主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 组蛋白H3(二甲基K4)-ChIP级兔单克隆抗体[Y47] 适用于:ChIP、ChIP排序、ChIC/CUT&RUN-seq、WB、IHC-P、ICC/IF、流周期(内部)、IP 反应对象:小鼠、大鼠、鸡、牛、人、非洲绿猴

相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 中国 [Y47]至组蛋白H3(二甲基K4)-ChIP级 -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体仅检测赖氨酸4上二甲基化的组蛋白H3。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、鸡、牛、人、非洲绿猴 预测可用于: 绵羊、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、猴子、斑马鱼、哺乳动物、水稻 -
免疫原 人类组蛋白H3 aa 1-100(二甲基K4)内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:HeLa、HEK-293、SH-SY5Y、C6 L6、NIH/3T3、COS-1、UMNSAH/DF-1和MDBK细胞裂解物。 ICC/IF:HepG2细胞。 流式细胞周期(内部):HeLa和HepG2细胞。 IHC-P:人宫颈癌、小鼠结肠和大鼠脾组织。 ChIP:由Hela细胞制备的染色质,ALDO ChIP引物对 约269260 . ChIP-seq:由Hela细胞制备的染色质。 IP:Hep-G2细胞。 ChIC/CUT&RUN-seq:HeLa细胞。
-
常规说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存温度为-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 Y47年 -
同种型 免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
-
替代版本 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
||
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
|
|
|
靶标
-
功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩到染色质中,限制了DNA进入需要DNA作为模板的细胞机制。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期非常重要,因为它能够在外界刺激(如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射)后转录基因,并导致基因激活,如c-fos和c-jun。 与基因激活相关的Ser-11(H3S10ph)磷酸化可防止Lys-10(H3K9me)的甲基化,但有助于H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
查看所有内容 -
别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
查看所有内容
图片
-
从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 ChIP采用10 7 细胞和4µg抗-Histone H3(二甲基K4)抗体[Y47]-ChIP级(ab32356)。 ChIP DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,深度为3000万读。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
根据Abcam X-ChIP协议从HeLa细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab32356(红色)和20µl抗兔IgG琼脂糖珠进行ChIP。 将2μg兔正常IgG添加到珠子对照品中(灰色)。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Sybr green方法)定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 使用30µg染色质和4µg抗-Histone H3(二甲基K4)抗体[Y47]-ChIP等级(ab32356)进行ChIP。 ChIP DNA在Illumina NextSeq 500上测序,深度为3000万读。 ChIP-Seq验证由加利福尼亚州卡尔斯巴德的Active Motif执行。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
所有车道: 抗-Histone H3(二甲基K4)抗体[Y47]-ChIP等级(ab32356),1/10000稀释(纯化) 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: SH-SY5Y(人骨髓神经母细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 车道4: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 15千Da 附加频段位于: 17千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 5秒 -
HepG2细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析,用稀释度为1/1000的纯化ab32356标记组蛋白H3(二甲基K4)。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 这些细胞与 约7291 ,小鼠抗微管蛋白(1/1000)使用 约150120 ,Alexa Fluor ® 594-结合羊抗鼠IgG(1/1000)作为二级抗体。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 对照1:一级抗体(1/1000)和二级抗体, 约150120 ,一种Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/1000)。 -
用稀释1/800的纯化ab32356对人类宫颈癌组织标记组蛋白H3(二甲基K4)进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用Tris/EDTA缓冲液pH9进行抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG H&L作为二级抗体(1/500)。 苏木精反染。 -
用纯化的ab32356在1/150(红色)标记组蛋白H3(二甲基K4)的HeLa细胞的细胞内流式细胞术分析。 用80%甲醇固定细胞。 Alexa荧光笔 ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG( 约172730 ). 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
所有车道: 抗-Histone H3(二甲基K4)抗体[Y47]-ChIP等级(ab32356),1/2000稀释(纯化) 车道1: L6(大鼠骨骼肌细胞系)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 3号车道: COS-1(非洲绿猴肾成纤维细胞样细胞系)全细胞裂解物 车道4: UMNSAH/DF-1(转化鸡胚成纤维细胞系)全细胞裂解物 车道5: MDBK(牛肾细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5秒 -
未纯化ab32356染色HepG2细胞的ICC/IF图像。 将细胞100%甲醇固定(5分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸的0.1%PBS吐温中孵育1小时,以使细胞透化并阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab32356,5µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)是山羊 防兔DyLight®488 (IgG-H&L,预吸附)( 约96899 )以1/250的稀释度使用1h。 Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜(红色)1小时。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 -
用稀释1/800的纯化ab32356对小鼠结肠组织标记组蛋白H3(二甲基K4)进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用Tris/EDTA缓冲液pH9进行抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG H&L作为二级抗体(1/500)。 苏木精反染。 -
大鼠脾脏组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析,用稀释度为1/800的纯化ab32356标记组蛋白H3(二甲基K4)。 使用Tris/EDTA缓冲液pH9进行抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG H&L作为二级抗体(1/500)。 苏木精反染。 -
重叠直方图显示HeLa细胞用未纯化ab32356染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32356,1/100稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是山羊抗兔DyLight ® 488(IgG;H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (187)
Yung WS公司 等。 启动诱导的组蛋白修饰改变调节大豆在盐胁迫下的转录反应。 J工厂 109:1575-1590 (2022). 公共医学:34961994 李伟 等。 4,5-二甲氧基斑蝥素-6-酮是一种新型LSD1抑制剂,可抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡和凋亡。 癌细胞Int 22:32 (2022). 公共医学:35042538 Whetstine JR和Van Rechem C公司 一种基于细胞分选的细胞周期小规模ChIP测序协议。 STAR协议 3:101243 (2022). 公共医学:35310076 吴毅 等。 USP7通过稳定弥漫性大B细胞淋巴瘤中的MLL2和WDR5维持积极的表观遗传程序。 细胞生物化学功能 40:379-390 (2022). 公共医学:35411950 曹D 等。 3,4‑二羟基苯乙酮通过调节Nrf2/HO‑1通路减轻氧化应激诱导的HUVEC损伤。 分子医学代表 25:不适用(2022年)。 公共医学:35475506