主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP38Y]到EGFR 适用于:WB、IP、IHC-P、ICC/IF、间接ELISA、流式细胞术(Intra) 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类

相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP38Y]至EGFR -
宿主 兔子 -
特异性 该产品的免疫原是一种合成磷酸肽,对应于人类EGFR的Tyr1068周围的残基。 筛选后,发现克隆“EP38Y”能够识别总EGFR,并且对磷酸化Tyr1068 EGFR没有特异性。 该产品使用A431(人类鳞癌)裂解液在western blot中产生强烈信号,该裂解液自然过度表达EGFR蛋白。 对于内源性EGFR水平较低的细胞系和组织,可能需要优化Western blot条件。 小鼠和大鼠的推荐基于WB结果。 这种抗体可能不适用于小鼠或大鼠样本的IHC。 -
试验 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 ab204282年 ) -
阳性对照 ICC/IF:A431电池。 WB:HeLa、Caco-2和A431细胞裂解物; 大鼠肝脏和小鼠肺部裂解物。 IP:HeLa全细胞裂解物( 约150035 ). 流式细胞仪(内部):A431细胞。 IHC-P:人宫颈癌
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
解离常数 (K) D类 ) -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP38Y系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
美国
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靶标
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功能 受体酪氨酸激酶结合EGF家族配体并激活几个信号级联,将细胞外信号转换为适当的细胞反应。 已知配体包括EGF、TGFA/TGF-alpha、双调节蛋白、表观蛋白/EPGN、BTC/β细胞壁蛋白、表调节蛋白/EREG和HBEGF/肝素结合EGF。 配体结合触发关键细胞质残基上的受体同源和/或异源二聚和自磷酸化。 磷酸化受体招募GRB2等适配蛋白,后者反过来激活复杂的下游信号级联。 激活至少4个主要下游信号级联,包括RAS-RAF-MEK-ERK、PI3激酶-AKT、PLCgamma-PKC和STATs模块。 也可能激活NF-kappa-B信号级联。 还可直接磷酸化其他蛋白质,如RGS16,激活其GTPase活性,并可能将EGF受体信号与G蛋白偶联受体信号耦合。 还磷酸化MUC1并增加其与SRC和CTNNB1/β-catenin的相互作用。 异构体2可能是EGF作用的拮抗剂。 -
组织特异性 普遍表达。 异构体2也在卵巢癌中表达。 -
疾病相关 肺癌 炎症性皮肤和肠道疾病,新生儿,2 -
美国 属于蛋白激酶超家族。 酪氨酸蛋白激酶家族。 EGF受体亚家族。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 Ser-695处的磷酸化是部分的,只有当Thr-693被磷酸化时才会发生。 PRKD1在Thr-678和Thr-693处的磷酸化抑制EGF诱导的MAPK8/JNK1活化。 PTPRJ的去磷酸化可防止内吞并稳定质膜上的受体。 Tyr-1197的自磷酸化由Arg-1199的甲基化刺激,并增强与PTPN6的相互作用。 Tyr-1092和/或Tyr-110的自身磷酸化募集STAT3。 通过PTPN1和PTPN2脱磷。 EGF刺激下的单泛素化和多泛素化; 它不影响酪氨酸激酶活性或信号传导能力,但可能在溶酶体靶向中发挥作用。 多泛素连接主要通过“Lys-63”进行,但也会通过“Lys-48”、“Lys-11”和“Lys-29”进行连接。 OTUD7B的去泛素作用可防止降解。 RNF115和RNF126泛素化。 甲基化。 PRMT5在Arg-1199的甲基化刺激Tyr-1197的磷酸化。 -
细胞定位 分泌膜和细胞膜。 内质网膜。 高尔基体膜。 细胞核膜。 内体。 内体膜。 核心。 作为对EGF的反应,通过高尔基体和内质网从细胞膜转运到细胞核。经配体激活后内吞。 在雌激素激动剂诱导的癌症相关成纤维细胞(CAF)的细胞核中与GPER1共定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1956 人类 Entrez基因: 13649 鼠标 Entrez基因: 24329 老鼠 Omim公司: 131550 人类 瑞士保护银行: P00533 人类 瑞士保护银行: 第01279号 鼠标 尤尼金: 488293 人类 尤尼金: 605083 人类
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别名 禽红细胞白血病病毒癌基因同源抗体 细胞生长抑制蛋白40抗体 细胞增殖诱导蛋白61抗体
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图片
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免疫组化分析中使用ab52894对组织芯片进行抗-EGFR抗体[EP38Y]染色。 本表详细概述了每种测试样本类型的阳性(勾号)和阴性(交叉标记)染色。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)对切片进行热介导抗原检索预处理20分钟。 该切片在室温下与ab52894孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色 -
所有车道: 抗-EGFR抗体[EP38Y](ab52894),1/10000稀释(纯化) 车道1: 大鼠肝裂解物 车道2: 小鼠肺裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 134千帕 观察到的频带大小: 175千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 稀释1/1000的抗-EGFR抗体[EP38Y](ab52894) 车道1: A431细胞裂解物 车道2: MDA-MB-468细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物 车道4: EGFR敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 134千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在175 kDa下观察到ab52894。 红色负载控制, 约130007 在125 kDa时观察到。 ab52894在野生型HeLa中与EGFR反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255385号 (敲除细胞裂解物 约263845 )已使用。 对野生型和EGFR敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab52894和抗V蛋白抗体[VIN-54]( 约130007 )分别以1/1000稀释度和1/2000稀释度在4°C下孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。 -
1/2000稀释(纯化)的抗-EGFR抗体[EP38Y](ab52894)+20µg的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 134千帕 观察到的频带大小: 175千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
未经纯化的ab52894染色的A431(人表皮样癌细胞系)细胞。 细胞在-20°C的100%甲醇中固定5分钟,然后在室温下在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab52894,1/500)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(伪绿色)为山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150081 )在室温下以1/1000稀释度使用1小时。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于在室温下以1/200稀释度标记质膜(伪彩色红色)1小时。 DAPI用于在室温下以1.43µM的浓度染色细胞核(伪彩色蓝色)1小时。 -
用ab52894对1000ng/ml的人EGFR重组蛋白进行ELISA分析。 采用1/2500稀释度的碱性磷酸酶结合亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L)作为二级抗体。 -
在1.0µg/ml的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)裂解液上测试不同批次的ab52894。 每条通道中装载15µg裂解液。 175 kDa下观察到的谱带。 -
所有车道: 抗-EGFR抗体[EP38Y](ab52894),稀释度为1/1000(未净化) 车道1: Caco-2(人大肠腺癌细胞系)细胞裂解物 车道2: A431(人表皮样癌细胞系)细胞裂解物 3号车道: 小鼠皮肤细胞裂解物 车道4: 大鼠皮肤细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 134千帕 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝基纤维素膜上70分钟。 然后将膜封闭一小时,然后与未纯化的ab52894在4°C下在负载对照的存在下孵育过夜 约18058 (小鼠单克隆[SPM227]与文丘林按1:10000稀释)。 在成像前,使用IR标记的山羊抗兔抗体在室温下以1:10000稀释1小时检测抗体结合。 该产品使用A431(人类鳞癌)裂解液在western blot中产生强烈信号,该裂解液自然过度表达EGFR蛋白。 对于内源性EGFR水平较低的细胞系和组织,可能需要优化Western blot条件。 -
用1:100稀释(0.95μg/ml)的纯化ab52894标记EGFR的人宫颈癌组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 ab97051型 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)二级抗体采用1:500稀释。 以PBS代替一抗作为阴性对照。 -
用纯化的ab52894标记EGFR的A431(人表皮样癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用90%甲醇渗透30分钟。 然后在1x PBS/10%正常山羊血清中孵育,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在1/20稀释度(红色)下孵育ab52894 30分钟。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)二级抗体以1/2000稀释度使用。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (300)
罗Z 等。 食管癌β3GNT2相关调控网络的构建与研究。 细胞分子生物学实验 27:8 (2022). 公共医学:35073841 陈毅 等。 TRIP13被确定为肿瘤进展的中心基因,是microRNA-4693-5p的靶点,也是结直肠癌的潜在治疗靶点。 细胞死亡发现 8:35(2022)。 公共医学:35075117 陈Q 等。 丹尼尔银杏的作用机制。 抑制肺腺癌。 基于Evid的补体Alternat Med 2022:5242179 (2022). 公共医学:35190747 查Y 等。 ADAMTS8部分通过激活EGFR依赖通路促进心脏纤维化。 前心血管内科 9:797137 (2022). 公共医学:35224040 de Paiva即时消息 等。 EGFR靶向聚合物胶束对转移性结直肠癌原位移植瘤DNA修复新抑制剂的生物分布和活性。 分子药剂学 19:1825-1838 (2022). 公共医学:35271294