重组抗葡萄糖转运蛋白GLUT1抗体[EPR3915]（ab115730）

1-2车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-约196357在54 kDa时观察到。红色-装载控制，约8245，在37 kDa下观察到。

约196357在野生型A549细胞中，SLC2A1基因敲除细胞在预期MW时信号丢失，表明可以识别。在野生型和敲除型细胞中观察到额外的交叉反应带。对野生型和SLC2A1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。Ab196357和约8245（小鼠抗GAPDH负荷对照）分别在4°C、1μg/ml和1/20000稀释度下培养过夜。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye®800CW）预吸收液开发印迹ab216773号和山羊抗鼠IgG H&L（IRDye®680RD）预吸收床约216776二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。

人类KS肿瘤中KSHV感染细胞中GLUT1和GLUT3下调

LANA和GLUT1双重免疫荧光检测的代表性图示，或在正常人皮肤切片和卡波西肉瘤（KS）肿瘤切片中。组织用仿甲醛和石蜡包埋固定。

正常舌上皮和舌癌中谷氨酸1的免疫组织化学表达。淋巴细胞的表达量最大（左上下面板中的箭头）。在正常口腔上皮中，谷氨酸1在基底细胞和棘细胞中弱表达（左上图）。在OSCC中，谷氨酸1上调，其表达水平与淋巴细胞相当（左下面板和右下面板）。比例尺，100μm。

注：谷氨酸1=SLC2A（同一目标的替代名称）。

暴露时间

车道1至2：10秒
车道3至4：30秒

我们建议不要在裂解后煮沸样品以获得所需的WB谱带。

ab115730染色野生型A549细胞中的SLC2A1，SLC2A1敲除A549细胞呈阴性表达。细胞用100%甲醇固定（5分钟），用0.1%Triton x-100渗透5分钟，然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。然后在+4°C下用1μg/ml的ab115730和约7291，小鼠单克隆[DM1A]以0.5μg/ml的浓度作用于α-管蛋白。然后将细胞与约150081、山羊抗兔IgG-H&L（Alexa Fluor）多克隆二级抗体^®488），以1/1000稀释度预吸附（以绿色显示）和ab150119号小鼠IgG-H&L（Alexa Fluor）山羊多克隆二级抗体^®647），以1/1000稀释度预吸附（以红色显示）。用DAPI标记细胞核DNA（以蓝色显示）。用共焦显微镜（Leica-Microsystems TCS SP8）采集图像，显示单个共焦切片。

在1/100的工作稀释度下，用纯化的ab115730对HepG2细胞进行免疫荧光染色，并用DAPI进行反染色。次要抗体是Alexa Fluor^®488山羊抗兔(约150077)，稀释度为1/1000。约7291是一种小鼠抗微管蛋白抗体（1/1000），用于染色微管蛋白和ab150120型（Alexa Fluor公司^®594山羊抗鼠软件，1/1000），如右上角面板所示。细胞固定在4%PFA中，并使用0.1%Triton X 100进行渗透。阴性对照显示在底部中间和右侧面板中-对于阴性对照1，使用纯化的ab115730，稀释度为1/500，然后使用Alexa Fluor^®594羊抗鼠抗体(ab150120型)稀释度为1/500。对于阴性对照2，约7291（小鼠抗微管蛋白）以1/500的稀释度使用，然后使用Alexa Fluor^®488羊抗兔抗体(约150077)稀释度为1/400。

Alexa Fluor公司^®488 (ab195359年)和Alexa Fluor^®647 (ab195020年)这个克隆有共轭版本。

重叠直方图显示Jurkat细胞在4%PFA中固定，并用稀释1/40的纯化ab115730染色（红线）。使用的二级抗体是Alexa Fluor^®488只山羊抗兔，稀释度为1/500。兔单克隆IgG用作同型对照（黑线），在没有一级和二级抗体的情况下培养的细胞用作阴性对照（蓝线）

Alexa荧光粉^®488 (ab195359年)和Alexa Fluor^®647 (ab195020年)这个克隆有共轭版本

阻塞缓冲区：5%NFDM/TBST
稀释缓冲液：5%NFDM/TBST

重叠直方图显示未纯化ab115730（红线）染色的HeLa细胞。用80%甲醇固定细胞（5分钟），然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞，以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab115730，1/1000稀释）孵育30分钟。使用的二级抗体是Alexa Fluor^®488山羊抗兔IgG（H+L）(约150077)在22°C下以1/2000稀释30分钟。同型对照抗体（黑线）为兔IgG（单克隆）（1µg/1x10⁶电池）在相同条件下使用。未标记样本（蓝线）也用作对照。使用20mW氩离子激光器（488nm）和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。该抗体在用4%多聚甲醛（10分钟）固定/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的HeLa细胞中发出阳性信号

免疫组织化学法检测石蜡包埋人宫颈癌组织中未经纯化的ab115730，1/250稀释染色葡萄糖转运蛋白GLUT1。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

免疫组织化学法检测石蜡包埋人结肠腺癌组织中未经纯化的ab115730，1/250稀释染色葡萄糖转运蛋白GLUT1。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人类正常肝组织中呈阳性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人类正常乳腺组织中呈阳性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人类正常结肠组织中呈阳性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人肾癌组织中呈阳性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人类骨骼肌组织中呈阴性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人膀胱移行癌组织中呈阳性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。

未纯化的ab115730在人类正常心脏组织中呈阴性染色。

在开始IHC染色方案之前，执行热介导抗原检索。