/10 - 1/100.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。
工作分解结构
1/2000. 预测分子量：41 kDa。

用于1/10000-1/50000的未净化使用。
IP（IP）
1/20.

用于1/30的未净化使用。
IHC-P公司
1/100. 在开始IHC染色方案之前，使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。

用于1/250-1/500的未净化使用。

请参见IHC抗原检索协议.
国际商会/国际单项体育联合会
1/100.

用于1/250-1/500的未净化使用。

靶标

  • 相关性

    HLA-A属于HLAⅠ类重链副logue。这种I类分子是由重链和轻链组成的异二聚体（β-2微球蛋白）。沉重的链条固定在薄膜中。I类分子通过提供来自内质网腔的肽在免疫系统中发挥中心作用。它们几乎在所有细胞中表达。重链约为45kDa，其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽，外显子2和外显子3编码alpha1和alpha2结构域，这两个结构域都与肽结合，第4外显子编码alpha3结构域，第5外显子解码跨膜区，第6和第7外显子则编码细胞质尾部。外显子2和外显子3内的多态性负责每个一类分子的肽结合特异性。骨髓和肾脏移植通常会对这些多态性进行分型。已有数百个HLA-A等位基因被描述。

  • 数据库链接

    • 别名

      • 抗原呈递分子抗体
      • HLAⅠ类组织相容性抗原，A1α链抗体
      • HLAA抗体
      • 白细胞抗原ⅠA类抗体
      • 主要组织相容性复合体，I类，A抗体
      • MHCⅠ类抗原HLA A重链抗体
      查看所有内容

    图片

    • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      所有车道：1/10000稀释的抗HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      车道1：野生型A549细胞裂解物
      车道2：HLA-A敲除A549细胞裂解物
      3号车道：野生型A431细胞裂解物
      车道4：HLA-A敲除A431细胞裂解物

      每车道20µg的裂解液/蛋白质。

      在还原条件下进行。

      预测的带宽大小：41千Da
      观察到的频带大小：41千Da



      抗-HLA-A抗体[EP1395Y]（ab52922）以1/10000稀释度染色，以绿色显示；小鼠抗α-管蛋白[DM1A](约7291)以1/20000稀释度进行负载控制染色，以红色显示。在Western blot中，ab52922被显示为与HLA-A特异性结合。在野生型A549细胞裂解液中的41 kDa处观察到一条带，在HLA-A敲除细胞系中未观察到该大小的信号。为了生成此图像，分析了野生型和HLA-A敲除A549细胞裂解物。首先，样品在SDS-PAGE凝胶上运行，然后转移到硝化纤维素膜上。TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞®20（TBS-T），然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。在TBS-T中清洗四次斑点，在室温下与二级抗体孵育1小时，再次清洗四次，然后成像。二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD，稀释度为1/20000。

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      人类扁桃体组织用纯化ab52922标记HLA A（1/100）的免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析。使用pH为9的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。ab97051型以羊抗兔IgG H&L（HRP）作为二级抗体（1/500）。阴性对照使用PBS代替一抗。苏木精沉彩。
    • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      所有车道：1/10000稀释的抗HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      车道1：野生型A-431（人表皮样癌细胞系）全细胞裂解物
      车道2：HLA A敲除物A-431（人表皮样癌细胞系）全细胞裂解物
      3号车道：A549（人肺癌细胞系）全细胞裂解物
      车道4：Jurkat（外周血T细胞白血病细胞系）全细胞裂解物

      每车道20µg的裂解液/蛋白质。

      在还原条件下进行。

      预测的带宽大小：41千Da
      观察到的频带大小：40千帕为什么实际频带大小与预测的不同？



      1-4车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-在40 kDa下观察到ab52922。红色-装载控制，约7291（在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。

      Western blot显示ab52922与A431野生型细胞中的HLA-A反应。使用HLA-A基因敲除样本时观察到信号丢失。对A431野生型和HLA-A敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE。TBS-T中3%牛奶中的膜被堵塞（0.1%吐温®)在与ab52922和约7291（小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜，分别以1/10000和1/20000稀释。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye®800CW）预吸收床(ab216773号)和山羊抗鼠IgG H&L（IRDye®680RD）预吸收床(约216776)二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。

    • 流式细胞术（细胞内）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      流式细胞术（细胞内）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      叠加直方图显示Raji细胞用ab52922染色（红线）。用4%多聚甲醛固定细胞（10分钟），然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞，以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab52922，1/100）培养30分钟。使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG（H+L）(约96899)在22°C下，1/500稀释30分钟。同型对照抗体（黑线）为兔IgG（单克隆）（1µg/1x106电池）在相同条件下使用。采集了超过5000个事件。在相同条件下使用80%甲醇（5分钟）/0.1%PBS-Tween渗透固定20分钟的Raji细胞中，该抗体发出阳性信号。

       

    • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      Raji（人类Burkitt淋巴瘤）细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析用纯化的ab52922标记HLA A（1/100）。细胞用4%多聚甲醛固定，并用0.1%Triton X-100渗透。约150077，Alexa Fluor®用488-结合羊抗兔IgG（1/1000）作为二级抗体。DAPI（蓝色）用作核染色。约7291、小鼠抗微管蛋白（1/1000）和ab150120型，Alexa Fluor®还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG（1/1000）。

      对照1：一级抗体（1/100）和二级抗体，ab150120型，Alexa Fluor®594-共轭山羊抗鼠IgG（1/500）。

      控制2：约7291（1/1000）和二级抗体，约150077，Alexa Fluor®488-共轭山羊抗兔IgG（1/500）。

    • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      所有车道：1/5000稀释度的抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）（纯化）

      车道1：20µg的THP-1细胞裂解液
      车道2：A549细胞裂解液1/20稀释

      次要
      所有车道：山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）(ab97051型)1/1000稀释（山羊抗狂犬病IgG，（H+L），过氧化物酶结合）

      预测的带宽大小：41千Da



      封闭缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。
      稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

    • 免疫沉淀-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫沉淀-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      ab52922（纯化）在1/20免疫沉淀HLA A的THP-1全细胞裂解液中。输入中存在10 ug细胞裂解物。对于western blotting，一种用于IP检测试剂的HRP-共轭Veriblot(阿布131366)（1/10000）用于检测。兔单克隆IgG(约172730)被使用之前第128913页作为负极控制（3号车道）。

      封闭缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

      稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

    • 流式细胞术（细胞内）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      流式细胞术（细胞内）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      标记HLA A的Raji细胞的细胞内流式细胞术分析，纯化的ab52922为1/40（红色）。细胞用2%多聚甲醛固定。以FITC-偶联山羊抗兔IgG（1/500）作为二级抗体。黑色-同位素对照，兔单克隆IgG。蓝色-未标记对照，细胞未与初级和次级抗体孵育。 

       

       

    • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      未纯化ab52922染色MCF7细胞的ICC/IF图像。细胞经4%甲醛固定（10分钟），然后在1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时，以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后将细胞与抗体（ab52922，5µg/ml）在+4°C下孵育过夜。二级抗体（绿色）为Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG（H+L），以1/1000稀释度使用1h。Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜（红色）1小时。采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核（蓝色）进行染色。

    • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      1/2000稀释（纯化）的抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）+20µg的HL-60细胞裂解液

      次要
      山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）(ab97051型)1/1000稀释（山羊抗狂犬病IgG，（H+L），过氧化物酶结合）

      预测的带宽大小：41千Da



      封闭缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。
      稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

    • Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      Western blot-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      1/10000稀释的抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）+10µg的Raji细胞裂解液

      次要
      羊抗兔IgG HRP在1/2000稀释度下结合

      预测的带宽大小：41千Da
      观察到的频带大小：41千Da

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）这张图片由一位匿名的Abreview提供

      ab52922通过免疫组织化学染色人类扁桃体组织切片中的HLA A（IHC-P-多聚甲醛固定，石蜡包埋切片）。用甲醛固定组织并用3%H封闭2哦2在25°C下保持10分钟；抗原回收是在pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液中通过热调解进行的。将样品与一级抗体（1/3000）在25°C下孵育20分钟。未稀释的HRP结合山羊抗兔IgG多克隆用作二级抗体。

      参见Abreview

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      Ab52922 1/250稀释染色人扁桃体；石蜡包埋。

    • 免疫沉淀-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      免疫沉淀-抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

      ab52922（纯化）1/20免疫沉淀HLA A于A549全细胞裂解液中。输入中存在10 ug细胞裂解物。对于western blotting，一种用于IP检测试剂的HRP-共轭Veriblot(阿布131366)（1/10000）用于检测。兔单克隆IgG(约172730)被使用之前第128913页作为负极控制（3号车道）。

      封闭缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

      稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。

    • 抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）
      抗-HLA A抗体[EP1395Y]（ab52922）

    实验方案

    据我们所知，本产品不需要定制协议。请尝试下面列出的标准协议，并告诉我们您的进展情况。

    单击此处查看一般协议

    文献(96)

    发表研究结果有使用ab52922号？请让我们知道，以便我们可以引用本数据表中的参考文章。

    ab52922中国。

    • 万Y等。 金黄色葡萄球菌感染伤口模型中胡桃醌的抗菌活性。 国际分子科学杂志24：不适用（2023年）。公共医学：36835350
    • 海伦E等。 转录因子NKX2-1驱动癌症中丝氨酸和甘氨酸合成成瘾。 英国癌症杂志128:1862-1878 (2023).公共医学：36932191
    • 周J等。 免疫检查点分子VTCN1/B7-H4在人类滋养层细胞胚胎干细胞衍生模型中引导分化并抑制促炎反应和MHC I类表达。 前内分泌（洛桑）14:1069395 (2023).公共医学：37008954
    • 武井J等。 肿瘤融合树突状细胞疫苗治疗新诊断胶质母细胞瘤患者的预后生存生物标志物。 癌症免疫疗法72:3175-3189 (2023).公共医学：37382632
    • 詹立等。 LC3和NLRC5相互作用抑制子宫内膜癌中NLRC5介导的MHC I类抗原提呈途径。 癌症快报529:37-52 (2022).公共医学：34974132
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    1-5属于5 Abreviews或问答

    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）检测抗-HLA A抗体[EP1395Y]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）
    样品
    人体组织切片（扁桃体）
    抗原检索步骤
    热介导-使用的缓冲液/酶：Tris-EDTA pH9
    渗透作用
    不
    规范
    Tonsil公司
    阻塞步骤
    BSA作为阻断剂30分钟·浓度：1%·温度：RT°C
    固定的
    10%NBF
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Vicki Shone女士

    已验证客户

    提交于 2022年6月10日

    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）检测抗-HLA A抗体[EP1395Y]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）
    样品
    人体组织切片（扁桃体）
    抗原检索步骤
    热介导-所用缓冲液/酶：EDTA pH 9
    渗透作用
    不
    规范
    Tonsil公司
    阻塞步骤
    Dako Protein Block X0909作为阻断剂15分钟·浓度：0.25%·温度：25°C
    固定的
    甲醛
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    阿曼达·伯内特夫人

    已验证客户

    提交于 2018年12月20日

    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）检测抗-HLA A抗体[EP1395Y]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）
    样品
    人类组织切片（人类白血病异种移植到NGS小鼠）
    抗原检索步骤
    热介导-使用的缓冲液/酶：柠檬酸盐pH6
    渗透作用
    是-吐温-20
    规范
    人白血病异种移植于NGS小鼠
    阻塞步骤
    BSA作为阻断剂40分钟·浓度：1%·温度：RT°C
    固定的
    甲醛
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Enrico Radaelli博士

    已验证客户

    提交于 2016年6月13日

    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）检测抗-HLA A抗体[EP1395Y]

     杰出的
    Abreviews公司
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    应用程序
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）
    样品
    人体组织切片（NSCLC）
    抗原检索步骤
    无
    渗透作用
    不
    规范
    非小细胞肺癌
    阻塞步骤
    Zytomed Systems HRP-聚合物封闭剂作为封闭剂5分钟·浓度：100%·温度：25°C
    固定的
    HOPE放大
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    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Abcam用户社区

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    提交于 2015年10月23日

    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）检测抗-HLA A[EP1395Y]抗体

     杰出的
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    应用程序
    免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）
    阻塞步骤
    H2O2作为阻断剂10分钟·浓度：3%·温度：25°C
    抗原检索步骤
    热介导-使用的缓冲液/酶：柠檬酸ph6，100C，20分钟
    样品
    人体组织切片（扁桃体）
    规范
    扁桃体
    渗透作用
    不
    固定的
    甲醛
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    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

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    提交于 2013年10月23日

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