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使用敲除细胞株进行验证重组拉布MAb

重组抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

评论(11)问答（8）参考文献（68）
Western blot-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫沉淀-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 流式细胞术（细胞内）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • Western blot-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • ChIC/CUT&RUN测序-抗HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
  • 抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

主要功能和细节

  • 重组生产（无动物），实现高批次一致性和长期供应安全
  • 兔单克隆[Y461]到HDAC2
  • 适用于：WB、IHC-P、ICC/IF、IP、Flow Cyt（Intra）、ChIC/CUT&RUN-seq
  • 敲除已验证
  • 反应对象：小鼠、大鼠、人类

共轭标志相关共轭物和制剂

Alexa Fluor®488型 Alexa Fluor®568公司 Alexa Fluor®647型 无运营商 人力资源计划 体育课

概述

  • 产品名称

    抗-HDAC2抗体【Y461】
    参阅全部 HDAC2型一抗

  • 描述

    兔单克隆抗体[Y461]至HDAC2

  • 宿主

    兔子

  • 经测试应用

    适用于:工作分解结构,IHC-P公司,国际商会/国际单项体育联合会,IP（IP）,流动周期（内部）,ChIC/切割和运行顺序更多详细信息

  • 种属反应性

    与反应:老鼠、老鼠、人

  • 免疫原

    合成肽。此信息为Abcam和/或其供应商专有。

  • 阳性对照

    • WB：HAP1、A431、Hela和K562细胞裂解液和大鼠脑组织匀浆。IHC-P：人类乳腺癌和大鼠脊髓组织。ICC/IF:MCF-7和野生型HAP1细胞。流式细胞仪（内部）：HeLa细胞。ChIC/CUT&RUN-seq:K562细胞。

  • 常规说明

    该产品是一种重组单克隆抗体，具有以下优点：

    • -高批次一致性和再现性
    • -提高敏感性和特异性
    • -长期供应安全
    • -无动物制作
    有关更多信息请看这里.

    我们的RabMAb®该技术是一种基于杂交瘤的专利技术，用于制备兔单克隆抗体。有关我们专利的详细信息，请参阅拉布MAb®专利.

    我们一直在努力确保为客户提供一流的抗体。由于这项工作，我们很高兴现在能够以纯化的形式提供这种抗体。我们正在更新数据表。纯化格式在我们的产品标签上指定为“PUR”。如果您对此更新有任何疑问，请联系我们的科学支持团队。

性能

应用

Abpromise担保

阿布诺瓦™承诺保证使用ab32117型于以下的经测试应用

“应用说明”部分 下显示的仅为推荐的起始稀释度；实际最佳的稀释度/浓度应由使用者检定。

应用 抗体评论 说明
工作分解结构 (9)
1/2000。预测分子量：55 kDa。
IHC-P公司
以取决于分析的浓度使用。在开始IHC染色方案之前，用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。

以1:1500稀释度纯化ab32117。
国际商会/国际单项体育联合会
1/250 - 1/500.
IP（IP）
1/60.
流动周期（内部）
1/60 - 1/100.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。
ChIC/切割和运行顺序
以取决于分析的浓度使用。
说明
工作分解结构
1/2000。预测分子量：55 kDa。
IHC-P公司
以取决于分析的浓度使用。在开始IHC染色方案之前，用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。

以1:1500稀释度纯化ab32117。
国际商会/国际单项体育联合会
1/250 - 1/500.
IP（IP）
1/60.
流动周期（内部）
1/60 - 1/100.

约172730-兔单克隆IgG适合用作该抗体的同型对照。
ChIC/切割和运行顺序
以取决于分析的浓度使用。

靶标

  • 功能

    负责核心组蛋白（H2A、H2B、H3和H4）N末端赖氨酸残基的脱乙酰化。组蛋白脱乙酰化为表观遗传阻遏提供标签，并在转录调控、细胞周期进展和发育事件中发挥重要作用。组蛋白脱乙酰酶通过形成大型多蛋白复合物发挥作用。
    通过与MAD、SIN3、YY1和N-COR结合形成转录抑制复合物。在DNA复制的晚期S期与DNMT1在其他由DNMT1、DMAP1、PCNA、CAF1组成的转录抑制复合物中相互作用。去乙酰化TSHZ3并调节其转录阻遏物活性。

  • 组织特异性

    广泛表达；脑和肺中含量较低。

  • 序列相似性

    属于组蛋白脱乙酰酶家族。HD 1型亚家族。

  • 翻译后修饰

    通过GAPDH进行S-亚硝基化。在神经元中，Cys-262和Cys-274处的S-硝基化不影响酶活性，但消除染色质结合，导致组蛋白乙酰化增加，并激活与神经元发育相关的基因。在胚胎皮层神经元中，S-硝基化调节树突生长和分支。

  • 细胞定位

    核心。
  • UniProt提供的信息

  • 数据库链接

    • 别名

      • D10Wsu179e抗体
      • HD 2抗体
      • HD2抗体
      • HDAC 2抗体
      • Hdac2抗体
      • HDAC2_人类抗体
      • 组蛋白脱乙酰酶2（HD2）抗体
      • 组蛋白脱乙酰酶2抗体
      • OTTHUMP00000017046抗体
      • OTTHUMP00000227077抗体
      • OTTHUMP00000227078抗体
      • RPD3抗体
      • 转录调节蛋白同源物RPD3抗体
      • YAF1抗体
      • YY1相关因子1抗体
      • YY1转录因子结合蛋白抗体
      • Yy1bp抗体
      查看所有内容

    图片

    • Western blot-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      Western blot-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      所有车道：抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117），1/10000稀释（纯化）

      车道1：HeLa（人宫颈腺癌上皮细胞）全细胞裂解物
      车道2：小鼠脑裂解物
      3号车道：大鼠脑裂解物

      次要
      所有车道：山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）(ab97051型)稀释1/20000

      预测的带宽大小：55千帕

    • 免疫沉淀-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫沉淀-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      在HeLa全细胞裂解液中以1:20稀释度（0.5µg）纯化ab32117免疫沉淀HDAC2。
      通道1（输入）：HeLa（人宫颈腺癌上皮细胞）全细胞裂解液10µg。
      通道2（+）：ab32117+HeLa全细胞裂解物。
      通道3（-）：兔单克隆IgG(约172730)而不是约32127HeLa全细胞裂解液。
      IP检测试剂VeriBlot（HRP）(阿布131366)（1:5000稀释）用于Western blotting。
      阻塞缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。
      稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。
      观察到的频带大小：kDa

    • 流式细胞术（细胞内）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      流式细胞术（细胞内）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      以1:20稀释度（5µg/ml）纯化ab32117标记HDAC2的K-562（人类慢性粒细胞白血病淋巴母细胞）细胞的流式细胞术分析（红色）。细胞用4%多聚甲醛固定，用90%甲醇渗透。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor®488，约150081)在1:2000时使用二级抗体。同位素对照-兔单克隆IgG（黑色）。未标记对照-未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞（蓝色）。

    • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      用纯化的ab32117在1:50稀释度（2.1µg/ml）下标记HDAC2的HeLa（人宫颈腺癌上皮细胞）细胞的免疫细胞化学分析。细胞固定在4%的多聚甲醛中，并用0.1%的tritonX-100渗透。用Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物（Alexa Fluor®594）1:200（2.5µg/ml）对细胞进行复染。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor®488，约150077)以1:1000（2µg/ml）稀释度作为二级抗体。DAPI（蓝色）用作核染色。用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      对大鼠睾丸组织切片进行免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析，用1:1500稀释度（0.071µg/ml）的纯化ab32117标记HDAC2。使用Bond进行热介导抗原检索™ 表位检索溶液2（pH 9.0）。用苏木精对组织进行复染。兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB(约209101)二级抗体用1:0稀释。以PBS代替一抗作为阴性对照

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析小鼠睾丸组织切片，用1:1500稀释度（0.071µg/ml）的纯化ab32117标记HDAC2。使用Bond进行热介导抗原检索™ 表位检索溶液2（pH 9.0）。用苏木精对组织进行复染。兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB(约209101)二级抗体用1:0稀释。以PBS代替一抗作为阴性对照

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      用1:1500稀释度（0.071µg/ml）的纯化ab32117标记HDAC2的人睾丸组织切片的免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析。使用Bond进行热介导抗原检索™ 表位检索溶液2（pH 9.0）。用苏木精对组织进行复染。兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB(约209101)二级抗体用1:0稀释。以PBS代替一抗作为阴性对照

    • 免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      用1:1500稀释度（0.071µg/ml）纯化ab32117标记HDAC2的人乳腺癌组织切片的免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析。使用Bond进行热介导抗原检索™ 表位检索溶液2（pH 9.0）。用苏木精对组织进行复染。兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB(约209101)二级抗体用1:0稀释。以PBS代替一抗作为阴性对照

    • Western blot-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      Western blot-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      车道1：野生型HAP1全细胞裂解物（20µg）
      车道2：HDAC2敲除HAP1全细胞裂解物（20µg）
      3号车道：A431全细胞裂解物（20µg）
      车道4：Hela全细胞裂解物（20µg）

      1-4车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-在60 kDa下观察到ab32117。红色-装载控制，约8245，在37 kDa下观察到。

      当使用HDAC2敲除样品时，ab32117显示出与HDAC2特异性反应。野生型和HDAC2基因敲除样品经过SDS-PAGE。ab32117和约8245（小鼠抗GAPDH负荷控制）分别在1/2000和1/10000的4°C下培养过夜。在成像前，用800CW山羊抗兔和680CW山羊抗鼠二级抗体在室温下以1/10000稀释1小时制备印迹。

    • 免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      免疫细胞化学/免疫荧光-抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      ab32117染色野生型HAP1细胞中的HDAC2（顶部面板）和HDAC2敲除HAP1的细胞（底部面板）。细胞用100%甲醇固定（5分钟），用0.1%Triton X-100渗透5分钟，然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。然后用ab32117以1/250的稀释度培养细胞约195889年以1/250稀释度（以伪红色显示）在+4°C下过夜，然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体（Alexa Fluor®488）进一步孵育1小时(约150081)浓度为2μg/ml（以绿色显示）。核DNA用DAPI标记为蓝色。

      使用共焦显微镜（Leica-Microsystems，TCS SP8）拍摄图像。

    • ChIC/CUT&RUN测序-抗HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      ChIC/CUT&RUN测序-抗HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

      使用ChIC/CUT&RUN pAG-MNAse执行CUT&RUN约285373，2.5 x 105K562（人类慢性粒细胞白血病淋巴细胞系）细胞和5µg ab32117[Y461]。所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序，测序深度为1000万读。

      可以下载映射读取的其他屏幕截图在这里.

    • 抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）
      抗-HDAC2抗体[Y461]（ab32117）

    实验方案

    据我们所知，本产品不需要定制协议。请尝试下面列出的标准协议，并告诉我们您的进展情况。

    单击此处查看一般协议

    文献(68)

    发表研究结果有使用ab32117型？请让我们知道，以便我们可以引用本数据表中的参考文章。

    ab32117型被引用在 68文献中.

    • Horisawa-Takada Y公司等。 减数分裂特异性ZFP541阻遏物复合物促进小鼠精子发生过程中减数分裂前期的发育进程直至完成。 国家公社12:3184 (2021).公共医学：34075040
    • 罗L等。 SIN3A通过调节CCNB1表达调节猪早期胚胎发育。 前电池开发生物9:604232 (2021).公共医学：33692994
    • 王Z等。 HDAC2与microRNA-503-5p相互作用调节骨关节炎中的SGK1。 关节炎研究与治疗23:78 (2021).公共医学：33750441
    • 林毅（Lin Y）等。 环境富集意味着GAT-1是中风恢复的潜在治疗靶点。 治疗诊断科技11:3760-3780 (2021).公共医学：33664860
    • 徐莉（Xu L）等。 缺氧后处理条件下H3K14高乙酰化介导的c-Myc结合miR-30a-5p基因启动子保护衰老心肌细胞免受缺氧/复氧损伤。 分子医学代表23：不适用（2021年）。公共医学：33880587
    查看此产品的所有出版物

    客户评价及客户问答

    全部显示 评价 问答
    提交评价 提交问题

    1-10属于19 Abreviews或问答

    抗-HDAC2抗体免疫组织化学（冰冻切片）综述[Y461]

     很好
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    免疫组织化学（冰冻切片）
    样品
    小鼠组织切片（HF）
    渗透作用
    是-PBS-TWEEN 0.05%
    规范
    高频
    阻塞步骤
    血清作为阻断剂2小时零分钟·浓度：10%·温度：25°C
    固定的
    甲醛
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Abcam用户社区

    已验证客户

    提交于 2018年2月28日

    抗-HDAC2抗体的Western blot检测[Y461]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    蛋白质印迹
    样品
    人细胞裂解物-全细胞（食道）
    凝胶运行条件
    非还原非变性（本机）
    装载量
    40微克
    规范
    食管
    阻塞步骤
    牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：37°C
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Abcam用户社区

    已验证客户

    提交于 2016年9月5日

    抗-HDAC2抗体的Western blot检测[Y461]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    蛋白质印迹
    样品
    小鼠组织裂解物-整体（肺匀浆）
    凝胶运行条件
    减少变性
    装载量
    25微克
    规范
    肺匀浆
    阻塞步骤
    牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：RT°C
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Abcam用户社区

    已验证客户

    提交于 2015年6月25日

    抗-HDAC2抗体的Western blot检测[Y461]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    蛋白质印迹
    样品
    人细胞裂解物-全细胞（牙周韧带成纤维细胞）
    凝胶运行条件
    减少变性（7.5%）
    装载量
    20微克
    规范
    牙周韧带成纤维细胞
    阻塞步骤
    牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：RT°C
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Abcam用户社区

    已验证客户

    提交于 2015年6月15日

    抗-HDAC2抗体的Western blot检测[Y461]

     杰出的
    Abreviews公司
    abreview图像
    应用程序
    蛋白质印迹
    装载量
    20微克
    凝胶运行条件
    减少变性（4-12%凝胶）
    样品
    大鼠组织裂解物-核（脑组织匀浆，P1和P2组分）
    规范
    脑组织匀浆、P1和P2组分
    阻塞步骤
    牛奶作为封闭剂1小时零分钟·浓度：5%·温度：21°C
    阅读更多信息
    审稿人收到了Abcam忠诚度计划的奖励，感谢他提交了这份Abreview，并帮助科学界做出了更明智的决定。

    Abcam用户社区

    已验证客户

    提交于 2014年1月31日

    问题


    关于HDAC2抗体，详情如下。
    我们在#####购买了抗体，购买编号为######
    我想要一种替代抗体。
    一旦我们的显微镜摄像头修复好，我就能发送抗体工作和不工作的照片。
    谨致问候

    阅读更多信息
    答案

    感谢您确认这些细节并给予合作。所提供的细节使我们能够密切监控我们产品的质量。

    很抱歉，此产品没有达到数据表中所述的性能，并为由此带来的不便感到抱歉。根据要求，我已免费更换订单号为1211207的产品。

    要检查订单状态，请联系我们的客户服务团队并参考此号码。

    请注意，我们的Abpromise保修也包括免费更换小瓶。如果您仍然遇到困难，或者如果您有任何其他问题，请毫不犹豫地告诉我们。

    我祝你在研究方面好运。

    阅读更多信息

    问题

    当前的小瓶ab32117不工作。过去的命运起了作用。人脑样本。
    IHC-P无染色，尝试1:200至1:500
    WB非常微弱，尝试1:100到1:200

    阅读更多信息
    答案

    谢谢你今天下午的电话。我很抱歉听到ab32117的当前批次对您的效果不太好。

    我很感激你花时间在这些实验上，但遗憾的是，结果没有成功。由于购买的第一个小瓶在相同的实验中效果良好，所以在这种情况下，您似乎很遗憾收到了一个坏的小瓶。

    我想提供免费更换或信用票据作为补偿（前提是该产品是在过去6个月内购买的）。为了安排，如果您能确认您的订单号和购买日期，我将不胜感激？

    如果您能提供任何有效和无效的小瓶图像，我也将不胜感激。这将对我们的质量监控和调查非常有帮助。

    感谢您的持续合作。我期待着收到您的详细信息，了解您希望如何继续。

    阅读更多信息

    问题

    全血可以用于免疫印迹吗？

    阅读更多信息
    答案

    谢谢你今天的电话。

    目前，我还没有找到在Western blot中使用全血的方案。我发现的一些资料（链接如下）表明，全血、红细胞和白细胞/血小板中血红蛋白和其他蛋白质的高含量与抗体结合。

    http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/41351.html

    http://www.biomedcentral.com/1472-6890/11/9

    你想分析一种特殊的细胞类型吗？我也许能在Western blot中找到分析这些细胞的参考。

    我希望这些信息会有用，但如果您还有其他问题，或者我们还有什么可以为您做的，请告诉我。

    阅读更多信息

    问题

    使用Ripa缓冲液的正常裂解产物产生相同的条带！

    我会设法找到另一个阳性对照。

    最美好的祝福，

    阅读更多信息
    答案

    谢谢你的邮件。我期待很快收到结果。

    让我知道该抗体是否与正常阳性对照裂解物显示多条带。

    阅读更多信息

    问题

    非常感谢你的帮助！
    -制备核裂解物时是否添加了蛋白酶抑制剂？你知道药盒里有没有蛋白酶抑制剂吗？
    我没有添加任何蛋白酶抑制剂，因为试剂盒中包含一种乳脂抑制剂混合物。
    -在什么温度下，用样品缓冲液（LDS）加热提取物，加热多长时间？
    样品在95℃下用DTT变性5分钟。
    谢谢！

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    答案

    非常感谢您的电子邮件。

    我再次彻底检查了方案，我觉得很好。核提取试剂盒也有蛋白酶抑制剂，所以这些也不成问题。

    根据你的反馈，抗体在免疫组织化学中表现良好，所以目前我对多条带的原因不太确定。不幸的是，我们也没有特定于老鼠的图像，所以很抱歉，我无法对结果进行任何比较。

    我建议使用大鼠背角组织的标准裂解物（RIPA缓冲液裂解）和K562细胞裂解物作为阳性对照。通过这种方式，您可以比较数据表上的数据以及相关出版物上的数据。

    我相信抗体会好的。如果在尝试阳性对照后仍有多个波段没有消失，请告诉我，我很乐意进一步协助。

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